B10BR小鼠永生化黑素细胞系 消化有哪些注意点
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
LS-174T细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
M059J细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维细胞;细胞传代方法:1:6-1:8传代;每周换液2-3次。
Ca9-22细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SV40 MES 13细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
OVCAR4细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Chang liver细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
氧化亚铁杆菌培养基,英文名:Thiobacillus Ferrooxidans Medium,用途:用于氧化亚铁杆菌和其它铁细菌的培养
抗生素检测用培养基Ⅱ,英文名:Antibiotic Examination Medium Ⅱ,用途:用于乳及乳制品中舒巴坦敏感β-内酰胺酶类药物检验
明胶培养基,英文名:Gelatin Medium,用途:用于生化试验(兽药典用)
葡萄糖蛋白胨琼脂,英文名:Dextrose Peptone Agar,用途:用于真菌的检测,选择性添加霉素霉素溶液
YPGA培养基,英文名:Yeast extract Peptone Glucose Medium,用途:用于甘蔗流胶病菌检验
培养细胞真的不难,Z关键几点:1)所有的东西使用Z好的,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,Z近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候Z好给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)Z好的是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
J-111细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HFTF细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞生长特性:贴壁
PLMVEC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
改良高氏合成一号液体培养基,英文名:Gauze’s Synthetic Broth Medium,Modified,用途:用于放线菌的培养
缓冲蛋白胨水(BPW)/缓冲胨水增菌液(BP),英文名:Buffered Peptone Water,用途:用于沙门氏菌、阪崎杆菌的增菌
酵母基酸缺陷型合成琼脂培养基(组酸缺陷),英文名:Yeast Synthetic Drop-out Agar Medium without Histi,用途:用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
小鼠Smad同源物7(Smad7)ELISA试剂盒,英文名:Mouse Smad7 ELISA Kit,规格:48T/96T
人化细胞外信号调节激酶1/2抗体(P-ERK/2)ELISA试剂盒,英文名:Human P-ERK/2 ELISA Kit,规格:48T/96T
人肌酸脱酶(SARDH)ELISA试剂盒,英文名:Human SARDH ELISA Kit,规格:48T/96T
人RAS癌基因家族成员RAB(RAB)ELISA试剂盒,英文名:Human RAB ELISA Kit,规格:48T/96T
人叶酸转运蛋白(FOLT)ELISA试剂盒,英文名:Human FOLT ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠孤腓肽(0-FQ)ELISA试剂盒,英文名:0-FQ ELISA Kit,规格:48T/96T
C2C12细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维细胞样;梭形;细胞传代方法:1:2传代
PAXC-010细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;细胞传代方法:1:3传代,3-4天传1次
根瘤菌培养基YM,英文名:Nodule Bacteria Medium YM,用途:用于根瘤菌的培养
MUG营养琼脂培养基(NA-MUG),英文名:NA-MUG Agar,用途:用于大肠埃希氏菌滤膜法计数
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
脑-心浸萃液态培养基,英文名:Brain-Heart Extraction Liquid Medium,用途:用于粪链球菌验证,也可用于苛养菌的培养
BBM培养基,英文名:Bold’s Basal Medium,用途:用于藻类尤其是绿藻的培养
细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)Z好选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
YPDA培养基,英文名:Yeast Peptone Dextrose Adenine Medium,用途:用于分子生物学实验中酵母菌的培养
MYGP培养基基础,英文名:MYPG Medium Base,用途:用于酵母菌的培养,每升培养基需添加10ml吐温-80
BBM培养基,英文名:Bold’s Basal Medium,用途:用于藻类尤其是绿藻的培养
Slantz and Bartley 培养基,英文名:Slantz and Bartley medium,用途:用于肠球菌、粪链球菌的分离和培养
FRH-0201细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H1963细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:每周换液2次。
细胞形态特性:详见细胞说明书
MV3细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
RPEC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Caki-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2-1:4传代;每周换液2-3次。
FRhK-4细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SCC154细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HS578T细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
A-549细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
N6培养基(不含琼脂),英文名:N6 Medium without Agar,用途:适合于愈伤组织和悬浮细胞培养
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
番茄汁琼脂,英文名:Tomato Juice Agar,用途:用于乳酸菌的培养和计数
匹克氏肉汤基础,英文名:Pick’s Broth Base,用途:用于溶血性链球菌增菌,每50ml添加羊血2.5ml
马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA),英文名:Potato Dextrose Agar Medium,用途:ZG药典2015,用于霉菌和酵母菌计数
【冻存细胞操作】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染),在冻存前1d换液;2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达5×10(7)/ml左右密度,离心,去上清;3)加入配制好的冻存液(培养液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10%二甲基亚砜(DMSO) 或甘油,可使冰点降低,使细胞内水分在冻结前透出细胞外;4)分装于无菌冻存管中,每管加1.5m悬液;5)旋好冻存管并仔细检查,一定要盖紧,做好标记;6)冻存:在特殊的仪器或简易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min时间内,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套,以免液氮冻伤。【复苏细胞操作】1)从罐中取出冻存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不时摇动,使其急速融化,30~60s内完成;3)冻存管用70%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10ml培养液;4)低速离心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培养液洗一次;5)用培养液适当稀释后,装入培养瓶37℃培养,次日更换一次培养液后,继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分,密度应达到10(7)/ml,在融后稀释20倍时,仍能保持5×10(5)/ml数量。
人卵泡抑素样蛋白1(FSTL1)ELISA试剂盒,英文名:Human FSTL1 ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞背景资料:永生化黑素细胞
小鼠转化生长因子β2(TGF-β2)ELISA试剂盒,英文名:Mouse TGF-β2 ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠晚期糖基化终末产物受体(REGE/AGER)ELISA试剂盒,英文名:REGE/AGER ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠巨噬细胞炎性蛋白-4(MIP-4)ELISA试剂盒,英文名:MIP-4 ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠蛋白二化物异构酶前体(PDI)ELISA试剂盒,英文名:PDI ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠促微管蛋白聚合蛋白(TPPP)ELISA试剂盒,英文名:Mouse TPPP ELISA Kit,规格:48T/96T