LIXC-003细胞:人肝癌细胞系 更专业 更专注技术复苏
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
细胞冻存的步骤:1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天Z好换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为5×106~1×107/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具体要看培养的细胞类型来选择;3)将分装上述细胞悬液于2ml冻存管中,每管0.25ml。冻存管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数);4)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中,-80℃冰箱过夜。;如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐)Z好;或者可以在4℃,2h;然后转到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,Z好取出一只冻存管细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
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细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞形态特性:详见细胞说明书
【细胞培养中细菌、霉菌的污染情况总结】细菌:细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状,根据感染细菌的不同,可有不同的外形,培养液一般会浑浊变黄,对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况,是否在高压灭菌时放气时间足够,压力足够!尤其是和储存培养液接触的移液管等物品,连续两次污染的话有可能造成储存液污染,一定要注意!下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象!可在培养液中加相应的抗生素处理;霉菌:培养液是清亮的,倒置显微镜下无杂质,37度孵箱培养2-3天,仍清亮,但出现絮状杂质,镜下可见呈细丝状的团状漂浮物,可看到明显的菌丝,细胞仍可生长,但时间长之后,细胞的活力状态变差,用硫酸铜溶液擦拭CO2孵箱内,再把水盘里也加上饱和量的硫酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒磷酸氢二钠高盐液体,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有细胞暂时转移,采用擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把放置在孵箱内一个小时,使其蒸汽弥漫。待的气味消散后,再移入细胞。孵箱应定期清洁(2月左右),尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外灯照。预防霉菌污染,可在培养基里加3u/ml的两性霉素或制霉菌素或D或双抗;但细胞一旦污染,很难挽救,制霉菌素或D或双抗都于事无补,建议舍弃该污染细胞,将环境彻底消毒,如果所有细胞都污染,可能是系统污染,检查一下培养基和器材,如果只是个别污染,可能是操作问题,就要注意操作。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
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细胞背景资料:详见相关文献介绍
养科研细胞是生物医学研究的基本功。有三个小经验可以和大家分享一下:1)不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子,觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑?知道为什么吗?烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸氢跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候,炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后,空气变冷,压力骤降,培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳,释放出来。培养基中的碳酸少了,当然会变碱。如果不烧瓶口的话,你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。(当然多多少少还是会有一点越用越碱,因为室温还是比冰箱内的温度高),其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下,你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话,这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌,除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来美国以后发现这里更彻底,超净台内根本就不点酒精灯;2)不要频繁看细胞。对于初学者而言,养细胞就像养孩子一样,有空就要去看看。细胞越是养不好,就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处,特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后,密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围,形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞,培养瓶这么一晃,把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞,细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管,细胞疯长;3)不要怕消化。在传代的时候,初学者往往生怕细胞消化过度,早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯,吹得满瓶子都是气泡。在我看来,用力吹打对细胞的损伤比消化更大。我师兄在做血管平滑肌原代的时候,37度消化过夜,细胞也没事。我一般是等细胞完全变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有,动作要轻柔,尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大,对细胞的伤害也是很大的。
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细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
J-111细胞系(人急性单核细胞冷藏平台)
DMS 273细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
HCC细胞系(人子宫高分化鳞癌细胞冷藏平台)
Difurfurylsulfide
DiMethyl 2,6-pyridinedicarboxylate
Diisopropyl Allylboronate
ZyMosan [IMMunological Reagent]
Valeric anhydride, 98%
GLAG-66细胞系(人乳头状甲状腺癌细胞冷藏平台)
NCI-H220[H220]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
SW 626细胞系(人卵巢腺癌细胞冷藏平台)
JB6-C30细胞系(小鼠皮肤细胞冷藏平台)
HTSMC细胞系(人气管平滑肌细胞冷藏平台)
JEG细胞系(人绒毛膜癌细胞冷藏平台)
SGC7901细胞系(人低分化胃癌细胞冷藏平台)
Thioacetanilide
3-Nitrophenacyl thiocyanate
2-Methylsulfanyl-Pyrimidine-4-Carbaldehyde
Benzenediazonium, 3-(trifluoromethyl)-, tetrafluoroborate(1-)
(S)-(+)-1-INDANYL ISOTHIOCYANATE
A498细胞系(人肾癌细胞冷藏平台)
NCI-H2347细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
SNU449细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
DV-90细胞系(人肺癌腺癌细胞冷藏平台)
FU97细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
HPDLF细胞系(人牙周膜成纤维细胞冷藏平台)
Pt K1(NBL-3)细胞系(袋鼠肾细胞冷藏平台)
HEF细胞系(人胚纤维细胞冷藏平台)
RWPE2细胞系(人前列腺上皮细胞冷藏平台)
NCI-H2107[H2107]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
T98G细胞系(人脑胶质瘤细胞冷藏平台)
1-AMinonaphthalene-6-sulfonic acid
3-Fluoro-4-Methylbenzonitrile, 98%
3,4-Dichlorothiophenol, 97%
3-Hydroxy-4-iodobenzoic acid
L-Aspartic acid 1-Methyl ester
BT-474细胞系(人乳腺导管瘤细胞冷藏平台)
HRA-19细胞系(人结肠癌腺癌细胞冷藏平台)
NCI-H1522[H1522]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
C3H10T1 2 Clone 8细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台)
HS 683细胞系(人脑胶质瘤细胞冷藏平台)
MCA38细胞系(小鼠结肠癌细胞冷藏平台)
5-(1,3-Dioxolan-2-yl)-2-furaldehyde
5-BroMo-2-(piperidin-1-yl)pyridine
SodiuM tetrachloroplatinate(II) hydrate
MagnesiuM Sulfate, Dried, Powder, USP
O-(Benzotriazol-1-yl)-N,N,N',N'-tetraMethyluroniuM Hexafluorophosphate [Coupling Reagent for Peptide]
CAL-62细胞系(人甲状腺癌细胞冷藏平台)
M-07e细胞系(人巨核细胞冷藏平台)
UM-UC-1细胞系(人膀胱移行癌细胞冷藏平台)
IPI-2I细胞系(猪回肠上皮细胞冷藏平台)
L-929细胞系(小鼠结缔组织细胞冷藏平台)
Mono-Mac-6细胞系(人急性单核细胞冷藏平台)
SW480[SW480,SW-480]细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台)
HTR-8细胞系(人滋养细胞冷藏平台)
BMSCs细胞系(人间充质干细胞冷藏平台)
MFM-223细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
MCA38细胞系(小鼠结肠癌细胞冷藏平台)
Jurkat D,E细胞系(人T淋巴瘤细胞冷藏平台)
KYSE-70细胞系(人食管癌细胞冷藏平台)
Jecket细胞系(人淋巴瘤细胞冷藏平台)
SU-DHL-4细胞系(人B淋巴瘤细胞冷藏平台)
NCI-H295细胞系(人肾上腺皮质癌细胞冷藏平台)
RPMI 1788细胞系(人外周血B淋巴细胞冷藏平台)
For-Val-OH
1-Chloro-3-hydroxypropane
n-Pentane
Porcine HbA1c (Glycated Hemoglobin) ELISA Kit
PG-4细胞系(猫星形脑胶质细胞冷藏平台)
NCI-H2085[H2085]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
LCLC-103H细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
CL-40细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台)
HIC-2细胞系(人小肠癌细胞冷藏平台)
4-METHYL-1-ACETONAPHTHONE
m-Acetotoluidide
Guanylyl(3′→5′)cytidine ammonium salt ,98%
Fluorene Zone Refined (number of passes:70)
1-(2-Methoxy-5-methylphenyl)-2-thiourea
TU 686细胞系(人喉癌细胞冷藏平台)
SF9细胞系(昆虫卵巢细胞冷藏平台)
HAEpiC细胞系(人羊膜上皮细胞冷藏平台)
Beta-TC-6细胞系(小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞冷藏平台)
RWPE-1细胞系(人前列腺上皮细胞冷藏平台)
U251细胞系(人神经胶质细胞冷藏平台)
SK-MEL-1细胞系(人皮肤黑色素瘤细胞冷藏平台)
Mouse TBP (TATA Binding Protein) ELISA Kit
Human PXR (Pregnane X Receptor) ELISA Kit
Human E3/ubiquitin-protein ligase,E3/UBPL ELISA Kit
Chicken Interleukin 17,IL-17 ELISA Kit
α-Gal ELISA Kit
cAMP ELISA Kit
Human SMUG1 ELISA Kit
Human β-subunits of hemoglobin,HB-β ELISA Kit
NCI-H526[H526]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
MLMEC细胞系(小鼠微血管内皮细胞冷藏平台)
NUTU-19细胞系(大鼠卵巢癌细胞冷藏平台)
BC3H1细胞系(小鼠脑瘤细胞冷藏平台)
L6565细胞系(小鼠白血病克隆细胞冷藏平台)
NPA87细胞系(人甲状腺乳头状癌细胞冷藏平台)
CNE-2Z细胞系(人鼻咽癌细胞冷藏平台)
KG-1细胞系(人急性髓系细胞冷藏平台)
NCI-H1648[H1648]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
Jurkat CA细胞系(人急性T淋巴细胞冷藏平台)
5-bromo-2-chloropyridine-3-carbonitrile
azocasein
cefotetan
GA ELISA Kit
TE-6细胞系(人食管癌细胞冷藏平台)
NUTU-19细胞系(大鼠卵巢癌细胞冷藏平台)
HeLa[Chang Liver]细胞系(人张氏肝细胞冷藏平台)
BCECs细胞系(小鼠脑微血管内皮细胞冷藏平台)
NCCIT细胞系(人畸胎瘤细胞冷藏平台)
4-NITRO-1,2-PHENYLENEDIAMINE MONOHYDROCHLORIDE
5-Chloro-2-hydroxy-4-methyl-benzaldehyde
4,4'-Bis[di(3,5-xylyl)amino]-4''-phenyltriphenylamine
(-)-1,2-Bis((2R,5R)-2,5-diphenylphospholano)ethane, min. 98% (R,R)-Ph-BPE
2,2-Bis(hydroxymethyl)butyric Acid
SFPAC-1细胞系(人癌细胞冷藏平台)
T3T-L1细胞系(小鼠脂肪细胞冷藏平台)
hASMC细胞系(人气道平滑肌细胞冷藏平台)
SGC7901细胞系(人低分化胃癌细胞冷藏平台)
HEC1-B细胞系(人子宫内膜腺癌细胞冷藏平台)
NCI-H446细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
TE15细胞系(小鼠B淋巴细胞冷藏平台)
Mouse TDP43 (TAR DNA Binding Protein 43) ELISA Kit
Human progesterone receptor,PGR ELISA Kit
E3/UBPL ELISA Kit
IL17 ELISA Kit
AMS/AMY ELISA Kit
Chicken LHRH/GnRH (Luteinizing Hormone Releasing Hormone) ELISA Kit
Human MOGAT1 ELISA Kit
Human HBγ1 ELISA Kit
HT-ori3细胞系(人正常甲状腺细胞冷藏平台)
PC-12[PC12]细胞系(大鼠肾上腺嗜铬细胞冷藏平台)
HA1800细胞系(人星形胶质细胞冷藏平台)
SRBR3细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
ASC细胞系(人宫颈非典型鳞状细胞冷藏平台)
FLS细胞系(大鼠成纤维样滑膜细胞冷藏平台)
LS180(CL-187)[LS180]细胞系(人结肠腺癌细胞冷藏平台)
Polyvinylpyrrolidone cross-linked
3-Nitro-o-xylene
Diphenylpropylphosphine
5-AMino-4-cyano-1-(4-fluorophenyl)-3-Methylpyrazole
N1-[4-Cyano-2-(trifluoroMethyl)phenyl]acetaMide, 97%
NCI-H2030[H2030]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
SNU-739细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
A2780细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台)
NCI-H2228细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
NCI-H2228细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
HFLS-RA细胞系(人关节炎成纤维样滑膜细胞冷藏平台)
U87MG细胞系(人恶性胶质母细胞冷藏平台)
dimethoxymethylphenylsilane
5-bromo-4,6-dihydroxypyrimidine
4-chlorobutytonitrile
Tetrahydrothiophene
POTASSIUM TANTALUM ISOPROPOXIDE
HS683细胞系(人脑胶质瘤细胞冷藏平台)
801-D细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
IHH-4细胞系(人甲状腺癌细胞冷藏平台)
VMR106细胞系(大鼠骨肉瘤细胞冷藏平台)
A549[A-549]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
C33A细胞系(人宫颈癌细胞冷藏平台)
MFE-280细胞系(人子宫内膜癌细胞冷藏平台)
NCI-H1355细胞系(人肺癌腺癌细胞冷藏平台)
NB4细胞系(人急性早幼粒白血病细胞冷藏平台)
VCaP细胞系(人前列腺癌细胞冷藏平台)
KM12细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台)
1-Methylpyrrolidine
5-MethoxyMethyl-2-furoic acid, 99%
Arsenazo III disodiuM salt
LoMustine
4-Methoxybenzenesulfonyl chloride
JurkatD,E细胞系(人T淋巴瘤转基因细胞冷藏平台)
CRL-1548细胞系(大鼠肝癌细胞冷藏平台)
BEAS-2B细胞系(人支气管上皮细胞冷藏平台)
NCI-H2172细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
4T1细胞系(小鼠乳腺癌细胞冷藏平台)
HPMEC细胞系(人肺微血管内皮细胞冷藏平台)
2-(4,4,5,5-TetraMethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)thiazole
IsochroMan, 99%
OctylMagnesiuM broMide, 2M solution in diethyl ether,AcroSeal
Butyl Isovalerate
HBdSMC细胞系(人膀胱平滑肌细胞冷藏平台)
BE(2)-C细胞系(人神经母细胞冷藏平台)
NCI-H1734[H-1734,H1734]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
HepG2-luc细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
Tca-8113[Tca8113]细胞系(人舌鳞癌细胞冷藏平台)
LS180(CL-187)[LS180]细胞系(人结肠腺癌细胞冷藏平台)
Ha Fe细胞系(人羊膜细胞冷藏平台)
NCI-H524[H524]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
PA12细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台)
HDLEC细胞系(人淋巴管内皮细胞冷藏平台)
3T3-Swiss albino细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台)
EFM-19细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
Neuro-2a细胞系(小鼠脑神经瘤细胞冷藏平台)
MGECs细胞系(小鼠肾小球内皮细胞冷藏平台)
Hut-102细胞系(人皮肤T淋巴瘤细胞冷藏平台)
HCCIH03细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
Sp2/0-Ag14细胞系(小鼠瘤细胞冷藏平台)
Succinic anhydride
Wang resin
2-chloro-5-ethylaminomethylpyridine
K-lgLC ELISA Kit
MOLM-16细胞系(人白血病细胞冷藏平台)
H-4-II-E细胞系(大鼠肝细胞冷藏平台)
TPC1细胞系(人甲状腺癌细胞冷藏平台)
NCI-H1770细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
Loo细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台)
Hexahydro-1,3,5-triphenyl-1,3,5-triazine
Pioglitazone Hydrochloride
2,6-Dimethyl-1-heptene
methyl 2-(3-formyl-2,5-dimethyl-1H-pyrrol-1-yl)benzoate(SALTDATA: FREE)
1-Cyclopentenylboronic acid pinacol ester
HL-60细胞系(人原髓白血病细胞冷藏平台)
NCI-H217细胞系(人肺鳞癌细胞冷藏平台)
SW480细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台)
D407细胞系(人视网膜色素上皮细胞冷藏平台)
3T3细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台)
NGP细胞系(人神经母细胞冷藏平台)
COLO-824细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
S100B ELISA Kit
Human PCDHα8 ELISA Kit
Human DNM2 ELISA Kit
MEPE ELISA Kit
Flt3L ELISA Kit
Monkey ACE (Angiotensin I Converting Enzyme) ELISA Kit
Human MPF ELISA Kit
TPO ELISA Kit
SHEE细胞系(人永生化食管上皮细胞冷藏平台)
NCI-H2170[H2170]细胞系(人肺鳞状细胞冷藏平台)
RSC96细胞系(大鼠雪旺细胞冷藏平台)
Pt K2细胞系(袋鼠肾细胞冷藏平台)