KMST-6细胞:人胚成纤维细胞系 更专注复苏培养 更快复苏
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
为什么培养的细胞要及时传代?体外培养的细胞大多具有生长接触YZ的特性,也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候,它就会停止生长,及时传代后,细胞的生长得以继续。培养细胞生长减慢的原因在哪些?其解决办法有哪些?可能的原因有:更换了不同的培养液或血清;培养液中一些细胞生长必需成分如谷氨眈肢或生长因子等耗尽或缺乏或己被破坏;培养物中有少量细菌或真菌污染;试剂保存不当;比较新培养液与原培养液成分,比较新血清与旧血清等,找出其它可能的原因。解决办法:增加起始培养细胞浓度;让细胞逐渐适应新培养液;换入新鲜配制培养液;补加谷氨酷肢或生长因子等;用无抗生素培养液培养,如发现污染,去弃培养物,或用抗生素CJ;血清需保存在5℃到20℃; 培养液需在2-8℃避光保存;含血清完全培养液在2-8℃保存,并在2周内用完;分离培养物,检测支原体。冷冻管应如何解冻?取出冷冻管后,须立即放入37℃水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1-2分钟内大部分融化,特别注意,需残留一小块冰块,就可拿到超净工作台操作细胞,用75%酒精消毒冻存管,用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时,必须注意安全,预防冷冻管爆裂。
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细胞生长特性:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞形态特性:详见细胞说明书
养了几年细胞,说一点自己培养细胞方面的看法:1)培养细胞前,可以看看细胞特点说明书,包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等;2)不同细胞生长周期不同,有的生长很快,比如说MDA-MB-231,传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了,有的又是特别慢,等的人心焦,BT474就是,传代是一分二,复苏起始的时候两周多才能长满,所以就要在培养细胞的过程中多多摸索了;3)对于娇弱的细胞,就得细心呵护了,胰酶消化不能过久,吹得时候要轻柔,离心时候也要注意转速和时间,每天都要去看一下细胞,肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况;4)冻存细胞复苏后第二天Z好更换一次培养基;5)培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次;6)养细胞的教训:不能偷懒!细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋。1)不管买的细胞、惠赠的细胞,刚拿到手赶紧做两件事:检测是否有支原体污染; 迅速扩增冻存;2)发现有污染迅速处理掉,特别是当你养了很多种细胞时; 细菌污染,真菌污染很容易发现,支原体污染的话,细胞会长的慢,买个支原体检测的kit定期检测一下;3)传代细胞日常的值日清洁是必须的,此外还要定期熏蒸;4)细胞的传代一定要规律,保持相同的confluency和传代时间间隔,不要随心所欲或者拖延;5)注意个人卫生。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
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细胞背景资料:胚成纤维细胞;女性
养科研细胞是生物医学研究的基本功。有三个小经验可以和大家分享一下:1)不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子,觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑?知道为什么吗?烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸氢跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候,炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后,空气变冷,压力骤降,培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳,释放出来。培养基中的碳酸少了,当然会变碱。如果不烧瓶口的话,你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。(当然多多少少还是会有一点越用越碱,因为室温还是比冰箱内的温度高),其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下,你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话,这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌,除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来美国以后发现这里更彻底,超净台内根本就不点酒精灯;2)不要频繁看细胞。对于初学者而言,养细胞就像养孩子一样,有空就要去看看。细胞越是养不好,就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处,特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后,密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围,形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞,培养瓶这么一晃,把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞,细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管,细胞疯长;3)不要怕消化。在传代的时候,初学者往往生怕细胞消化过度,早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯,吹得满瓶子都是气泡。在我看来,用力吹打对细胞的损伤比消化更大。我师兄在做血管平滑肌原代的时候,37度消化过夜,细胞也没事。我一般是等细胞完全变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有,动作要轻柔,尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大,对细胞的伤害也是很大的。
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细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
PAXC-012细胞系(人源癌细胞冷藏平台)
NCI-H1734[H-1734,H1734]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
SW962[SW 962,SW-962]细胞系(人阴户磷癌细胞冷藏平台)
gaMMa-Terpinene
Zinc copper couple
(R)-Glycidyl Trityl Ether
3-AMino-5-(trifluoroMethyl)benzonitrile
3,4-DiMethylthieno[2,3-b]thiophene-2-carbaldehyde, 97%
ACC-M细胞系(人涎腺癌细胞冷藏平台)
JEG细胞系(人绒毛膜癌细胞冷藏平台)
NUTU-19细胞系(大鼠卵巢癌细胞冷藏平台)
HP615细胞系(小鼠肺癌细胞冷藏平台)
MDA-MB-157细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
MDA-MB-157细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
BDCM细胞系(人急性髓系细胞冷藏平台)
5-Androsten-3beta,7beta-diol-17-one
Borane-tetrahydrofuran complex
2,6-Dimethoxybenzaldehyde
pyrithioxine
2-Chlorofluorobenzene
LOU-NH91细胞系(人肺癌鳞癌细胞冷藏平台)
HCC-78细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台)
NCI-H1755细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
HO8910细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台)
NCI-H596细胞系(人肺腺鳞癌细胞冷藏平台)
NRK-52E细胞系(大鼠肾细胞冷藏平台)
NCI-H1395细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台)
NCI-H865[H865]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
NCI-H2087[H2087]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
HHFK细胞系(人毛囊角质细胞冷藏平台)
HCC-44细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
1-MethyliMidazole-2-thiol
Ursodeoxycholic acid, 99%
N-BenzylethylenediaMine, 98%
Alginic acid froM brown algae
MES
HCPEpiC细胞系(人脉络丛上皮细胞冷藏平台)
ZR-75-1细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
NCI-H1436细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
NCTC clone 929细胞系(小鼠成纤维细胞冷藏平台)
PAXC-011细胞系(人源癌细胞冷藏平台)
SPC-A-1细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台)
4-Chloro-3-trifluoroMethylphenylboronic acid, pinacol ester
CesiuM fluoride, 99%, for analysis
4-[2-(DiMethylaMino)ethoxy]benzylaMine, 97%
1-(4-Nitrophenyl)-3-Methyl-5-phenylforMazan
2',3',5'-Tri-O-acetyl-6-chloro-2-iodopurine Riboside
T-CEM细胞系(人T淋巴细胞冷藏平台)
KATOⅢ细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
JB6-C30细胞系(小鼠皮肤细胞冷藏平台)
293 AAV细胞系(人胚肾细胞冷藏平台)
FBM细胞系(人胎儿间充质细胞冷藏平台)
NCI-H719[H719]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
293 Ad5细胞系(人原胚肾转化细胞冷藏平台)
HCC-366细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
PC-3[PC3]细胞系(人前列腺癌细胞冷藏平台)
BE2C细胞系(人神经母细胞冷藏平台)
HT-ori3细胞系(人正常甲状腺细胞冷藏平台)
A-375[A375]细胞系(人恶性黑色素瘤细胞冷藏平台)
MLO-Y4细胞系(小鼠骨样细胞冷藏平台)
TCMK-1细胞系(小鼠肾小管上皮细胞冷藏平台)
Caov-3细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台)
L-M(TK-)细胞系(小鼠结缔组织细胞冷藏平台)
GES细胞系(人肾上皮细胞冷藏平台)
1-benzhydryl-3-fluoroazetidine
R-(-)-Fluoxetine hydrochloride
N-(2-Bromobenzyl)acetamide
KLK 1 ELISA Kit
RAG细胞系(小鼠肾腺癌细胞冷藏平台)
MN9D细胞系(小鼠中脑多巴胺能神经元细胞冷藏平台)
MDA-MB-231细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
KE-39细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
MARC-145细胞系(猴肾细胞冷藏平台)
N-(tert-Butoxycarbonyl)-O-tert-butyl-L-tyrosine
2-Amino-5,6-dimethylbenzothiazole
2-(Aminooxy)propane hydrochloride
2-Amino-6-chloropurine Riboside
2-(Trifluoromethyl)benzimidazole
TA2细胞系(小鼠自发高乳腺癌细胞冷藏平台)
CCL13细胞系(人张氏肝细胞冷藏平台)
SW527[SW 527,SW-527]细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
EAG3细胞系(人子宫内膜低分化腺癌细胞冷藏平台)
BE(2)M17细胞系(人成神经细胞冷藏平台)
Daudi细胞系(人Burkitt淋巴瘤细胞冷藏平台)
BC-028细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
OSC ELISA Kit
Human HbH ELISA Kit
Human HHAT ELISA Kit
RXFP1 ELISA Kit
MCP-2/CCL8 ELISA Kit
β2-GP1 Ab lgA ELISA Kit
Human CPOX ELISA Kit
APOA1 ELISA Kit
HHFK细胞系(人毛囊角质细胞冷藏平台)
KP-N-NS细胞系(人肾上腺神经母细胞冷藏平台)
BRL-3A细胞系(大鼠正常肝细胞冷藏平台)
M145细胞系(猴肾C细胞冷藏平台)
COLO394细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台)
Hs 746T细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
HK-2C细胞系(人胚肾上皮细胞冷藏平台)
MODE-K细胞系(小鼠小肠上皮细胞冷藏平台)
293F细胞系(人胚肾上皮细胞冷藏平台)
COR-L23细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
4-(N,N-Dimethylaminocarbonyl)phenylboronic acid
2-(methoxymethyl)piperidine
2,3,4,5-Tetrahydro-1,5-methano-1H-3-benzazepine
Porcine BNP (Brain Natriuretic Peptide) ELISA Kit
PtK1(NBL-3)细胞系(袋鼠肾细胞冷藏平台)
MC-38细胞系(小鼠结肠癌细胞冷藏平台)
FBHE细胞系(牛心内皮细胞冷藏平台)
MAVER-1细胞系(人淋巴细胞冷藏平台)
TSCC1细胞系(人源口腔鳞状细胞冷藏平台)
(S)-4-Boc-6,6-dimethyl-morpholine-3-carboxylicacid
TBPE (=Tetrabromophenolphthalein Ethyl Ester Potassium Salt) [Sensitive spectrophotometric reagent for amines, quaternary ammonium salts and other cations]
Manganese(II) chloride tetrahydrofuran complex (1:2), 97%
N-Bromomethyl-2,3-dichloromaleimide
1,3-CYCLOOCTADIENE
STC-1细胞系(小鼠小肠内分泌细胞冷藏平台)
hADSCs细胞系(人脂肪间充质干细胞冷藏平台)
CHP-100细胞系(人成神经细胞冷藏平台)
4T1细胞系(小鼠乳腺癌细胞冷藏平台)
NUGC-2细胞系(人低分化胃癌腺癌细胞冷藏平台)
NCI-H748[H748]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
MC-3T3细胞系(小鼠前成骨细胞冷藏平台)
COL4α1 ELISA Kit
Human IGF-1R ELISA Kit
Human protein disulfide isomerase,PDI ELISA Kit
TI ELISA Kit
IL-18 ELISA Kit
TRF ELISA Kit
Human Dopamine D1 receptor,D1R ELISA Kit
Human IGFBP-1 ELISA Kit
HT-144细胞系(人恶性黑色素瘤细胞冷藏平台)
TPC-1细胞系(人甲状腺乳头状癌细胞冷藏平台)
KATO Ⅲ细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
NCI-H647细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
NCI-H196细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
DV-90细胞系(人肺癌腺癌细胞冷藏平台)
RAW264.7细胞系(小鼠单核巨噬细胞冷藏平台)
3-BroMo-4-Methylthiophene
2,1,3-Benzoxadiazol-4-aMine
NA
2-(BOC-AMino)-4-broMopyridine
1-BroMo-2,4-dichlorobenzene, 99%
OVTOKO细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台)
RPMI 1846细胞系(人黑色素瘤细胞冷藏平台)
NCI-H1155[H1155]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
L Wnt-3A细胞系(小鼠皮下结缔组织细胞冷藏平台)
HCGC细胞系(人小脑颗粒细胞冷藏平台)
A875细胞系(人黑色素瘤细胞冷藏平台)
NCI-H2171[H2171]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
2-Cyanoethylmethyldimethoxysilane
tetratriacontane
Tetraphenyllead
Antioxidant 300
1-(2-CHLOROETHYL)-4-FLUOROBENZENE
HS578T细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
Nthy-ori 3-1细胞系(人甲状腺正常细胞冷藏平台)
NCI-H1688[H1688]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
NCI-H378[H378]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
HDQ-P1细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
COLO394细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台)
293 AAV细胞系(人胚肾细胞冷藏平台)
HISMC细胞系(人肠平滑肌细胞冷藏平台)
MT-3细胞系(人脐血白细胞冷藏平台)
TC-1细胞系(小鼠肺上皮细胞冷藏平台)
HCT 116细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台)
N,N'-Di-n-butylthiourea, 98%
1-Benzyloxycarbonylpyrrolidine-3-carboxaldehyde, 97%
EthylaMine hydrochloride, 98%
Thifensulfuron
Thiostrepton froM StreptoMyces azureus
SW480细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台)
A-431细胞系(人表皮癌细胞冷藏平台)
Hs695T细胞系(人恶性黑色素瘤细胞冷藏平台)
DMS153细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
HCC202细胞系(人乳腺原发性导管癌细胞冷藏平台)
GT1-1细胞系(小鼠垂体瘤细胞冷藏平台)
TriMethyl[3-(triMethoxysilyl)propyl]aMMoniuM Chloride (ca. 50% in Methanol)
2-Thienylboronic acid, 97%, May contain varying aMounts of anhydride
Cyclohexyl Methacrylate, 97%, stabilized
PHENYLSELENENYL CHLORIDE
1,1,1-Trifluoroacetone
NCI-H1417[H1417]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
CaES-17细胞系(人食管癌细胞冷藏平台)
HEL299细胞系(人白血病细胞冷藏平台)
Rat podocyte细胞系(大鼠肾足细胞冷藏平台)
NCI-H1836[H1836]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
FBHE细胞系(牛心内皮细胞冷藏平台)
FU-OV-1细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台)
NCI-H1573细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台)
MASMC细胞系(小鼠气道平滑肌细胞冷藏平台)
HMEC细胞系(人乳腺上皮细胞冷藏平台)
3T3-Swissalbino细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台)
NB-4细胞系(人急性早幼粒白血病细胞冷藏平台)
HECV细胞系(人血管内皮细胞冷藏平台)
HLF-a细胞系(人肺细胞冷藏平台)
P3HR-1细胞系(人B淋巴瘤细胞冷藏平台)
NCI-H187[H187]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
NCI-H1781[H1781]细胞系(人细支气管肺泡癌细胞冷藏平台)
5-Bromo-3-Formylpyridine
Torasemide
4-(pyridin-2-yl)-1,3-thiazol-2-amine
TJP1 ELISA Kit
KG-1细胞系(人急性髓系细胞冷藏平台)
BSC-1细胞系(猴肾细胞冷藏平台)
RK-13细胞系(兔肾细胞冷藏平台)
KATO Ⅲ细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
RCSMC细胞系(大鼠冠状动脉平滑肌细胞冷藏平台)
Tri-tert-butylphosphonium Tetraphenylborate
Isobutyl Styryl Ketone
2,5-Dideoxy-2,5-imino-D-mannitol ,98%
1-(4-Bromo-2-methylphenyl)-2-thiourea
Ethyl 1-(ethoxymethyl)-1H-imidazole-4-carboxylate
RPMI 2650细胞系(人鼻腔上皮细胞冷藏平台)
HR-8348细胞系(人直肠腺癌细胞冷藏平台)
H22细胞系(小鼠肝癌细胞冷藏平台)
Jurkat CA细胞系(人急性T淋巴细胞冷藏平台)
Calu-3细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台)
SW 900[SW-900]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
THP-1细胞系(人急性单核细胞冷藏平台)
17-OHP ELISA Kit
Human PF-4/CXCL4 ELISA Kit
Human Elastase ELISA Kit
APOH ELISA Kit
IL-27 ELISA Kit
IFNG ELISA Kit
ETFβ ELISA Kit
Human CCNK ELISA Kit
SW626细胞系(人卵巢腺癌细胞冷藏平台)
RL-952细胞系(人子宫内膜腺癌细胞冷藏平台)
HEK293细胞系(人胚肾细胞冷藏平台)
SNU-739细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)