HMVEC-L人肺微血管内皮细胞系 生长慢如何操作
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
造成实验室细胞污染常见情况总结:细胞培养中Z常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染,大多数较难处理。那么,哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢?我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】1)为节省时间,有人已经用超净台四个多小时,不开紫外灭菌30min,酒精擦拭后直接开始试验;2)器材或者溶液很久没用,未检测是否污染而直接使用;离心管多次使用,枪头为了方便交叉使用;3)超净台不点酒精灯;点了酒精灯放在右上角,而你在左下角做试验;4)不带手套,徒手操作;5)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋,未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具,如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需121°C高压灭菌20分钟后37%烤干备用)。超净台和桌面,东西太多太乱:超净台不是储物箱,什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台!这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面,切忌东西堆积如山,不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞!一不小心“飘”进你的细胞培养板里,细胞就会养的不好,啥时候死了都不知道!【培养箱太久没清洁】细胞污染了,并非直接扔了培养皿就不管了,首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染,如果有而且好几个板子都有类似的污染块,那很可能是培养箱中的水或者空气污染了,得给培养箱做个大扫除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水没了要记得加,还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂,难管理】在传代细胞这种卫生要求高,人多了,不确定因素多了,难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室,实验服当风衣穿,不扣纽扣,不戴鞋套,就容易造成细胞污染;超净台做实验时,喜欢说话聊着做试验,要是还不带口罩,里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢!
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细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞形态特性:详见细胞说明书
养了几年细胞,说一点自己培养细胞方面的看法:1)培养细胞前,可以看看细胞特点说明书,包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等;2)不同细胞生长周期不同,有的生长很快,比如说MDA-MB-231,传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了,有的又是特别慢,等的人心焦,BT474就是,传代是一分二,复苏起始的时候两周多才能长满,所以就要在培养细胞的过程中多多摸索了;3)对于娇弱的细胞,就得细心呵护了,胰酶消化不能过久,吹得时候要轻柔,离心时候也要注意转速和时间,每天都要去看一下细胞,肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况;4)冻存细胞复苏后第二天Z好更换一次培养基;5)培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次;6)养细胞的教训:不能偷懒!细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋。1)不管买的细胞、惠赠的细胞,刚拿到手赶紧做两件事:检测是否有支原体污染; 迅速扩增冻存;2)发现有污染迅速处理掉,特别是当你养了很多种细胞时; 细菌污染,真菌污染很容易发现,支原体污染的话,细胞会长的慢,买个支原体检测的kit定期检测一下;3)传代细胞日常的值日清洁是必须的,此外还要定期熏蒸;4)细胞的传代一定要规律,保持相同的confluency和传代时间间隔,不要随心所欲或者拖延;5)注意个人卫生。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
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细胞背景资料:详见相关文献介绍
以下对初次培养细胞人员来说,是非常好的开门教程:准备室的设备:单蒸馏水蒸馏器、双蒸馏水蒸馏器、酸缸、烤箱、高压锅、储品柜(放置未消毒物品)、储品柜(放置消毒过的物品)、包装台;配液室的设备:扭力天平和电子天平(称量药品)、PH计(测量培养用液PH值)、磁力搅拌器(配置溶液室搅拌溶液);培养室的设备:液氮罐、储品柜(存放杂物)、日光灯和紫外灯、空气净化器系统、低温冰箱(-80℃)、空调、二氧化碳缸瓶、边台(书写实验记录);必须放在无菌间的设备:离心机(收集细胞)、超净工作台、倒置显微镜、CO2孵箱(孵育培养物)、水浴锅、三氧消毒杀菌机、4℃冰箱(放置serum和培养用液)。无菌室的灭菌:定期打扫无菌室:每周打扫一次,先用自来水拖地、擦桌子、超净工作台等,然后用3‰来苏尔或者新洁尔灭或者0.5%擦拭;CO2孵箱(培养箱)灭菌:先用3‰新洁尔灭擦拭,然后用75%酒精擦拭或者0.5%,再用紫外灯照射;实验前灭菌:打开紫外灯、三氧杀菌机、空气净化器系统各20-30分钟;实验后灭菌:用75%酒精(3‰新洁尔灭)擦拭超净台、边台、倒置显微镜的载物台;实验人员的无菌准备:肥皂洗手、穿好隔离衣、带好隔离帽、口罩、放好拖鞋、用75%酒精棉球擦净双手。
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细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NB-4细胞系(人急性早幼粒白血病细胞冷藏平台)
A-673细胞系(人横纹肌肉瘤细胞冷藏平台)
NCI-H2052细胞系(人恶性胸膜间皮瘤细胞冷藏平台)
Ethyl oxalyl monochloride
Urea
2,8-DibroModibenzothiophene
2-(2-BroMophenyl)-N-cyclopropylacetaMide
Silver trifluoroMethanesulfonate, 99+%
THLE-2细胞系(人肝永生化细胞冷藏平台)
EAG3细胞系(人子宫内膜低分化腺癌细胞冷藏平台)
HCC-366细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
HepG-2细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
WM-266-4细胞系(人黑素瘤细胞冷藏平台)
HepG-2细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
MHCC97L细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
4-hydroxy-3-nitrobenzotrifluoride
4-Bromo-2-chlorophenol
2-Indanone
Hydroquinone monobenzyl ether
(+/-)-trans-1,2-Diaminocyclohexane
DITNC1细胞系(大鼠脑间质细胞冷藏平台)
DMS 273细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
CHGF-003细胞系(大鼠乳腺癌细胞冷藏平台)
HCC-44细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
THLE-3细胞系(人肝上皮细胞冷藏平台)
TE671细胞系(人胚胎横纹肌瘤细胞冷藏平台)
Hepa1-6[Hepa1-6]细胞系(小鼠肝癌细胞冷藏平台)
PC-12分化细胞系(大鼠肾上腺嗜铬细胞冷藏平台)
H-EMC-SS细胞系(人软骨肉瘤细胞冷藏平台)
NRK细胞系(大鼠肾细胞冷藏平台)
VERO C1008细胞系(非洲绿猴肾细胞冷藏平台)
D-Glucal
2-(2-Methoxyethoxy)acetyl chloride, 95%
4-AMino-N-Boc-L-phenylalanine, 95%
L-Leucyl-D-leucine Dihydrate
Acetyl coenzyMe A trilithiuM salt
Caco-2[Caco2]细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台)
OVCAR4细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台)
Huh-1细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
HT-1376细胞系(人膀胱癌细胞冷藏平台)
SNU-475细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
TE-1细胞系(人食管癌细胞冷藏平台)
Benzylboronic acid
4-Iodoanisole, 98%
3-(BroMoMethyl)-5-Methylisoxazole, 97%
ALLYL BUTYRATE
2,2,4-TriMethyl-1,3-dioxolane
CEK细胞系(鸡胚肾细胞冷藏平台)
MPC细胞系(小鼠垂体细胞冷藏平台)
A-375细胞系(人恶性黑色素瘤细胞冷藏平台)
HGF-1细胞系(人牙龈成纤维细胞冷藏平台)
NCI-H2107细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
HE-MEF细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台)
FU97细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
BE(2)C细胞系(人神经母细胞冷藏平台)
TEC细胞系(人胸腺上皮细胞冷藏平台)
SUSM-1细胞系(人肺成纤维细胞冷藏平台)
TE7细胞系(小鼠B淋巴细胞冷藏平台)
OMC-1细胞系(人眼脉络膜黑色素瘤细胞冷藏平台)
PC-3MIE8细胞系(人前列腺癌高转移细胞冷藏平台)
MHCC97H细胞系(人高转移性肝癌细胞冷藏平台)
Hep-3B2.1-7细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
HCC1599细胞系(人乳腺原发性导管癌细胞冷藏平台)
L-929[L929]细胞系(小鼠结缔组织L细胞冷藏平台)
3-Fluoro-4-Nitro-Benzaldehyde
4-n-Pentylbenzenesulfonyl chloride
Polyquaternium-10
Free-T3 ELISA Kit
HNE-2细胞系(人鼻咽癌细胞冷藏平台)
ESC-410细胞系(人食管癌细胞冷藏平台)
NCI-H2106[H2106]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
SNU-869细胞系(人胆管癌细胞冷藏平台)
SNU182细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
5-BroMosalicylic acid
2-Bromo-1-(5-phenyl-2-thienyl)-1-ethanone , 95%
4-Bromo-2-chloro-5-fluorotoluene 99%
3-Thiocyanotopropyltriethoxysilane
Dibenzenesulfonimide
SW 780细胞系(人膀胱移行细胞冷藏平台)
RSC-364细胞系(大鼠滑膜细胞冷藏平台)
SW954细胞系(人阴户鳞癌细胞冷藏平台)
NCI-H841[H841]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
AAV293细胞系(人胚肾细胞冷藏平台)
SK-BR-3[SKBR-3,SKBR3]细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
HBE细胞系(人支气管上皮样细胞冷藏平台)
Mouse CD40L (Cluster of Differentiation 40 Ligand) ELISA Kit
Human Netrin-4,Ntn4 ELISA Kit
Human I-TAC (Interferon Inducible T-cell Alpha Chemoattractant) ELISA Kit
cAMP ELISA Kit
Rat procollagen Ⅲ N-terminal peptide,PⅢNT ELISA Kit
AXIN2 ELISA Kit
C1INH) ELISA Kit
Human ABCG1 (ATP Binding Cassette Transporter G1) ELISA Kit
D341 Med细胞系(人髓母细胞冷藏平台)
TEC细胞系(人胸腺上皮细胞冷藏平台)
TMD8细胞系(人弥漫大B淋巴瘤细胞冷藏平台)
HREpiC细胞系(人肾脏上皮细胞冷藏平台)
NCI-H526细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
SNU475细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
COLO 684细胞系(人子宫腺癌细胞冷藏平台)
NIE-115细胞系(小鼠神经母细胞冷藏平台)
IR983F细胞系(大鼠瘤细胞冷藏平台)
NCI-H1105细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
Fast Red TR salt
3-(BENZYLOXY)PROPAN-1-AMINE
pentasodium trihydrogen [ethane-1,2-diylbis[nitrilobis(methylene)]]tetrakisphosphonate
SOST ELISA Kit
HUP-T3细胞系(人癌细胞冷藏平台)
MOLP-8细胞系(人多发性瘤细胞冷藏平台)
786-O[786-0]细胞系(人腺癌细胞冷藏平台)
GP2d细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台)
HARA细胞系(人肺癌鳞癌细胞冷藏平台)
Ethanol-2-13C
3-Phenoxybenzonitrile , 97%
3,4-Difluorobenzoylacetonitrile
5,7-Dimethyl-pyrazolo[1,5- a ]pyrimidine-2-carboxylic acid
N'-(3-aminophenyl)-N,N-dimethylsulfamide(SALTDATA: FREE)
SW962[SW 962,SW-962]细胞系(人阴户磷癌细胞冷藏平台)
LM8C3H细胞系(小鼠骨肉瘤细胞冷藏平台)
TSCCA细胞系(人舌鳞癌细胞冷藏平台)
Loo细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台)
ASC细胞系(人宫颈非典型鳞状细胞冷藏平台)
HRMC细胞系(人肾小球系膜细胞冷藏平台)
Hela229[HeLa229]细胞系(人宫颈癌细胞冷藏平台)
Mouse Leukotriene B4,LT-B4 ELISA Kit
AXIN ELISA Kit
Human Ifi205 ELISA Kit
ACTH ELISA Kit
Col Ⅳ ELISA Kit
TGFβ ELISA Kit
Human C5a ELISA Kit
ADCY3 ELISA Kit
LOVE1细胞系(人结直肠癌细胞冷藏平台)
KAT-5细胞系(人甲状腺乳头状癌细胞冷藏平台)
MAVER-1细胞系(人淋巴细胞冷藏平台)
HCT-8[HRT-18]细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台)
SK-HEP-1细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
HA1800细胞系(人星形胶质细胞冷藏平台)
KYSE270细胞系(人食管鳞癌细胞冷藏平台)
BATHOCUPROIN SULFONATE HYDRATE
Dioctyl sulfosuccinate
4-Diazo-4'-MethoxydiphenylaMine Sulfate
Methyl 8-broMo-6-chloro-4-hydroxyquinoline-2-carboxylate
4-Pyridazinecarboxylic acid, 95%
NCI-H1694[H1694]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
RC-4BC细胞系(人垂体瘤细胞冷藏平台)
HPAF细胞系(人肺动脉成纤维细胞冷藏平台)
HEK-2细胞系(人胚肾二倍体细胞冷藏平台)
DU4475细胞系(人乳腺上皮细胞冷藏平台)
RWPE-2细胞系(人前列腺正常细胞冷藏平台)
PIG1细胞系(人皮肤黑色素细胞冷藏平台)
aloin
Silver iodate
pyrazine-2,6-dicarboxylic acid
Levcycloserine
3,6-THIOXANTHENEDIAMINE-10,10-DIOXIDE
NCI-H378[H378]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
HT-1080[HT1080]细胞系(人成纤维肉瘤细胞冷藏平台)
RPMI 8226细胞系(人多发性瘤细胞冷藏平台)
NCI-H2081[H2081]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
Ranca细胞系(小鼠肾癌细胞冷藏平台)
HCC-95细胞系(人肺癌鳞癌细胞冷藏平台)
AZ521细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
PL-1细胞系(人骨肉瘤细胞冷藏平台)
HS683细胞系(人脑胶质瘤细胞冷藏平台)
HTR-8细胞系(人滋养细胞冷藏平台)
AN3CA细胞系(人子宫内膜腺癌细胞冷藏平台)
4-Nitro-2,3-Lutidine-N-Oxide
TitaniuM silicide, 99.5% (Metals basis)
2-AMino-4-(4-broMophenyl)pyriMidine, 98%
5-Nitrosalicylic acid, 98%
RheniuM heptoxide
AML-193细胞系(人急性单核细胞冷藏平台)
HCCIH01细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
AN3CA细胞系(人子宫内膜腺癌细胞冷藏平台)
VX-2细胞系(兔间变表皮鳞癌细胞冷藏平台)
Mino细胞系(人淋巴瘤细胞冷藏平台)
NCI-H1355[H1355]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
4-(4-Nitrophenylazo)phenol
N-Me-Ala-OtBu HCl
Methyl 4-broMo-3-Methoxythiophene-2-carboxylate, 97%
DL-ALANINE BETA-NAPHTHYLAMIDE HYDROCHLORIDE
Methyl 1-Naphthaleneacetate
CAL-51细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
HCC-1359细胞系(人肺癌主轴巨细胞冷藏平台)
VERO 76细胞系(非洲绿猴肾细胞冷藏平台)
HCC-2935细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台)
HT-144细胞系(人恶性黑色素瘤细胞冷藏平台)
NCI-H838[H838]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
RPTEC细胞系(人肾近端小管上皮细胞冷藏平台)
HCC-94细胞系(人子宫鳞癌细胞冷藏平台)
MKN74细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
MES-13细胞系(小鼠肾小球系膜细胞冷藏平台)
HPASMC细胞系(人肺动脉平滑肌细胞冷藏平台)
NCI-H1693[H1693]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
HTR-8细胞系(人滋养细胞冷藏平台)
NCI-H1836[H1836]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
Jurkat细胞系(人急性T淋巴白血病细胞冷藏平台)
SUPB15细胞系(人急性淋白血病细胞冷藏平台)
SW48细胞系(人结肠腺癌细胞冷藏平台)
L-Cyclobutylglycine
2,4,5-Trichlorobenzenesulphonyl chloride
3-bromothianaphthene
ATP ELISA Kit
NCI-H1437[H1437]细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台)
Hep G2[HEPG2]细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
HCT-8[HRT-18]细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台)
Tca8113细胞系(人舌鳞癌细胞冷藏平台)
HMEC-1细胞系(人微血管内皮细胞冷藏平台)
Methyl 2-chloro-1,3-oxazole-5-carboxylate
3-Bromo-4-methoxyphenylacetic acid
Potassium dihydrobis(pyrazol-1-yl)borate, min. 95%
3-Bromo-2-methoxy-5-nitropyridine
Disodium tetracarbonylferrate compound with 1,4-dioxane (1 to 1.5), 94%
SJRH30细胞系(人横纹肌肉癌细胞冷藏平台)
SK-MEL-24细胞系(人恶性黑色素瘤细胞冷藏平台)
SLMT-1细胞系(人食管鳞癌细胞冷藏平台)
HCASMC细胞系(人冠状动脉平滑肌细胞冷藏平台)
B16F1细胞系(小鼠黑色素瘤细胞冷藏平台)
NCI-H920[H920]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
NCI-H1793细胞系(人肺癌腺癌细胞冷藏平台)
GPI/ALT ELISA Kit
Human MPP6 ELISA Kit
Human Glutamate dehydrogenase;GDH/GLDH ELISA Kit
Ⅰctp ELISA Kit
BAX ELISA Kit
CTSL ELISA Kit
C4 ELISA Kit
Human CYP2E1 ELISA Kit
SU-DHL-8细胞系(人弥漫大B淋巴瘤细胞冷藏平台)
PC-9细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
HEK293F细胞系(人胚肾细胞冷藏平台)
ARO细胞系(人甲状腺癌细胞冷藏平台)