PBMC细胞:人外周血单核细胞系 细胞专注复苏培养
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
造成实验室细胞污染常见情况总结:细胞培养中Z常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染,大多数较难处理。那么,哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢?我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】1)为节省时间,有人已经用超净台四个多小时,不开紫外灭菌30min,酒精擦拭后直接开始试验;2)器材或者溶液很久没用,未检测是否污染而直接使用;离心管多次使用,枪头为了方便交叉使用;3)超净台不点酒精灯;点了酒精灯放在右上角,而你在左下角做试验;4)不带手套,徒手操作;5)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋,未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具,如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需121°C高压灭菌20分钟后37%烤干备用)。超净台和桌面,东西太多太乱:超净台不是储物箱,什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台!这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面,切忌东西堆积如山,不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞!一不小心“飘”进你的细胞培养板里,细胞就会养的不好,啥时候死了都不知道!【培养箱太久没清洁】细胞污染了,并非直接扔了培养皿就不管了,首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染,如果有而且好几个板子都有类似的污染块,那很可能是培养箱中的水或者空气污染了,得给培养箱做个大扫除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水没了要记得加,还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂,难管理】在传代细胞这种卫生要求高,人多了,不确定因素多了,难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室,实验服当风衣穿,不扣纽扣,不戴鞋套,就容易造成细胞污染;超净台做实验时,喜欢说话聊着做试验,要是还不带口罩,里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢!
PBMC细胞:人外周血单核细胞系 细胞专注复苏培养
细胞生长特性:悬浮
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞形态特性:详见细胞说明书
体内细胞培养及其操作步骤:【瘤细胞悬液接种】1)无菌选取生长良好(有光泽,淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞;2)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨,经80~100目筛网过滤成细胞悬液;3)培养细胞应用PBS洗两遍;4)计数并调整细胞浓度至107~108/ml;5)常规消毒后,于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(0.1ml/部位,>106细胞)。初次接种成功率低,细胞数尽可能多一些;6)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期,以后随着传代潜伏期逐渐缩短,固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤细胞,将这种腹水反复传代,即可成为腹水瘤。初次传代时,腹水常呈血性(含大量红细胞),反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。1)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤,进行细胞计数;2)消毒动物,左下腹穿刺接种106腹水瘤细胞;3)接种腹水瘤细胞后约7~12d,待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9号针头抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水经3000rpm离心15min,收集上清,分装冻存备用。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
PBMC细胞:人外周血单核细胞系 细胞专注复苏培养
细胞背景资料:外周血单核细胞
养科研细胞是生物医学研究的基本功。有三个小经验可以和大家分享一下:1)不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子,觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑?知道为什么吗?烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸氢跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候,炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后,空气变冷,压力骤降,培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳,释放出来。培养基中的碳酸少了,当然会变碱。如果不烧瓶口的话,你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。(当然多多少少还是会有一点越用越碱,因为室温还是比冰箱内的温度高),其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下,你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话,这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌,除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来美国以后发现这里更彻底,超净台内根本就不点酒精灯;2)不要频繁看细胞。对于初学者而言,养细胞就像养孩子一样,有空就要去看看。细胞越是养不好,就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处,特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后,密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围,形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞,培养瓶这么一晃,把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞,细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管,细胞疯长;3)不要怕消化。在传代的时候,初学者往往生怕细胞消化过度,早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯,吹得满瓶子都是气泡。在我看来,用力吹打对细胞的损伤比消化更大。我师兄在做血管平滑肌原代的时候,37度消化过夜,细胞也没事。我一般是等细胞完全变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有,动作要轻柔,尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大,对细胞的伤害也是很大的。
PBMC细胞:人外周血单核细胞系 细胞专注复苏培养
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
KYSE520细胞系(人食管癌细胞冷藏平台)
MKN-74细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
BeWo细胞系(人胎盘绒膜癌细胞冷藏平台)
N-Methyl-N-propargylbenzylaMine
2-BroMo-5-(trifluoroMethyl)pyridine
N-Ethyl-1-naphthylaMine HydrobroMide
Biphenyl-3,4'-dicarboxylic acid
4-[(6-Methylpyrazin-2-yl)oxy]benzoyl chloride, 97%
Bv-2细胞系(小鼠小胶质瘤细胞冷藏平台)
HPAC细胞系(人腺泡上皮癌细胞冷藏平台)
Capan-1细胞系(人癌细胞冷藏平台)
U266细胞系(人瘤细胞冷藏平台)
SW962细胞系(人阴户磷癌细胞冷藏平台)
KYSE-30细胞系(人食管鳞癌细胞冷藏平台)
HuTu-80细胞系(人十二脂肠腺癌细胞冷藏平台)
phenyl thioxochloroformate
Aluminum chloride
3-Aminophenylpropanoic Acid
2,7-dimethylnaphthalene
2-Ethyl-1,3-hexanediol
SW982细胞系(人滑膜肉瘤细胞冷藏平台)
MG-63细胞系(人成骨肉瘤细胞冷藏平台)
NCI-H1963[H1963]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
TSCCA细胞系(人舌鳞癌细胞冷藏平台)
HLEC细胞系(人淋巴内皮细胞冷藏平台)
PL45细胞系(人导管腺癌细胞冷藏平台)
U251细胞系(人神经胶质细胞冷藏平台)
Caov-3[Caov3]细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台)
Pan02细胞系(小鼠癌细胞冷藏平台)
A375[A-375]细胞系(人恶性黑色素瘤细胞冷藏平台)
PIG1细胞系(人皮肤黑色素细胞冷藏平台)
2,3-Difluoro-4-nitroanisole
Methyl 4-hydroxyphenylacetate, 98+%
N-Boc-S-benzyl-L-cysteine, 98%
2,2′-Biquinoline-4,4′-dicarboxylic acid disodiuM salt
HafniuM boride
CCD 841 CON细胞系(人正常结肠上皮细胞冷藏平台)
SRS-82细胞系(小鼠腹水瘤细胞冷藏平台)
HME7细胞系(人黑色素瘤细胞冷藏平台)
HBEpiC细胞系(人支气管上皮细胞冷藏平台)
NCI-H747[H747]细胞系(人盲肠癌细胞冷藏平台)
NCI-H1623[H1623]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
5-(Ethoxycarbonyl)thiophene-2-boronic acid, pinacol ester
DiaMinoglyoxiMe, 98%
Bis(2-Methylallyl) carbonate, 97%
(-)-10-CaMphorsulfonyl Chloride
Poly(ethylene Glycol Succinate)
CNE细胞系(人鼻咽癌细胞冷藏平台)
CCD-1095Sk细胞系(人乳腺浸润性导管癌旁皮肤细胞冷藏平台)
HCGC细胞系(人小脑颗粒细胞冷藏平台)
NCI-H2106[H2106]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
PC-12(高分化)细胞系(大鼠肾上腺嗜铬细胞冷藏平台)
HPAF细胞系(人肺动脉成纤维细胞冷藏平台)
CCD-33Co细胞系(人结肠成纤维细胞冷藏平台)
HMSC-he细胞系(人间充质干细胞冷藏平台)
ZR75-30细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
DMS-153细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
NCI-H1385[H1385]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
NCI-H1648细胞系(人肺癌腺癌细胞冷藏平台)
Caco-2[Caco2]细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台)
R 1610细胞系(仓鼠肺细胞冷藏平台)
CBRH 7919细胞系(大鼠肝癌细胞冷藏平台)
HCT-116细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台)
MC3T3-L1细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台)
4-[2-(1H-indazol-4-yl)-6-[(4-methylsulfonylpiperazin-1-yl)methyl]thieno[3,2-d]pyrimidin-4-yl]morpholine
(Cbz-4-aminomethyl)piperidine
Acid Brown 355
CKLFSF6 ELISA Kit
CAL-51细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
Myla 2059细胞系(人皮肤T淋巴细胞冷藏平台)
NCI-H847[H847]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
HEL细胞系(人红白细胞冷藏平台)
SRS-82细胞系(小鼠腹水瘤细胞冷藏平台)
Fmoc-(Nd-1-(4,4-dimethyl-2,6-dioxo-cyclohex-1-ylidene)ethyl)-L-ornithine
1,3-Dichloro-2-iodo-5-(trifluoromethyl)benzene, 97%
3-Iodobenzylamine, 97%
Manganese(III) meso-tetraphenylporphine acetate
2-Benzyl-2-thiopseudourea hydrochloride
NCI-H1963[H1963]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
TU 686细胞系(人喉癌细胞冷藏平台)
RWPE-1细胞系(人前列腺上皮细胞冷藏平台)
SNB19细胞系(人胶质瘤细胞冷藏平台)
769-P细胞系(人肾癌细胞冷藏平台)
NCI-H460细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
SW756细胞系(人子宫鳞状癌细胞冷藏平台)
Smac/DIABLO ELISA Kit
Human ACAT2 ELISA Kit
Human TEP1 ELISA Kit
Monkey IL-10 (Interleukin-10) ELISA Kit
Rat soluble interleukin-1 receptor Ⅱ,IL-1sRⅡ ELISA Kit
GLβ ELISA Kit
LDLR ELISA Kit
Human SUOX ELISA Kit
EFM-19细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
SNU398细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
HCGC细胞系(人小脑颗粒细胞冷藏平台)
Caco-2[Caco2]细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台)
NCI-H2172[H2172]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
SW756细胞系(人子宫鳞状癌细胞冷藏平台)
GES 1细胞系(人胃粘膜细胞冷藏平台)
RPEC细胞系(大鼠视网膜色素上皮细胞冷藏平台)
JEG3细胞系(人绒毛膜癌细胞冷藏平台)
Loo细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台)
3,5-Dichloro-4-hydroxypyridine
6-nitrobenzoxazol-2(3H)-one
4-Toluenesulfonylurea
DSPP ELISA Kit
NCI-H82[H82]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
Pt K1(NBL-3)细胞系(袋鼠肾细胞冷藏平台)
HBE细胞系(人支气管上皮样细胞冷藏平台)
NCI-H2405细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
COLO-699细胞系(人肺癌腺癌细胞冷藏平台)
3-Fluoro-4-Methoxybenzaldehyde
3-Bromo-4-chlorotoluene
Stearyl Methacrylate (stabilized with MEHQ)
1H-Pyrrolo[2,3-b]pyridine-4-carboxylic acid
Flumazenil
TCMK-1细胞系(小鼠肾小管上皮细胞冷藏平台)
CEM-SS-2细胞系(人T淋巴细胞冷藏平台)
COR-L105细胞系(人原发性肺癌细胞冷藏平台)
SKOV-3细胞系(人卵巢腺癌细胞冷藏平台)
HCCIH03细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
BE(2)-M17细胞系(人神经母细胞冷藏平台)
HCCC9810细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
Mouse Interleukin 1 receptor antagonist, IL-1ra ELISA Kit
Human TACSTD2 ELISA Kit
Human Mannma binding lectin receptor,MBLR ELISA Kit
VTG ELISA Kit
CD5L ELISA Kit
Monkey GAL3 (Galectin 3) ELISA Kit
Human LN ELISA Kit
Human transfusion transmitted virus,TTV ELISA Kit
IPI-2I细胞系(猪回肠上皮细胞冷藏平台)
HEK293F细胞系(人胚肾细胞冷藏平台)
HeLa[Chang Liver]细胞系(人张氏肝细胞冷藏平台)
INS-1细胞系(大鼠胰岛细胞冷藏平台)
HT-1080细胞系(人纤维肉瘤细胞冷藏平台)
Loo细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台)
CCRF-SB细胞系(人B淋巴细胞冷藏平台)
Methyl 5-chloro-2-hydroxybenzoate
Cyclohexanepropionic acid
4,5-Dichloro-2-nitrotoluene
4-(4-Chlorophenyl)phenylacetic acid
4-BroMophenethylaMine, 98%
MHCC97-H细胞系(人高转移性肝癌细胞冷藏平台)
OCI-AML2细胞系(人急性髓系白血病细胞冷藏平台)
NHDF细胞系(人皮肤成纤维细胞冷藏平台)
SKM-1细胞系(人增生异常综合征细胞冷藏平台)
293FT细胞系(人胚肾细胞冷藏平台)
MHCC97-H(MHCC97H)细胞系(人高转移性肝癌细胞冷藏平台)
HEC1-A细胞系(人子宫内膜腺癌细胞冷藏平台)
Acid Orange G
Reactive Black 5
Phenylglyoxal monohydrate
1,3-difluoro-2-propanol
4-Amino-m-cresol
HCC1937细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
NCI-H889[H889]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
NCI-H1648细胞系(人肺癌腺癌细胞冷藏平台)
H1672细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
HCT-8(HRT-18)细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台)
RPMI-8226细胞系(人多发性瘤细胞冷藏平台)
801-D细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
H522细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台)
BSC-1细胞系(猴肾细胞冷藏平台)
SNU-620细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
Farage细胞系(人B淋巴瘤细胞冷藏平台)
5-(TrifluoroMethyl)pyridine-2-carboxylic acid
Methanesulfinic acid sodiuM salt, 95%
p-Toluenesulfonic anhydride, 97%
Selenious acid
PolyraM
KARPAS299细胞系(人淋巴瘤细胞冷藏平台)
UM-UC-1细胞系(人膀胱移行癌细胞冷藏平台)
VSMC细胞系(大鼠胸主动脉平滑肌细胞冷藏平台)
TCAM-2细胞系(人睾丸精原细胞冷藏平台)
U27KM细胞系(小鼠子宫颈癌细胞冷藏平台)
TPC1细胞系(人甲状腺癌细胞冷藏平台)
SodiuM 1-Naphthol-5-sulfonate
Boc-achpa
3-Phenyl-1H-pyrazole-4-carboxaldehyde, 98%
CORYNANTHINE
N-(tert-Butoxycarbonyl)-L-serine beta-Lactone
WM-266-4细胞系(人黑素瘤细胞冷藏平台)
HPF细胞系(人肺成纤维细胞冷藏平台)
WEHI231细胞系(小鼠B淋巴细胞冷藏平台)
McCoy细胞系(小鼠成纤维细胞冷藏平台)
BT-549细胞系(人乳腺管癌细胞冷藏平台)
2PK-3细胞系(小鼠B淋巴瘤细胞冷藏平台)
MRC-9细胞系(人胚肺细胞冷藏平台)
NCI-H82[H82]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
BIU-87细胞系(人膀胱癌细胞冷藏平台)
MC3T3-L1细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台)
Kuffer细胞系(人肝枯否细胞冷藏平台)
NCI-H2330[H2330]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
SW900细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
VMR106细胞系(大鼠骨肉瘤细胞冷藏平台)
Granta519细胞系(人淋巴瘤细胞冷藏平台)
KYSE410细胞系(人食管癌细胞冷藏平台)
TMD8细胞系(人弥漫大B淋巴瘤细胞冷藏平台)
Isoxazol-5-amine
Methyl n-octyl sulphide
2,5-Dihydroxybenzaldehyde
SF1 ELISA Kit
H1792细胞系(人肺癌腺癌细胞冷藏平台)
Het-1A细胞系(人食管鳞状上皮细胞冷藏平台)
HOS细胞系(人骨肉瘤细胞冷藏平台)
PANC-1细胞系(人癌细胞冷藏平台)
Lu-165细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台)
6-Amino-1H-indazole, N1-BOC protected
Pentafluorophenoxyacetyl chloride, 97%
(3-Oxo-3,4-dihydro-2H-benzo[1,4]oxazin-2-yl)-acetic acid
Tetra-n-octylammonium Iodide
1-acetyl-2-piperidinecarboxylic acid(SALTDATA: FREE)
SW116细胞系(人大肠癌细胞冷藏平台)
293F细胞系(人胚肾上皮细胞冷藏平台)
MCF-7细胞系(人乳腺腺癌细胞冷藏平台)
SP2/0细胞系(小鼠瘤细胞冷藏平台)
LO2细胞系(人正常肝细胞冷藏平台)
KYSE30细胞系(人食管鳞癌细胞冷藏平台)
LS-174T细胞系(人结肠腺癌细胞冷藏平台)
IL35 ELISA Kit
TSTA ELISA Kit
Human c-MET/HGFR ELISA Kit
AQP-0 ELISA Kit
Rat C-Peptide ELISA Kit
sVCAM-1 ELISA Kit
FABP2 ELISA Kit
Human plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1 ELISA Kit
NCI-H2106[H2106]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
HHSEC细胞系(人肝窦内皮细胞冷藏平台)
NCI-H1666细胞系(人支气管肺泡腺癌细胞冷藏平台)
HEF细胞系(人胚纤维细胞冷藏平台)