Hep3B细胞：人肝癌细胞系 更专注复苏培养 更快复苏

Hep3B细胞：人肝癌细胞系 更专注复苏培养 更快复苏
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
细胞冻存的步骤：1)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天Z好换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min，10分钟)；2)去上清液，加入含20%小牛血清的完全培养基，于4℃预冷15分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为5×106～1×107/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；3)将分装上述细胞悬液于2ml冻存管中，每管0.25ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；4)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中，-80℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜，放入液氮罐)Z好;或者可以在4℃，2h;然后转到-20℃，2h;-80℃，2h;放入液氮罐；5)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，Z好取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
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细胞生长特性：贴壁生长
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞形态特性：上皮样
体内细胞培养及其操作步骤：【瘤细胞悬液接种】1)无菌选取生长良好(有光泽，淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞；2)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨，经80～100目筛网过滤成细胞悬液；3)培养细胞应用PBS洗两遍；4)计数并调整细胞浓度至107～108／ml；5)常规消毒后，于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(0.1ml／部位，＞106细胞)。初次接种成功率低，细胞数尽可能多一些；6)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期，以后随着传代潜伏期逐渐缩短，固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤细胞，将这种腹水反复传代，即可成为腹水瘤。初次传代时，腹水常呈血性(含大量红细胞)，反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。1)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤，进行细胞计数；2)消毒动物，左下腹穿刺接种106腹水瘤细胞；3)接种腹水瘤细胞后约7~12d，待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用9号针头抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml；4)抽取的腹水经3000rpm离心15min，收集上清，分装冻存备用。
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
Hep3B细胞：人肝癌细胞系 更专注复苏培养 更快复苏
细胞背景资料：Hep-3b细胞建系于1979年，源自一位患有肝癌的7岁黑人。该细胞产生甲胎蛋白（alpha-fetoprotein)、乙肝表面抗原（BHsAg) 、白蛋白、巨球蛋白、α- 抗胰蛋白酶（alphal-antitrypsin)、转铁蛋白、补体（C3)、C3活性载体，纤维原等，具有广泛的研究价值。
养科研细胞是生物医学研究的基本功。有三个小经验可以和大家分享一下：1)不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子，觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑？知道为什么吗？烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸氢跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候，炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后，空气变冷，压力骤降，培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳，释放出来。培养基中的碳酸少了，当然会变碱。如果不烧瓶口的话，你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。(当然多多少少还是会有一点越用越碱，因为室温还是比冰箱内的温度高)，其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下，你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话，这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌，除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来美国以后发现这里更彻底，超净台内根本就不点酒精灯；2)不要频繁看细胞。对于初学者而言，养细胞就像养孩子一样，有空就要去看看。细胞越是养不好，就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处，特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后，密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围，形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞，培养瓶这么一晃，把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞，细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管，细胞疯长；3)不要怕消化。在传代的时候，初学者往往生怕细胞消化过度，早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯，吹得满瓶子都是气泡。在我看来，用力吹打对细胞的损伤比消化更大。我师兄在做血管平滑肌原代的时候，37度消化过夜，细胞也没事。我一般是等细胞完全变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有，动作要轻柔，尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大，对细胞的伤害也是很大的。
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细胞传代方法：1：4—1：6传代，每周换液2次

PC-3细胞系(人前列腺癌细胞冷藏平台）
LS180细胞系(人结肠腺癌细胞冷藏平台）
HB611细胞系(人肝母细胞冷藏平台）
3-Methyl-4-nitropyridine N-Oxide
1-Methyl-1H-indole-7-carbonitrile
2,3-Difluorotoluene
N-Isopropyl 2-broMobenzaMide
TriMethylsilyl cyanide, 98%
HSC-T6细胞系(大鼠肝星状细胞冷藏平台）
BC-027细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台）
HSC细胞系(小鼠肝星状细胞冷藏平台）
U-118MG细胞系(人脑星形胶质母细胞冷藏平台）
Tsu-Pr1细胞系(人非雄激素依赖型前列腺癌细胞冷藏平台）
BS-C-1(BSC-1)细胞系(非洲绿猴肾细胞冷藏平台）
COLO201细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台）
2,4-Dimethylbenzoic acid
8-hydroxyquinoline-7-carbaldehyde
N-Phenylmaleimide
1-Fluoro-4-nitronaphthalene
2-BUTENE-1,4-BIS(TRIPHENYLPHOSPHONIUM CHLORIDE)
KPL-4细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台）
MUTZ-3细胞系(人急性非淋巴白血病细胞冷藏平台）
HEp-2细胞系(人喉表皮样癌细胞冷藏平台）
SK-N-DZ细胞系(人成神经瘤细胞冷藏平台）
A-172[A172]细胞系(人脑胶质瘤细胞冷藏平台）
THC8307细胞系(人高分化结肠腺癌细胞冷藏平台）
LS174T细胞系(人结肠癌肿瘤细胞冷藏平台）
RAMOS(RA.1)细胞系(人B淋巴细胞冷藏平台）
RGC-5细胞系(小鼠视网膜神经节细胞冷藏平台）
NCI-H1341细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
TA2细胞系(小鼠自发高乳腺癌细胞冷藏平台）
PhenylazoforMic acid 2-phenylhydrazide coMpound with 1,5-Diphenylcarbohydrazide, ACS
2-(2-Ethylhexyloxy)-5-Methoxy-1,4-benzenediMethanol, 98%
4'-Methoxybiphenyl-3-carboxylic acid, 95%
Lactobionic acid
N,N-DiMethylnonylaMine
SK-N-DZ细胞系(人成神经瘤细胞冷藏平台）
NCI-H660细胞系(人前列腺癌细胞冷藏平台）
SUP-T1细胞系(人T淋巴母细胞冷藏平台）
U-138 MG细胞系(人脑星形胶质母细胞冷藏平台）
TE671细胞系(人胚胎横纹肌瘤细胞冷藏平台）
HBZY-1细胞系(大鼠肾小球系膜细胞冷藏平台）
N-(2-Hydroxyethyl)acrylaMide (stabilized with MEHQ)
(2-Chloro-3-fluoropyridin-4-yl)Methanol
1-Trityl-1H-iMidazole-4-carboxaldehyde, 95%
MERRIFIELD RESIN
2-Ethoxybenzaldehyde
RBE细胞系(人肝胆管癌细胞冷藏平台）
VP267细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台）
HEC1-A细胞系(人子宫内膜腺癌细胞冷藏平台）
ONS-76细胞系(人脑髓母细胞冷藏平台）
BC-027细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台）
FU97细胞系(人胃癌细胞冷藏平台）
OVMANA细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台）
ROS1728细胞系(大鼠成骨细胞冷藏平台）
NCI-H2227[H2227]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
A-375细胞系(人恶性黑色素瘤细胞冷藏平台）
NCI-H3122细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
Mono-Mac-6细胞系(人急性单核细胞冷藏平台）
QGY-7703细胞系(人肝癌细胞冷藏平台）
LWnt-3A细胞系(小鼠皮下结缔组织细胞冷藏平台）
MOLM-16细胞系(人白血病细胞冷藏平台）
SLMT-1细胞系(人食管鳞癌细胞冷藏平台）
JB6-C41细胞系(小鼠皮肤细胞冷藏平台）
5-Phenyl-1H-tetrazole
dichloromethyloctadecylsilane
N-(4-Methylphenyl)sulfonylacetamide
CSFV ELISA Kit
6T-CEM细胞系(人T淋巴白血病细胞冷藏平台）
BMSC细胞系(人间充质干细胞冷藏平台）
Hela-cx40细胞系(人宫颈癌细胞冷藏平台）
NCI-H2347细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
CLL细胞系(人慢性淋巴白血病细胞冷藏平台）
4-(DIMETHYLAMINO)PHENYLDIPHENYLPHOSPHINE
1-Chloronaphthalene
3-cyclobutylpropanoic acid(SALTDATA: FREE)
4-Methoxyphenyl 2,4,6-Tri-O-benzyl-beta-D-galactopyranoside
Phenyl p-Tolyl Sulfide
U-87MG细胞系(人脑星形胶质母细胞冷藏平台）
NR8383细胞系(大鼠肺泡巨噬细胞冷藏平台）
HCEC-12细胞系(人角膜内皮细胞冷藏平台）
MDCK(NBL-2)细胞系(犬肾细胞冷藏平台）
YD-38细胞系(人肺鳞状细胞冷藏平台）
HuTu 80细胞系(人十二指肠腺癌细胞冷藏平台）
CNE2细胞系(人鼻咽癌细胞冷藏平台）
AFU ELISA Kit
Human EGR1 ELISA Kit
SPA ELISA Kit
Chicken Herpes simplexvirus Ⅱ antibody,HSVⅡ-Ab ELISA Kit
SDC1 ELISA Kit
ALV-AG ELISA Kit
Human Secretin ELISA Kit
Human Vascular Endothelial cell Growth Factor C,VEGF-C ELISA Kit
RBMVEC细胞系(大鼠脑微血管内皮细胞冷藏平台）
293 Ad5细胞系(人原胚肾转化细胞冷藏平台）
SW780细胞系(人膀胱移行癌细胞冷藏平台）
UACC-812细胞系(人乳腺导管瘤细胞冷藏平台）
L-363细胞系(人多发性瘤细胞冷藏平台）
EFM-192C细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台）
LN-229细胞系(人大脑神经母瘤细胞冷藏平台）
CaES-17细胞系(人食管癌细胞冷藏平台）
UACC812细胞系(人乳腺导管瘤细胞冷藏平台）
H2126细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
2,5-Diaminopyridine
2-Nonanol
Dihexyl adipate
apo-A1 ELISA Kit
K7M2 wt细胞系(小鼠骨肉瘤成骨细胞冷藏平台）
C4-2细胞系(人前列腺癌细胞冷藏平台）
CEM-C7细胞系(人外周血急性淋巴细胞冷藏平台）
CX-1细胞系(人大肠癌细胞冷藏平台）
RKN细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台）
1,5-BIS(4-AMINOPHENOXY)PENTANE
(S)-3-Aminopiperidine-2-one
4-(Aminomethyl)benzonitrile 98%
4-(4-Pyridyl)morpholine
Isovaleric Anhydride
CAL-85-1细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台）
T6-Swiss albino细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台）
SEG1细胞系(人食管腺癌细胞冷藏平台）
JF-305细胞系(人癌细胞冷藏平台）
L Wnt 3A细胞系(小鼠皮下结缔组织细胞冷藏平台）
HDLEC细胞系(人淋巴管内皮细胞冷藏平台）
C1498细胞系(小鼠白血病细胞冷藏平台）
IL-35 ELISA Kit
MHC III/AgB I/H-1 III ELISA Kit
Human GP-73 ELISA Kit
ECF ELISA Kit
PⅠCP ELISA Kit
LCN2/NGAL ELISA Kit
PDK4 ELISA Kit
Human UCP2 ELISA Kit
L Wnt 3A细胞系(小鼠皮下结缔组织细胞冷藏平台）
SMC-1细胞系(人胸膜瘤细胞冷藏平台）
NCI-H1781细胞系(人支气管肺泡腺癌细胞冷藏平台）
HFT-8810[HFT8810]细胞系(人胎儿胸腺细胞冷藏平台）
YD-38细胞系(人肺鳞状细胞冷藏平台）
MDBK(NBL-1)细胞系(牛肾细胞冷藏平台）
HCC202细胞系(人乳腺原发性导管癌细胞冷藏平台）
Ciprofloxacin hydrochloride Monohydrate
3,5-Bis(trifluoroMethyl)benzeneboronic acid (contains varying aMounts of anhydride)
HarMine Hydrochloride
5-BroMo-4-Methylpyridine-2-carboxylic acid
PotassiuM chroMate, ACS reagent
AKR细胞系(小鼠食管癌细胞冷藏平台）
CHRF细胞系(人巨核细胞冷藏平台）
NCI-H1869[H1869]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
HRC-9999细胞系(人直肠腺癌细胞冷藏平台）
HL7702细胞系(人正常肝细胞冷藏平台）
HT-22细胞系(小鼠海马神经元细胞冷藏平台）
JVM-3细胞系(人慢性髓细胞冷藏平台）
2-Aminobenzothiazole
Stavudine
Tanshinone I
DL-Menthol
2-CHLOROBENZALDEHYDE THIOSEMICARBAZONE
AAV293细胞系(人胚肾细胞冷藏平台）
VMR106细胞系(大鼠骨肉瘤细胞冷藏平台）
NCI-H2029[H2029]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
NCI-H865[H865]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
3T3-L1细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台）
PC-3M-2B4细胞系(人前列腺癌低转移细胞冷藏平台）
PED细胞系(猪内皮细胞冷藏平台）
NCI-H2405[H2405]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
LS 180细胞系(人结肠腺癌细胞冷藏平台）
CAL-148细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台）
CoC1细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台）
4,6-DiMethyl-2-MethylsulfonylpyriMidine
4-AcetaMidobenzenesulfonyl azide, 97%
(^+)-2-AMino-1-propanol, 98%
1-AMino-2-naphthol hydrochloride
SulfadiMethoxine
3T3-Swissalbino细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台）
HCGC细胞系(人小脑颗粒细胞冷藏平台）
293A细胞系(人胚肾细胞冷藏平台）
Hep-3B[Hep3B]细胞系(人肝癌细胞冷藏平台）
Mono-Mac-6细胞系(人急性单核细胞冷藏平台）
MHCC97-H(MHCC97H)细胞系(人高转移性肝癌细胞冷藏平台）
4-(Pyrrolidinocarbonyl)aniline
3-Methylbenzyl alcohol, 97%
5,5,8,8-TetraMethyl-5,6,7,8-tetrahydro-2-naphthalenecarboxylic acid, 97%
ETHYL 5-METHOXYINDOLE-2-CARBOXYLATE
N-EthylsucciniMide
OVHM细胞系(小鼠卵巢癌细胞冷藏平台）
DF-1细胞系(鸡胚成纤维细胞冷藏平台）
HONE1细胞系(人鼻咽癌细胞冷藏平台）
BT-474细胞系(人乳腺导管瘤细胞冷藏平台）
NCI-H2444[H2444]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
IHH-4细胞系(人甲状腺癌细胞冷藏平台）
HCT-116细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台）
OUMS-27细胞系(人软骨肉瘤细胞冷藏平台）
RCM-1细胞系(人直肠腺癌细胞冷藏平台）
IEC-18细胞系(大鼠回肠细胞冷藏平台）
PC-2细胞系(人癌细胞冷藏平台）
HDF-a细胞系(人成纤维细胞冷藏平台）
U-87 MG细胞系(人脑星形胶质母细胞冷藏平台）
L1210细胞系(小鼠白血病细胞冷藏平台）
HUV-EC-C[HUVEC]细胞系(人脐静脉内皮细胞冷藏平台）
hBMSCs细胞系(人间充质干细胞冷藏平台）
NIE-115细胞系(小鼠神经母细胞冷藏平台）
Fmoc-Asn(Trt)-OPfp
1-Butyl-4-methylpyridinium Bromide
Acetic-d3 acid, sodium salt
PRSS ELISA Kit
THLE-2细胞系(人肝永生化细胞冷藏平台）
NK-92MI[NK92MI]细胞系(人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞冷藏平台）
RPE细胞系(人视网膜色素上皮细胞冷藏平台）
LO2细胞系(人正常肝细胞冷藏平台）
NCI-H1092[H1092]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
SucciMer
m-Tolylmagnesium Bromide (19% in Tetrahydrofuran, ca. 1mol/L)
3-Nitro-1,2-benzenediol
2',3'-Difluoropropiophenone 97%
4-ISOPROPYLCYCLOHEXANONE
SNU-886细胞系(人肝癌细胞冷藏平台）
NCI-H157细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台）
A2058细胞系(人黑色素瘤细胞冷藏平台）
GA-10(Clone 4)细胞系(人B淋巴细胞冷藏平台）
NUGC-4细胞系(人胃癌细胞冷藏平台）
SW579[SW579,SW-579]细胞系(人甲状腺鳞癌细胞冷藏平台）
KMST-6细胞系(人胚成纤维细胞冷藏平台）
GRP ELISA Kit
TA ELISA Kit
Human HNRPU (Heterogeneous Nuclear Ribonucleoprotein U) ELISA Kit
DVD/DHVD 3 ELISA Kit
IL-1β ELISA Kit
P27 ELISA Kit
Human D2R ELISA Kit
Human Fibrinogen Degradation Product，FDP ELISA Kit
C3H/10T1/2,Clone8细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台）
CL-1细胞系(人肝细胞冷藏平台）
Y3-Ag1.2.3细胞系(大鼠瘤细胞冷藏平台）
NCTC clone 929细胞系(小鼠成纤维细胞冷藏平台）