PCK大黄鱼肾细胞系 实验室复苏培养更权威
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,原因比较复杂,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳;血清使用错误或血清的品质不佳;解冻过程错误;冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心;悬浑细胞误认为死细胞;培养温度使用错误;细胞置于-80℃太久等。建议严格参照ATCC的标准操作规程进行细胞复苏、冻存等工作。欲将一般动物细胞离心下来,其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞,其离心速率一般为300×g(约1OOOrpm),5-10分钟,转速过高或离心时间过长都将造成细胞死亡。合适的离心转速是根据相对离心力决定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r为离心机转轴ZX与离心套管底部内壁的距离;rpm为离心机每分钟的转数;RCF(relative centrifugal force)为相对离心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍数来表示单位。
PCK大黄鱼肾细胞系 实验室复苏培养更权威
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞形态特性:详见细胞说明书
培养细胞真的不难,Z关键几点:1)所有的东西使用Z好的,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,Z近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候Z好给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)Z好的是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
PCK大黄鱼肾细胞系 实验室复苏培养更权威
细胞背景资料:详见相关文献介绍
【冻存细胞操作】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染),在冻存前1d换液;2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达5×10(7)/ml左右密度,离心,去上清;3)加入配制好的冻存液(培养液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10%二甲基亚砜(DMSO) 或甘油,可使冰点降低,使细胞内水分在冻结前透出细胞外;4)分装于无菌冻存管中,每管加1.5m悬液;5)旋好冻存管并仔细检查,一定要盖紧,做好标记;6)冻存:在特殊的仪器或简易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min时间内,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套,以免液氮冻伤。【复苏细胞操作】1)从罐中取出冻存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不时摇动,使其急速融化,30~60s内完成;3)冻存管用70%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10ml培养液;4)低速离心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培养液洗一次;5)用培养液适当稀释后,装入培养瓶37℃培养,次日更换一次培养液后,继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分,密度应达到10(7)/ml,在融后稀释20倍时,仍能保持5×10(5)/ml数量。
PCK大黄鱼肾细胞系 实验室复苏培养更权威
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
AU565细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
CHO-K1细胞系(仓鼠卵巢细胞冷藏平台)
GT39细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
2-Methyl-2-thiazoline
3-Chloro-4-Methylaniline
trans-Decahydroisoquinoline
6-BroMoquinazolin-4-ol
TantaluM(V) oxide, 99.99%, (trace Metal basis)
SUDHL-5细胞系(人弥漫大D细胞冷藏平台)
NCI-H1355细胞系(人肺癌腺癌细胞冷藏平台)
NCI-H2228[H2228]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
KATO Ⅲ细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
HIC-2细胞系(人小肠癌细胞冷藏平台)
WM-115细胞系(人黑色素瘤细胞冷藏平台)
HCT-8细胞系(人回盲肠癌细胞冷藏平台)
convallatoxin
L-5-Hydroxytryptophan
n-Heptadecane
2,4,6-Tribromophenol
2-PYRIDYLTHIOUREA
C8-D1A细胞系(小鼠小脑星形细胞冷藏平台)
TALL-1细胞系(人急性T淋巴细胞冷藏平台)
HTB-169细胞系(人视网膜母细胞冷藏平台)
NCI-H2172[H2172]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
SGC-790细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
HCC1937细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
293(HEK-293,HEK293)细胞系(人胚肾细胞冷藏平台)
SK-MES-1细胞系(人肺鳞癌细胞冷藏平台)
HT1080细胞系(人成纤维肉瘤细胞冷藏平台)
NCI-H2081[H2081]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
HCC2935细胞系(人肺癌腺癌细胞冷藏平台)
(+/-)-Exo-6-Hydroxytropinone, 99%
2,3-DifluoroMandelic acid, 95%
Phthaldialdehyde, 98%
DecyltriMethylaMMoniuM broMide
Asiatic acid
TALL-104细胞系(人急性T淋巴细胞冷藏平台)
VP229细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
NCI-H2126细胞系(人肺癌腺癌细胞冷藏平台)
MHCC97L细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
786-0细胞系(人肾透明腺癌细胞冷藏平台)
P3X63Ag8.653细胞系(小鼠瘤细胞冷藏平台)
Methyl 3-Oxoheptanoate
Methyl azetidine-3-carboxylate, HCl
[4-(1,3-Thiazol-2-yl)phenyl]Methanol, 97%
MYCOZYME EQUIVALENT
CouMarin
N1E-115细胞系(小鼠神经母细胞冷藏平台)
293A细胞系(人胚肾细胞冷藏平台)
NS20Y细胞系(小鼠神经母细胞冷藏平台)
NCIH526[H526]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
3T6swiss细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台)
HCC-15细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
BMF细胞系(小鼠成纤维细胞冷藏平台)
NRK-49F细胞系(大鼠正常肾成纤维细胞冷藏平台)
M-NFS-60细胞系(小鼠髓性白血病细胞冷藏平台)
NCI-H1915[H1915]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
Ana-1细胞系(小鼠巨噬细胞冷藏平台)
NCI-H1395细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台)
SNU216细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
KAT-5细胞系(人甲状腺乳头状癌细胞冷藏平台)
293[HEK-293]细胞系(人胚肾细胞冷藏平台)
4T1细胞系(小鼠乳腺癌细胞冷藏平台)
NCI-H1155细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
propafenone
7-Chloro-2-tetralone
Ceresine wax
PDGFA ELISA Kit
HEC-251细胞系(人子宫内膜细胞冷藏平台)
U-2OS细胞系(人胫骨肉瘤细胞冷藏平台)
CT26WT细胞系(小鼠结肠癌细胞冷藏平台)
MKN-7细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
C8-D1A细胞系(小鼠小脑星形细胞冷藏平台)
DL-GOITRIN
9H-Fluorene-9-acetic acid, 99%
3-(Methylsulfonyl)benzylamine hydrochloride
2-(6-Bromopyridin-2-yl)acetic acid
3-Amino-5-methylpyridazine
HSAS2细胞系(人皮肤成纤维细胞冷藏平台)
NK-92MI细胞系(人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞冷藏平台)
LX-1细胞系(人肝星形细胞冷藏平台)
BSC-1细胞系(猴肾细胞冷藏平台)
ATDC5细胞系(小鼠胚胎瘤细胞冷藏平台)
YAC-1细胞系(小鼠淋巴瘤细胞冷藏平台)
M07e细胞系(人巨核细胞冷藏平台)
FIL1δ ELISA Kit
Human neutrophil activating protein-2,NAP-2 ELISA Kit
MN ELISA Kit
H3 ELISA Kit
Rat c-jun ELISA Kit
Monkey E2 (Estradiol) ELISA Kit
Human LAMγ1 ELISA Kit
Human Neonatal Thyroxine,NN-T4 ELISA Kit
SW620[SW620,SW-620]细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台)
DMS153[DMS153]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
MC3T3-E1 Subclone 14细胞系(小鼠颅顶前骨细胞冷藏平台)
Ranca细胞系(小鼠肾癌细胞冷藏平台)
HA1800细胞系(人星形胶质细胞冷藏平台)
RWPE1细胞系(人前列腺上皮细胞冷藏平台)
CBRH 7919细胞系(大鼠肝癌细胞冷藏平台)
NCI-H196[H196]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
HFLS-OA细胞系(人滑膜关节炎成纤维细胞冷藏平台)
HFB细胞系(人皮肤成纤维细胞冷藏平台)
2,6-Difluorobenzoylacetonitrile
lithium chromate
Methylthioninium Chloride
GHAb ELISA Kit
VEROE6细胞系(非洲绿猴肾细胞冷藏平台)
NCI-H2052[H2052]细胞系(人恶性胸膜间皮瘤细胞冷藏平台)
AU565细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
HCC1937细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
B16F1细胞系(小鼠黑色素瘤细胞冷藏平台)
6-Bromo-benzothiazol-2-ylamine
1H-Benzimidazole-5-carbaldehyde , 97%
2-Bromo-5-nitrobenzoic acid
4-formylbenzamide(SALTDATA: FREE)
Bismuth subnitrate
95-D细胞系(人高转移肺癌细胞冷藏平台)
NCI-H2110细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
PMVEC细胞系(大鼠肺微血管内皮细胞冷藏平台)
Caki-2细胞系(人肾透明细胞冷藏平台)
HEB细胞系(人脑胶质细胞冷藏平台)
U-118 MG细胞系(人脑星形胶质母细胞冷藏平台)
Hela299细胞系(人宫颈癌细胞冷藏平台)
TMED1 ELISA Kit
PDGFA ELISA Kit
Human choline acetylase,CHAc ELISA Kit
BrDU ELISA Kit
FABP2 ELISA Kit
Antilivin ELISA Kit
Human Ubiquitin,Ub ELISA Kit
Human PFN2 ELISA Kit
Colon26细胞系(小鼠结肠癌细胞冷藏平台)
HEKa细胞系(人体表皮角化细胞冷藏平台)
SW48细胞系(人结肠腺癌细胞冷藏平台)
NCI-H1876[H1876]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
McA-RH7777细胞系(大鼠肝癌细胞冷藏平台)
U87 MG细胞系(人恶性脑胶质瘤细胞冷藏平台)
NCI-N87[N87]细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
1-BOC-pyrrole-2-boronic acid, pinacol ester
IMidazo[1,2-a]pyridine-6-carbonyl chloride hydrochloride
3-Ethoxypropionic Acid
ChloriMuron-ethyl
Tris(diMethylaMino)Methane, 85%
Ranca细胞系(小鼠肾癌细胞冷藏平台)
OCM-1A细胞系(人低侵袭性脉络膜黑色素素瘤细胞冷藏平台)
SNU-C1细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台)
NCI-H2452细胞系(人间皮瘤细胞冷藏平台)
NCI-H1573细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台)
NEI-H209细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
MKN-45细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
4-Chlorobenzonitrile
2,3-dihydroxy-5-methylbenzoic acid
2-(Chloromethyl)quinoline hydrochloride
o-Chloroethylbenzene
1,3,5-TRIVINYL-1,3,5-TRIMETHYLCYCLOTRISILOXANE
HUV-EC细胞系(人脐静脉内皮细胞冷藏平台)
NCI-H1770细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
CTLL-2细胞系(小鼠T淋巴细胞冷藏平台)
Raji细胞系(人淋巴瘤细胞冷藏平台)
M-07e细胞系(人巨核细胞冷藏平台)
NCI-H1048[H1048]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
KYSE410细胞系(人食管癌细胞冷藏平台)
ABC-1细胞系(人肺癌腺癌细胞冷藏平台)
COLO320DM细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台)
P388D1细胞系(小鼠淋巴样瘤细胞冷藏平台)
bEnd.3细胞系(小鼠脑微血管内皮细胞冷藏平台)
3-Octylthiophene
2,3-Diphenylquinoxaline, 98+%
4-Hydroxy-3-(trifluoroMethoxy)benzaldehyde, 98+%
TitaniuM(III) chloride-aluMinuM chloride
2,2'-Thiodiacetic acid
HISMC细胞系(人肠平滑肌细胞冷藏平台)
AV 12细胞系(叙利亚仓鼠细胞冷藏平台)
DMS 114细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
HLAmP细胞系(人肺巨细胞冷藏平台)
HSC-4细胞系(人口腔鳞癌细胞冷藏平台)
FU-OV-1细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台)
2-Isobutoxy-5-(trifluoroMethyl)phenylboronic acid
DL-Ornithine hydrochloride, 99%
6-Chloro-4-pyriMidinol, 97%
AllyltriMethylsilane
Gal beta(1-3)[Neuc alpha(2-6)]GlcNAc-beta-pNP
HMCB细胞系(人黑色素瘤细胞冷藏平台)
MOLT-3细胞系(人急性T淋巴母细胞冷藏平台)
CRL细胞系(人癌细胞冷藏平台)
SKG-IIIa细胞系(人宫颈癌细胞冷藏平台)
WSU-DLCL2细胞系(人弥漫大B淋巴瘤细胞冷藏平台)
LTEP-P细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
NCI-H1876[H1876]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
HT-29细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台)
NCI-H2030细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
NCI-H2126[H2126]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
MA891细胞系(小鼠乳腺癌高转移细胞冷藏平台)
MDA-MB-468细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
BPH-1细胞系(人前列腺增生细胞冷藏平台)
HLF细胞系(人胚肺细胞冷藏平台)
KLN 205细胞系(人肺癌鳞癌细胞冷藏平台)
TALL-1细胞系(人急性T淋巴细胞冷藏平台)
UMC-11细胞系(人肺良性肿瘤细胞冷藏平台)
ethyl 3-(5,6-dichloro-2-(pyridin-3-yl)pyrimidin-4-yl)propanoate
Indole-6-boronic acid
2,4-difluorocinnamic acid
NUP35 ELISA Kit
SGC-790细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
NCI-H719[H719]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
CFSC-2G细胞系(大鼠肝星形细胞冷藏平台)
A-549细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
GIST-48细胞系(人胃肠道间质瘤细胞冷藏平台)
1-(2,3-Dihydrobenzo[b]furan-5-yl)ethan-1-one, 97%
N-(2-Hydroxyethyl)propionamide
4-Amino-5-methoxy-2-methylphenylbenzamide
4-Chloro-8-fluoro-2-methyl-quinoline
DL-2-Hydroxyvaleric acid, sodium salt, hydrate, 98%
EBTr(NBL-4)细胞系(牛胚气管细胞冷藏平台)
HRCEC细胞系(人视网膜微血管内皮细胞冷藏平台)
A7r5细胞系(大鼠胸大动脉平滑肌细胞冷藏平台)
NCI-H2172细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
MFE-296细胞系(人子宫内膜癌细胞冷藏平台)
NCM356细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台)
L-540 Hodgkin细胞系(人淋巴瘤细胞冷藏平台)
Mouse Interferon β,IFN-β/IFNB ELISA Kit
Human ITGαD ELISA Kit
Human OCLN (Occludin) ELISA Kit
Chicken follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit
Rat BAFFR (B-Cell Activation Factor Receptor) ELISA Kit
Cortisol ELISA Kit
Human C5a ELISA Kit
Human fibrinopeptide B,FPB ELISA Kit
NCI-H82[H82]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
NCI-H2023细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
MIN6细胞系(小鼠胰岛β细胞冷藏平台)
LoVo细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台)