bEnd.3[BEND3]细胞:小鼠脑内皮瘤细胞系 细胞专注复苏培养
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
常见细胞培养中一些问题总结:1)培养基中血清的比例多少合适?血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为5%-15%,不要低于5%或高过20%,因为含量过低会导致细胞营养不足,过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为10%,可以适量加减;2)何时须更换培养基?视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上的更换时间,按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换;3)购买的复苏细胞,为何会有脱落?因为运输的过程中不可避免的会有震荡,收到后可以离心收集;4)购买的细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形?研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可;5)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久;6)收到的冷冻管瓶身破裂,瓶盖有裂纹,或瓶盖脱落之原因?冷冻管瓶盖裂纹,或瓶身破裂,可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当,造成冷冻管裂损,建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱,乃因热胀冷缩之物理现象,冷冻管有可能因此而造成细胞污染,故冷冻管于放入和取出液氮桶时,均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
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细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞形态特性:详见细胞说明书
体内细胞培养及其操作步骤:【瘤细胞悬液接种】1)无菌选取生长良好(有光泽,淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞;2)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨,经80~100目筛网过滤成细胞悬液;3)培养细胞应用PBS洗两遍;4)计数并调整细胞浓度至107~108/ml;5)常规消毒后,于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(0.1ml/部位,>106细胞)。初次接种成功率低,细胞数尽可能多一些;6)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期,以后随着传代潜伏期逐渐缩短,固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤细胞,将这种腹水反复传代,即可成为腹水瘤。初次传代时,腹水常呈血性(含大量红细胞),反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。1)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤,进行细胞计数;2)消毒动物,左下腹穿刺接种106腹水瘤细胞;3)接种腹水瘤细胞后约7~12d,待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9号针头抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水经3000rpm离心15min,收集上清,分装冻存备用。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
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细胞背景资料:详见相关文献介绍
几种实验室细胞培养基成分的作用:1)NaHCO3的作用是什么?与CO2一起形成缓冲系统,保持培养基PH值稳定;2)酸钠的作用是什么?酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源,尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源,但是如果没有葡萄糖的话,细胞也可以代谢酸钠。酸钠的贮存液浓度一般为50mM,-20℃保存,培养基中的终浓度为1mM;3)加入HEPES有何好处?培养基中Z常用的Buffer system是碳酸氢盐,它可提供营养,但却在生理PH值条件下会降低缓冲能力。而HEPES是一种很强的Buffer,加入HEPES能使细胞培养基在PH7.2-7.6条件下缓冲能力增强。Hepes的贮存液浓度一般为1M,常温保存。培养基中的终浓度为25mM,即5ml 1M的Hepes加入到200ml完全培养基中;4)酚红的作用是什么?酚红在培养基中被用来作为PH值指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色;5)谷氨酰胺的作用是什么?几乎所有的细胞对谷氨酰胺都有胶高的要求。谷氨酰胺脱掉氨基后,可作为培养细胞的能量来源,参与蛋白质的合成和能量代谢。在缺少谷氨酰胺时,细胞生长不良而死亡。所以,各种培养液中都含有较大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不稳定,应置-20℃冰冻保存,用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4度冰箱储存两周以上时,应重新加入原来量的谷氨酰胺。试验操作中常配制高浓度(100倍)的谷氨酰胺溶液(1ml/支),分装使用,-20℃保存。使用时,每支1ml的谷氨酰胺加入到99ml完全培养基中,使其终浓度为2mM培养基。
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细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H810[H810]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
SK-MEL-1细胞系(人皮肤黑色素瘤细胞冷藏平台)
SK-OV-3[SKOV-3,SKOV3]细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台)
5-Methyl-1-phenyl-1H-pyrazole-4-carboxylic acid
3-BroMobenzenesulfonyl Chloride
9-Heptadecanone
4,5-Difluoro-2-nitrophenol
Isopropyl cinnaMate, 98%
SK-N-BE细胞系(人神经母细胞冷藏平台)
LL-PK1细胞系(猪肾细胞冷藏平台)
TA2细胞系(小鼠自发高乳腺癌细胞冷藏平台)
SF-539细胞系(人胶质瘤细胞冷藏平台)
SF-539细胞系(人胶质瘤细胞冷藏平台)
SF-539细胞系(人胶质瘤细胞冷藏平台)
MC3T3-L1细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台)
1,5-Diazabicyclo[4.3.0]non-5-ene
4-Hydroxy-6-methoxy-2-methylquinoline
cyclopentane-1,3-dicarboxylic acid
sorbitan monolaurate
2,7-Dihydroxynaphthalene
NCI-H747[H747]细胞系(人盲肠癌细胞冷藏平台)
KMS11细胞系(人多发性瘤细胞冷藏平台)
Mv1Lu(NBL-7)细胞系(水貂肺细胞冷藏平台)
SW948细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台)
HeLa-S3细胞系(人宫颈癌细胞冷藏平台)
M-NFS-60细胞系(小鼠髓性白血病细胞冷藏平台)
SW 780[SW-780,SW780]细胞系(人膀胱移行细胞冷藏平台)
SK-UT-1细胞系(人子宫平滑肌瘤细胞冷藏平台)
HNE-2细胞系(人鼻咽癌细胞冷藏平台)
HA-VSMC细胞系(人主动脉血管平滑肌细胞冷藏平台)
H1672细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
2,3,4-Trifluoroaniline
2,4-DifluorobenzenesulfonaMide, 96%
6-Methylindole-3-carboxaldehyde, 98%
3-Hydroxypyridine
3,4-DiMethylbenzeneboronic acid
MCA38细胞系(小鼠结肠癌细胞冷藏平台)
HBVSMC细胞系(人脑血管平滑肌细胞冷藏平台)
HCC38细胞系(人乳腺导管癌细胞冷藏平台)
SV-HUC-1细胞系(人输尿管上皮永生化细胞冷藏平台)
COLO201细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台)
HUAEC细胞系(人脐动脉内皮细胞冷藏平台)
1-(tert-Butoxycarbonyl)pyrrolidine-3-boronic acid diethanolaMine ester
Iron(II) acetate, 95%
Ethyl 2-aMino-4,5,6,7-tetrahydrobenzo[b]thiophene-3-carboxylate, 99%
Iodopyrazine
NCI-H358细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
PC12细胞系(大鼠肾上腺嗜铬细胞冷藏平台)
ONS-76细胞系(人脑髓母细胞冷藏平台)
PG-LH7细胞系(人肺癌低转移细胞冷藏平台)
K7M2wt细胞系(小鼠骨肉瘤成骨细胞冷藏平台)
NCI-H740[H740]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
OACP4C细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
NCI-H446[H446]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
SUM159细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
NCI-H460细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
MKN-74细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
KYSR450细胞系(人食管癌细胞冷藏平台)
H08910细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台)
Jurkat77细胞系(人T淋巴瘤细胞冷藏平台)
LS174T细胞系(人结肠癌肿瘤细胞冷藏平台)
EMT6细胞系(小鼠乳腺癌细胞冷藏平台)
HCFB细胞系(人心肌成纤维细胞冷藏平台)
3-hydroxybutyraldehyde
2-bromo-6-(trifluoromethyl)pyridine
Ethanamine, 2-(2-fluorophenoxy)- (9CI)
Porcine Cys-C (Cystatin C) ELISA Kit
C33A细胞系(人宫颈癌细胞冷藏平台)
KOPN-8细胞系(人前B淋巴瘤细胞冷藏平台)
HCC 94[HCC941122]细胞系(人子宫鳞癌细胞冷藏平台)
NCI-H661[H661]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
SGC7901细胞系(人低分化胃癌细胞冷藏平台)
4-Fluoro-3-(trifluoromethyl)phenol
4-(Trifluoromethyl)-1,4,5,6-tetrahydropyridine-3-carboxamide, 97%
Dichlorobis(2-(diisopropylphosphino)ethylamine)ruthenium(II), 97%
3-Isochromanone
3-PHENYLPHTHALIDE
HLEpiC细胞系(人晶状体上皮细胞冷藏平台)
U-118 MG细胞系(人脑星形胶质母细胞冷藏平台)
SK-N-AS细胞系(人神经母细胞冷藏平台)
LS1034细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台)
HEL-1细胞系(人胚肺二倍体细胞冷藏平台)
MBT-2细胞系(小鼠膀胱癌细胞冷藏平台)
MCF7B细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
FGβ ELISA Kit
Human AgtrⅠa ELISA Kit
EV71IgM ELISA Kit
LMP-1 ELISA Kit
LDLR ELISA Kit
NP ELISA Kit
Human GLYAT ELISA Kit
Human eIF3a ELISA Kit
NCI-H650[H650]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
PK(15)细胞系(猪肾细胞冷藏平台)
LS 180细胞系(人结肠腺癌细胞冷藏平台)
NUGC-2细胞系(人低分化胃癌腺癌细胞冷藏平台)
MES-13细胞系(小鼠肾小球系膜细胞冷藏平台)
MCF 10A细胞系(人乳腺细胞冷藏平台)
TU686细胞系(人喉癌细胞冷藏平台)
NCI-H1105[H1105]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
cos1细胞系(非洲绿猴肾细胞冷藏平台)
BT-549细胞系(人乳腺管癌细胞冷藏平台)
Benzenediazonium, 4-(trifluoromethyl)-, tetrafluoroborate(1-)
benzyl 2-acetamido-2-deoxy-A-D-*glucopyranoside
1,3-Benzenediamine, N-phenyl-
ASMA ELISA Kit
NCI-H441[H441]细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台)
TALL-104细胞系(人急性T淋巴细胞冷藏平台)
CNE2细胞系(人鼻咽癌细胞冷藏平台)
MLE-12细胞系(小鼠肺上皮细胞冷藏平台)
MA891细胞系(小鼠乳腺癌高转移细胞冷藏平台)
4-Hydroxybenzamide
2-Methyl-5-nitrobenzotrifluoride
3-(2-Chloro-3,4-dimethoxyphenyl)prop-2-enoyl chloride
1-benzyl-1H-pyrazol-3-amine(SALTDATA: FREE)
Boc-L-2-allylglycine dicyclohexylamine salt
NPA细胞系(人甲状腺乳头状癌细胞冷藏平台)
JeKo-1细胞系(人淋巴瘤细胞冷藏平台)
Caco2细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台)
SK-N-SH细胞系(人神经母细胞冷藏平台)
NCI-H209细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
JIMT-1细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
GT39细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
TGFβ3 ELISA Kit
Human platelet-associated immunoglobulins,PAIg ELISA Kit
Human glial fibrillary acidic protein,GFAP ELISA Kit
SOX2 ELISA Kit
PSA U S ELISA Kit
LAB7-2 ELISA Kit
Human E1/ubiquitin-activating enzyme,E1/UBAE ELISA Kit
INHA ELISA Kit
MOLP-8细胞系(人多发性瘤细胞冷藏平台)
HL-7702[L-02]细胞系(人正常肝细胞冷藏平台)
PIEC细胞系(猪髋动脉内皮细胞冷藏平台)
Calu-1细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
U2932细胞系(人弥漫大B淋巴细胞冷藏平台)
Kupffer细胞系(大鼠肝Kupffer细胞冷藏平台)
MDST8细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台)
Ethyl Methoxyacetate
1,10-Phenanthroline Monohydrochloride Monohydrate
(DifluoroMethyl)triMethylsilane
1-(4-Chlorophenyl)cyclopentanecarboxaMide
4-(TrifluoroMethyl)pyridin-3-aMine, 97%
MEL细胞系(小鼠红白血病细胞冷藏平台)
NCI-H358细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
Hela299细胞系(人宫颈癌细胞冷藏平台)
NCCIT细胞系(人畸胎瘤细胞冷藏平台)
EVSA-T细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
EVSA-T细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
293H细胞系(人胚肾细胞冷藏平台)
2-nitrophenyl butyrate
2-Acetyl-4-methylthiophene
2,3-Dimethyl-1-butene
4-Chloro-2-nitroanisole
Terbium(III) fluoride
SK-N-BE(2)细胞系(人神经母细胞冷藏平台)
MDA-MB-453细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
G-401细胞系(人肾癌Wilms细胞冷藏平台)
H-EMC-SS细胞系(人软骨肉瘤细胞冷藏平台)
MDBK(NBL-1)细胞系(牛肾细胞冷藏平台)
CAL-27细胞系(人舌鳞癌细胞冷藏平台)
HEC1-B细胞系(人子宫内膜腺癌细胞冷藏平台)
CaES-17细胞系(人食管癌细胞冷藏平台)
HEp-2细胞系(人喉表皮样癌细胞冷藏平台)
SW1271细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台)
AZ521细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
O-Methylisourea HeMisulfate
N-PhenylethanolaMine, 98%
N,N,N',N'-Tetra-n-butylurea, 97%
BroMopyruvic acid
2,5-DiMethylphenol Standard
KM12细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台)
HBSMC细胞系(人支气管平滑肌细胞冷藏平台)
PAMC82细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
IMR-32细胞系(人神经母细胞冷藏平台)
C-33A细胞系(人宫颈癌细胞冷藏平台)
RSC96细胞系(大鼠雪旺细胞冷藏平台)
2-Nitro-5-trifluoroMethylphenylboronic acid, pinacol ester
Graphite, powder
1-Methyl 2-nitroterephthalate, 97%
4-AMino-o-cresol
(IodoMethyl)triMethylsilane
Nthy-ori3-1细胞系(人甲状腺正常细胞冷藏平台)
NB4细胞系(人急性早幼粒白血病细胞冷藏平台)
HCC1937细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
KG-1细胞系(人急性髓系细胞冷藏平台)
HS776T细胞系(人癌细胞冷藏平台)
NCI-N87[N87]细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
HCC38细胞系(人乳腺导管癌细胞冷藏平台)
JIMT-1细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
ETCC-007细胞系(人乳腺导管癌细胞冷藏平台)
NCI-H1650[H-1650,H1650]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
L-929[L929]细胞系(小鼠结缔组织L细胞冷藏平台)
HS445细胞系(人霍奇金淋巴瘤细胞冷藏平台)
NCI-H128细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
HBVP细胞系(人脑血管周细胞冷藏平台)
HNE3细胞系(人鼻咽癌细胞冷藏平台)
GC-2spd细胞系(小鼠精母细胞冷藏平台)
NCI-H2029[H2029]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
Indene
(1R,2R)-(-)-1,2-Cyclohexanediamino-N,N'-bis(3,5-di-t-butylsalicylidene)cobalt (II)
tetrabutylphosphonium hexafluorophos-phate
CKM ELISA Kit
COS-7细胞系(非洲绿猴SV40转化的肾细胞冷藏平台)
OPM-2细胞系(人瘤细胞冷藏平台)
NCI-H889细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
SK-MEL-1细胞系(人皮肤黑色素瘤细胞冷藏平台)
DU4475细胞系(人乳腺上皮细胞冷藏平台)
1-Methyl-1H-pyrazole-5-carboxylic acid, 97%
N,N-Dimethyl-1-(5-methyl-1H-indol-3-yl)methanamine
Potassium Hexafluorosilicate
(R)-2-(Methoxymethyl)pyrrolidine
Pentamethyldisiloxane
HCCLM3细胞系(人高转移肝癌细胞冷藏平台)
3T6-Swiss albino细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台)
WERI-Rb-1细胞系(人视网膜神经胶质瘤细胞冷藏平台)
UMC-11细胞系(人肺良性肿瘤细胞冷藏平台)
FRhK-4细胞系(恒河猴胚肾细胞冷藏平台)
NCI-H1618[H1618]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
HIPEpiC细胞系(人虹膜色素上皮细胞冷藏平台)
CIV ELISA Kit
Human AST ELISA Kit
Human SDC3 (Syndecan 3) ELISA Kit
MBP-Ab ELISA Kit
α1AT ELISA Kit
IFNα ELISA Kit
Human monocyte chemotactic protein 1/monocyte chemotactic and activating factor,MCP-1/MCAF ELISA Kit
Human Cyclin-D1 ELISA Kit
SW-982细胞系(人滑膜肉瘤细胞冷藏平台)
NCI-H727[H727]细胞系(人肺支气管良性肿瘤细胞冷藏平台)
FAO细胞系(小鼠肝癌细胞冷藏平台)
TF-1细胞系(人红系白血病细胞冷藏平台)