COS-7SV40转化的非洲绿猴肾细胞系 怎样操作消化会更好

COS-7SV40转化的非洲绿猴肾细胞系 怎样操作消化会更好
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，原因比较复杂，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳；血清使用错误或血清的品质不佳；解冻过程错误；冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心；悬浑细胞误认为死细胞；培养温度使用错误；细胞置于-80℃太久等。建议严格参照ATCC的标准操作规程进行细胞复苏、冻存等工作。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞，其离心速率一般为300×g(约1OOOrpm),5-10分钟，转速过高或离心时间过长都将造成细胞死亡。合适的离心转速是根据相对离心力决定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2，其中r为离心机转轴ZX与离心套管底部内壁的距离；rpm为离心机每分钟的转数；RCF(relative centrifugal force)为相对离心力，以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍数来表示单位。
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细胞生长特性：贴壁生长
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞形态特性：成纤维细胞样
【细胞培养中细菌、霉菌的污染情况总结】细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在高压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！可在培养液中加相应的抗生素处理；霉菌：培养液是清亮的，倒置显微镜下无杂质，37度孵箱培养2-3天，仍清亮，但出现絮状杂质，镜下可见呈细丝状的团状漂浮物，可看到明显的菌丝，细胞仍可生长，但时间长之后，细胞的活力状态变差，用硫酸铜溶液擦拭CO2孵箱内，再把水盘里也加上饱和量的硫酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒磷酸氢二钠高盐液体,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后，可把所有细胞暂时转移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱内一个小时，使其蒸汽弥漫。待的气味消散后，再移入细胞。孵箱应定期清洁(2月左右)，尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是：用84液擦洗－清水擦洗－75%酒精擦洗－紫外灯照。预防霉菌污染，可在培养基里加3u/ml的两性霉素或制霉菌素或D或双抗；但细胞一旦污染，很难挽救，制霉菌素或D或双抗都于事无补，建议舍弃该污染细胞，将环境彻底消毒，如果所有细胞都污染，可能是系统污染，检查一下培养基和器材，如果只是个别污染，可能是操作问题，就要注意操作。
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
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细胞背景资料：此细胞株源自CV-1细胞株，经转染起始点缺失的SV40病毒突变体得到；编码表达野生型T抗原，所以该细胞适合作为需要SV40T抗原表达的载体的转染宿主。该细胞表达T抗原，允许SV40病毒的溶解性生长，支持40℃时温度敏感性A209病毒的复制，支持起始区域缺陷的SV40突变体的复制。因含有SV40病毒的DNA序列，该细胞需要在2级生物安全柜中操作。
几种实验室细胞培养基成分的作用：1)NaHCO3的作用是什么？与CO2一起形成缓冲系统，保持培养基PH值稳定；2)酸钠的作用是什么？酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源，尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源，但是如果没有葡萄糖的话，细胞也可以代谢酸钠。酸钠的贮存液浓度一般为50mM，-20℃保存，培养基中的终浓度为1mM；3)加入HEPES有何好处？培养基中Z常用的Buffer system是碳酸氢盐，它可提供营养，但却在生理PH值条件下会降低缓冲能力。而HEPES是一种很强的Buffer，加入HEPES能使细胞培养基在PH7.2-7.6条件下缓冲能力增强。Hepes的贮存液浓度一般为1M，常温保存。培养基中的终浓度为25mM，即5ml 1M的Hepes加入到200ml完全培养基中；4)酚红的作用是什么？酚红在培养基中被用来作为PH值指示剂：中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时为紫色；5)谷氨酰胺的作用是什么？几乎所有的细胞对谷氨酰胺都有胶高的要求。谷氨酰胺脱掉氨基后，可作为培养细胞的能量来源，参与蛋白质的合成和能量代谢。在缺少谷氨酰胺时，细胞生长不良而死亡。所以，各种培养液中都含有较大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应置-20℃冰冻保存，用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4度冰箱储存两周以上时，应重新加入原来量的谷氨酰胺。试验操作中常配制高浓度(100倍)的谷氨酰胺溶液(1ml/支)，分装使用，-20℃保存。使用时，每支1ml的谷氨酰胺加入到99ml完全培养基中，使其终浓度为2mM培养基。
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细胞传代方法：1：2传代

TE-10细胞系(人食管癌细胞冷藏平台）
TE354T细胞系(人皮肤基底细胞冷藏平台）
MBT-2细胞系(小鼠膀胱癌细胞冷藏平台）
Ethyl sarcosinate hydrochloride
4-Fluoro-DL-phenylalanine
1,3-DiMethyl-2-(2-thienyl)iMidazolidine
3-(4-BroMophenyl)-5-(3-nitrophenyl)-1,2,4-oxadiazole
SodiuM deuteroxide, for NMR, 30 wt% solution in D2O, 99+ atoM % D
NCI-H345细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
SUN-449细胞系(人肝癌细胞冷藏平台）
SKNO-1细胞系(人急性髓系白血病细胞冷藏平台）
SK-LMS-1细胞系(人阴户平滑肌肉瘤细胞冷藏平台）
RD-ES细胞系(人尤因氏肉瘤细胞冷藏平台）
SK-N-DZ细胞系(人成神经瘤细胞冷藏平台）
H1563细胞系(人胚肺细胞冷藏平台）
3-Chloro-4-fluorobenzoic acid
Triisobutylphosphine sulphide
DL-Ornithine
Beta-Bromostyrene, mixture of cis/trans isomers
VINYLOXYTRIMETHYLSILANE
a-253细胞系(人唾液腺肿瘤细胞冷藏平台）
KATOⅢ细胞系(人胃癌细胞冷藏平台）
DOHH-2细胞系(人胸腔积液滤泡ZX母细胞冷藏平台）
WM451细胞系(人黑色素瘤细胞冷藏平台）
LUDLU-1细胞系(人肺癌鳞癌细胞冷藏平台）
GOS-3细胞系(人胶质瘤细胞冷藏平台）
HCC-2935细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台）
hADSCs细胞系(人脂肪间充质干细胞冷藏平台）
HNE3细胞系(人鼻咽癌细胞冷藏平台）
Hs 578T细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台）
SK-RC-42细胞系(人肾癌细胞冷藏平台）
DL-2,3-DiMercapto-1-propanesulfonic acid sodiuM salt Monohydrate
Iodoantipyrine, 99%
9-Fluorenone-1-carboxaMide, 97%
2-FluorothiobenzaMide
Alantolactone
Neuro-2a[N2a,Neuro-2a]细胞系(小鼠神经母细胞冷藏平台）
BHK-21[C-13]细胞系(仓鼠肾成纤维细胞冷藏平台）
3T3-L1细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台）
NCI-H727细胞系(人肺支气管良性肿瘤细胞冷藏平台）
VSC4.1细胞系(大鼠脊髓前角运动神经元瘤细胞冷藏平台）
COLO 205细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台）
1-BOC-5-cyanoindole-3-boronic acid, pinacol ester
4-NitrosodiphenylaMine, 75%, tech.
4-ForMylphenylboronic acid, 97%
Kojic acid
2-Methyl-1-hexene
NCTC clone 929细胞系(小鼠成纤维细胞冷藏平台）
TYK-nu细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台）
TK10细胞系(人肾癌细胞冷藏平台）
SHG44细胞系(人胶质瘤细胞冷藏平台）
SupT1细胞系(人T淋巴瘤细胞冷藏平台）
MEG-01细胞系(人成巨核白血病细胞冷藏平台）
SW 1088[SW-1088]细胞系(人脑星型胶质瘤细胞冷藏平台）
ARPE-19细胞系(人视网膜上皮细胞冷藏平台）
EOC 20细胞系(小鼠小神经胶质细胞冷藏平台）
NCI-H2172细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
HT-29细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台）
SW 1783细胞系(人脑星形胶质细胞冷藏平台）
SHEE细胞系(人永生化食管上皮细胞冷藏平台）
MGC803细胞系(人胃癌细胞冷藏平台）
PC-12(低分化)细胞系(大鼠肾上腺嗜铬细胞冷藏平台）
NEI-H209细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
TE12细胞系(人食道癌肿瘤细胞冷藏平台）
4-amino-3-(trifluoromethoxy)benzonitrile
triethylsilyl trifluoromethanesulphonate
N-(4-chlorobenzyl)propan-1-amine
AIF1 ELISA Kit
SAEC细胞系(羊肺泡上皮细胞冷藏平台）
HEC-251细胞系(人子宫内膜细胞冷藏平台）
SMMC7721细胞系(人肝癌细胞冷藏平台）
FM88细胞系(人黑色素瘤细胞冷藏平台）
FBM细胞系(人胎儿间充质细胞冷藏平台）
3-METHOXYPHENYLACETYL CHLORIDE
Amastatin hydrochloride
6-Fluoro-1H-indole-3-carboxaldehyde
2-Chlorocyclooctanone
Hexanophenone
GAK细胞系(人恶性黑色素瘤细胞冷藏平台）
NCI-H1437细胞系(人肺癌腺癌细胞冷藏平台）
VMR106细胞系(大鼠骨肉瘤细胞冷藏平台）
SMMC7721细胞系(人肝癌细胞冷藏平台）
NCI-H748细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
KATOⅢ细胞系(人胃癌细胞冷藏平台）
BeWo细胞系(人胎盘绒膜癌细胞冷藏平台）
Mouse IL-8 (Interleukin 8) ELISA Kit
Human CDK-4 ELISA Kit
Human IFNα4 ELISA Kit
IL13 ELISA Kit
Antilivin ELISA Kit
TNPO1 ELISA Kit
Human C4b ELISA Kit
Human adenosine deaminase,ADA ELISA Kit
HepG2.2.15细胞系(人肝癌细胞冷藏平台）
OUMS-27细胞系(人软骨肉瘤细胞冷藏平台）
EHEB细胞系(人慢性B淋巴白血病细胞冷藏平台）
GC-2 spd细胞系(小鼠精母细胞冷藏平台）
SJCRH30[RC13,RMS 13,SJRH30]细胞系(人横纹肌肉癌细胞冷藏平台）
MMQ细胞系(大鼠垂体瘤细胞冷藏平台）
Lu-165细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台）
NR8383细胞系(大鼠肺泡巨噬细胞冷藏平台）
NCI-H647[H647]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
CCC-HHM-2细胞系(人胚心肌组织来源细胞冷藏平台）
L-Serine methyl ester hydrochloride
Phenethyltrichlorosilane
N-phthaloyl-L-glutamic acid
ATMA/TMAB ELISA Kit
COLO-679细胞系(人黑色素瘤细胞冷藏平台）
HIT-T15细胞系(仓鼠beta胰岛细胞冷藏平台）
PIG1细胞系(人皮肤黑色素细胞冷藏平台）
BT20细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台）
HIT-T15细胞系(仓鼠beta胰岛细胞冷藏平台）
3-Morpholinopropyl isothiocyanate
(4-ethylphenyl)acetic acid(SALTDATA: FREE)
Homoalanine hydrochloride
Potassium 2-(dimethylamino)ethoxymethyltrifluoroborate
1-BOC-INDOLE
VP267细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台）
GES-1细胞系(人胃粘膜细胞冷藏平台）
FAO细胞系(小鼠肝癌细胞冷藏平台）
PLC-PRF-5细胞系(人肝癌细胞冷藏平台）
SK-OV-3[SKOV-3,SKOV3]细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台）
JVM-3细胞系(人慢性髓细胞冷藏平台）
GDM-1细胞系(人急性粒细胞冷藏平台）
CDK-4 ELISA Kit
Human GP4/CD36 (Platelet Membrane Glycoprotein IV) ELISA Kit
Human monocyte chemotactic protein 3,MCP-3 ELISA Kit
ALPI ELISA Kit
FGF2/bFGF ELISA Kit
CD40L ELISA Kit
Human ARSF ELISA Kit
SHH ELISA Kit
5637(HTB-9)细胞系(人膀胱癌细胞冷藏平台）
PG-4细胞系(猫星形脑胶质细胞冷藏平台）
HRC-99细胞系(人直肠腺癌细胞冷藏平台）
Pt K1(NBL-3)[PTK1]细胞系(袋鼠肾细胞冷藏平台）
TR4912细胞系(人成纤维细胞冷藏平台）
RWPE-1细胞系(人前列腺上皮细胞冷藏平台）
NCI-H2405细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
2,2-Bis(hydroxyMethyl)butyric acid
IsoaMyl nitrite
Gaboxadol Hydrochloride
Methyl 4-broMo-3-fluorobenzoate
p-Isopropylcalix[8]arene, 95%
RWPE2细胞系(人前列腺上皮细胞冷藏平台）
LA-4细胞系(小鼠肺癌细胞冷藏平台）
SNU-620细胞系(人胃癌细胞冷藏平台）
NCI-H520细胞系(人肺鳞癌细胞冷藏平台）
CMEC细胞系(奶牛乳腺上皮细胞冷藏平台）
FRTL-5细胞系(大鼠甲状腺细胞冷藏平台）
NCI-H1435细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
2-(3,4-Dimethoxyphenyl)-5,6,7-trimethoxy-4H-chromen-4-one
tripropylplumbanyl - acetic acid (1:1)
Trimethylethoxysilane
2-AMINO-3-NITROBENZOIC ACID
(R)-(-)-2,2'-Bis(p-toluenesulfonyloxy)-1,1'-binaphthalene
Lu-165细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台）
KYSE30细胞系(人食管鳞癌细胞冷藏平台）
SW1783细胞系(人脑星形细胞冷藏平台）
TMNE细胞系(小鼠鼻咽上皮细胞冷藏平台）
Mv 1 Lu(NBL-7)细胞系(貂肺上皮细胞冷藏平台）
NCI-H1882[H1882]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
Jurkat77细胞系(人T淋巴瘤细胞冷藏平台）
Miapaca2细胞系(人癌肿瘤细胞冷藏平台）
OV3121细胞系(小鼠卵巢颗粒细胞冷藏平台）
KE-39细胞系(人胃癌细胞冷藏平台）
HEL细胞系(人红白细胞冷藏平台）
N-Methyl-d-GlucaMine
N-Boc-3-(3-pyridyl)-L-alanine, 98%
2-Chloropropene, 99%
DibenzenesulfonaMide
TrifluoroMethanesulfonic acid
JVM-3细胞系(人慢性髓细胞冷藏平台）
NCI-H1573[H1573]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
BSC-1细胞系(猴肾细胞冷藏平台）
SJCRH30[RC13]细胞系(人横纹肌肉癌细胞冷藏平台）
L-M(TK-)[LM(tk-),LMTK-]细胞系(小鼠胸腺激酶缺陷细胞冷藏平台）
MRMT-1细胞系(大鼠乳腺癌细胞冷藏平台）
Nepsilon-ForMyl-L-lysine
2-Chloro-5-(trifluoroMethyl)cinnaMic acid
5-Cyanoindole, 99%
SodiuM AntiMonate
1H,1H,11H-Eicosafluoro-1-undecanol
H441细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台）
HCC-2108细胞系(人肺癌腺癌细胞冷藏平台）
BGC823细胞系(人胃腺癌细胞冷藏平台）
NCI-H1963[H1963]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
TPC-1细胞系(人甲状腺乳头状癌细胞冷藏平台）
NCI-H1569细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
Mv 1Lu(NBL-7)细胞系(貂肺上皮细胞冷藏平台）
HLEpiC细胞系(人晶状体上皮细胞冷藏平台）
SNU-475细胞系(人肝癌细胞冷藏平台）
HBVSMC细胞系(人脑血管平滑肌细胞冷藏平台）
PL-45细胞系(人癌细胞冷藏平台）
RL-952细胞系(人子宫内膜腺癌细胞冷藏平台）
PA-TU-8988S细胞系(人癌细胞冷藏平台）
EFM-19细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台）
HCC4006细胞系(人肺癌腺癌细胞冷藏平台）
NCI-H250[H250]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
NCI-H1373细胞系(人肺癌腺癌细胞冷藏平台）
Sodium metaborate tetrahydrate
Hydroxyphenylhydantoin
4-nitrosoresorcinol
OSF ELISA Kit
bEnd.3[BEND3]细胞系(小鼠脑内皮瘤细胞冷藏平台）
NCI-H211[H211]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
3T3D细胞系(人瘤细胞冷藏平台）
K562细胞系(人慢性髓系白血病细胞冷藏平台）
HVT细胞系(人绒毛间叶纤维细胞冷藏平台）
6-Hydroxy-nicotinic acid methyl ester
Cloxacillin Sodium Salt Monohydrate
4-Fluoro-3'-iododiphenyl ether
Benzyl Bromoacetate
4-(9H-Fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-1-methyl-1H-pyrrole-2-carboxylic acid
CEM-3G-2细胞系(人T淋巴细胞冷藏平台）
K7M2 wt[K7M2-WT]细胞系(小鼠骨肉瘤成骨细胞冷藏平台）
Pt-K2(PtK2)细胞系(袋鼠肾细胞冷藏平台）
OCI-LY1细胞系(人B淋巴细胞冷藏平台）
C4-2B细胞系(人前列腺癌细胞冷藏平台）
HCC 94细胞系(人子宫鳞癌细胞冷藏平台）
801-D细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
C3bR ELISA Kit
Cath-D ELISA Kit
Human glutathione S-transferases,GSTpi ELISA Kit
HSP90αB1 ELISA Kit
PYD ELISA Kit
Sheep IL-8 (Interleukin 8) ELISA Kit
Human GALNT11 ELISA Kit
Human circulating immune complex,CIC ELISA Kit
MC3T3-L1细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台）
NCI-H1048细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
HME4细胞系(人黑色素瘤细胞冷藏平台）
HHORSC细胞系(人毛囊外根鞘细胞冷藏平台）