J774A1细胞:小鼠单核巨噬细胞系 复苏培养细胞平台
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作):1)吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在1-2min);2)镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散;3)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养;4)注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存;特别注意:(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)1)收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清,(原瓶培养基的继续使用时间Z长不宜超过72小时);2)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养;3)如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
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细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞形态特性:详见细胞说明书
解冻细胞常见实验问题分析及推荐解决方法:在解冻冻存细胞时,发现会出现存活率低、大量细胞碎片及生长缓慢等问题,究竟是什么原因导致,我们该怎么进行解决?以下是国内外细胞培养专家针对解冻细胞实验问题,总结的一些解决方案!出现低存活率的可能原因及推荐解决方案如下:1)解冻过程中细胞裂解,推荐的解决方案:可预期到一定量的细胞死亡,因此细胞的浓度应足够高,考虑到这一损失。起始浓度为1*10(6)至1*10(7)细胞/毫升;2)解冻过程中的问题,推荐的解决方案:在-70℃至-80℃下保存冷冻的培养物,保存时间为1-5天,但这不是保存的方法。在37℃充分解冻后应立即开始培养;3)对冷冻液过敏,推荐的解决方案:A.完全或部分更换培养基,减少培养基中冷冻液的量。在24小时后更换培养液体可全部去除冷冻液。B.留出更多时间供培养物恢复。有时细胞需要几周时间才能形成单层或密集的悬浮物,取决于冷冻时细胞的年龄或传代次数或在生长阶段中的位置。冷冻的条件在对数期;4)被冷冻的原种细胞的年龄或冷冻时培养物的年龄,推荐的解决方案:解冻Z近冷冻的细胞。细胞处于冷冻状态的时间越长,存活率越低。检查冷冻细胞的时间和方法。在冷冻时细胞应处于对数期。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
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细胞背景资料:详见相关文献介绍
养科研细胞是生物医学研究的基本功。有三个小经验可以和大家分享一下:1)不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子,觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑?知道为什么吗?烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸氢跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候,炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后,空气变冷,压力骤降,培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳,释放出来。培养基中的碳酸少了,当然会变碱。如果不烧瓶口的话,你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。(当然多多少少还是会有一点越用越碱,因为室温还是比冰箱内的温度高),其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下,你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话,这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌,除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来美国以后发现这里更彻底,超净台内根本就不点酒精灯;2)不要频繁看细胞。对于初学者而言,养细胞就像养孩子一样,有空就要去看看。细胞越是养不好,就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处,特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后,密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围,形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞,培养瓶这么一晃,把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞,细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管,细胞疯长;3)不要怕消化。在传代的时候,初学者往往生怕细胞消化过度,早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯,吹得满瓶子都是气泡。在我看来,用力吹打对细胞的损伤比消化更大。我师兄在做血管平滑肌原代的时候,37度消化过夜,细胞也没事。我一般是等细胞完全变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有,动作要轻柔,尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大,对细胞的伤害也是很大的。
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细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
FRhK-4[FRhK4]细胞系(恒河猴胚肾细胞冷藏平台)
Hp2/o细胞系(人跟瘤细胞冷藏平台)
HIMEC细胞系(人肠微血管内皮细胞冷藏平台)
1,3-DiaMino-2-propanol
Quinoline-N-oxide hydrate
4,5-Difluoro-1,2-phenylenediaMine
p-Xylylenebis(N,N-diethyldithiocarbaMate)
Urethane, 97%
LX-1细胞系(人肝星形细胞冷藏平台)
CEC细胞系(大鼠脉络膜血管内皮细胞冷藏平台)
NCI-H1793细胞系(人肺癌腺癌细胞冷藏平台)
Ketr-3细胞系(人肾癌细胞冷藏平台)
JF-305细胞系(人癌细胞冷藏平台)
LAN-6细胞系(人神经母细胞冷藏平台)
MHCC97-L(MHCC97L)细胞系(人低转移肝癌细胞冷藏平台)
m-Tolylhydrazine hydrochloride
pent-4-ynoic acid
2-Bromophenethylalcohol
D(+)-Glyceraldehyde
2-Nitrobenzenesulfonyl chloride
LC-2/ad细胞系(人肺癌腺癌细胞冷藏平台)
KYSE-150细胞系(人食管鳞癌细胞冷藏平台)
LLC-PK1细胞系(猪肾细胞冷藏平台)
A101D细胞系(人黑色素瘤细胞冷藏平台)
RAW264.7细胞系(小鼠单核巨噬细胞冷藏平台)
SW579[SW579,SW-579]细胞系(人甲状腺鳞癌细胞冷藏平台)
HT 1197细胞系(人膀胱癌细胞冷藏平台)
OVTOKO细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台)
Sf-21细胞系(昆虫细胞冷藏平台)
SK-MEL-31细胞系(人皮肤恶性黑色素瘤细胞冷藏平台)
T47D细胞系(人乳腺导管癌细胞冷藏平台)
Diisobutyl Phosphite
Chlorodiphenylsilane, 90+%
L-Alanine, 99%
Terbutaline heMisulfate salt
4-Chloro-7-Methoxyquinoline
T1-73细胞系(人骨肉瘤细胞冷藏平台)
HEK293A细胞系(人胚肾细胞冷藏平台)
hESC细胞系(人子宫内膜间质细胞冷藏平台)
4T1细胞系(小鼠乳腺癌细胞冷藏平台)
U-138 MG细胞系(人脑星形胶质母细胞冷藏平台)
EC9706细胞系(人食管癌细胞冷藏平台)
4-BroMo-1h-indole-2-boronic acid pinacol ester
6-Nitroindole, 96%
4-Acetyl-4-phenylpiperidine hydrochloride, 99%
3,5-Difluorobenzyl BroMide
Pentaerythrityl Tetrachloride
JAR细胞系(人胎盘绒毛癌细胞冷藏平台)
SU-DHL-4细胞系(人B淋巴瘤细胞冷藏平台)
G422细胞系(小鼠脑神经胶质母细胞冷藏平台)
HePa1-6细胞系(小鼠肝癌细胞冷藏平台)
muller细胞系(大鼠视网膜神经胶质细胞冷藏平台)
HAmEpiC细胞系(人羊膜上皮细胞冷藏平台)
CAL-85-1细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
NCM460细胞系(人正常结肠上皮细胞冷藏平台)
TE12细胞系(人食道癌肿瘤细胞冷藏平台)
Hs746T细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
Mono-Mac-6细胞系(人急性单核细胞冷藏平台)
3T3-Swiss albino细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台)
RH-30细胞系(人横纹肌肉瘤细胞冷藏平台)
3T3TK细胞系(小鼠成纤维细胞冷藏平台)
MEL细胞系(小鼠红白血病细胞冷藏平台)
RF952细胞系(人子宫内膜癌细胞冷藏平台)
NCI-H3122细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
3-Amino-4-(methylthio)benzotrifluoride
1-Bromo-4-(trans-4-propylcyclohexyl)benzene
Silicon dioxide
GR-a ELISA Kit
NIH3T3细胞系(小鼠胚胎细胞冷藏平台)
SU-DHL6细胞系(人B淋巴瘤细胞冷藏平台)
SH-77细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
SW1116[SW 1116,SW-1116]细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台)
CAL-85-1细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
3-BroMo-5-chlorotoluene
Ethylenediaminetetraacetic Acid Disodium Magnesium Salt Hydrate
L-Methioninol, 99+%
2-Hydroxy-6-aminopurine, 98%
Manganese pentacarbonyl bromide, min. 98%
SK-LMS-1细胞系(人阴户平滑肌肉瘤细胞冷藏平台)
BIN-S1细胞系(牛皮肤细胞冷藏平台)
CHL/IU[CHL-11]细胞系(ZG仓鼠肺细胞冷藏平台)
MES-SA细胞系(人子宫肉瘤细胞冷藏平台)
NCI-H2141细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
CMT93细胞系(小鼠结肠癌细胞冷藏平台)
NCI-H2126[H2126]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
Mouse TAF2 (TATA Box Binding Protein Associated Factor 2) ELISA Kit
APOA1 ELISA Kit
Human PANK3 ELISA Kit
IL-1β ELISA Kit
Rat alpha-L-fucosidase,AFU ELISA Kit
Chicken Nuclear factor-kappa B,NF-κB ELISA Kit
Human monocyte chemotactic protein 4,MCP-4 ELISA Kit
Human Hemoglobin H,HbH ELISA Kit
NCI-H650细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
THC-8307细胞系(人高分化结肠腺癌细胞冷藏平台)
3T3swiss细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台)
T-47D细胞系(人乳腺管癌细胞冷藏平台)
EOMA细胞系(小鼠血管内皮瘤细胞冷藏平台)
EBC-1细胞系(人肺癌鳞癌细胞冷藏平台)
NCI-H661[H661]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
HO8910PM细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台)
TE-4细胞系(人食管癌细胞冷藏平台)
MDCK[NBL-2]细胞系(犬肾细胞冷藏平台)
2-Acetyl-5-norbornene,tech. mixture of endo and exo
2,1,3-Benzoxadiazol-4-amine
Chloramben
VLDL ELISA Kit
U87细胞系(人神经胶质瘤细胞冷藏平台)
hFOB1.19细胞系(人成骨细胞冷藏平台)
COR-L23细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
ECC-1细胞系(人子宫内膜癌细胞冷藏平台)
Hut-78细胞系(人T淋巴细胞冷藏平台)
2,5-Difluorobenzeneboronic acid 98%
1-Pyrrolidin-2-(N-Cbz-N-methyl)amino-2-(3'-indole)ethane
2,3-Diethylpyrazine ,98%
(1S,2S)-2-(Anthracene-2,3-dicarboximido)cyclohexanecarboxylic Acid
1-(2,3-Dichlorophenyl)- hydrochloride
NCI-H596[H596]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
NCI-H2009[H2009]细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台)
MC-3T3-E1细胞系(小鼠胚胎成骨细胞冷藏平台)
THC8307细胞系(人高分化结肠腺癌细胞冷藏平台)
WiDr细胞系(人大肠癌细胞冷藏平台)
MKN45细胞系(人低分化胃癌细胞冷藏平台)
MEG-01细胞系(人成巨核白血病细胞冷藏平台)
NOS ELISA Kit
Human β-subunits of hemoglobin,HB-β ELISA Kit
Human PLXNA4 ELISA Kit
ACP1 ELISA Kit
MCP-1 ELISA Kit
αLα ELISA Kit
Human secretory immunoglobulin A,SIgA ELISA Kit
Human PXR (Pregnane X Receptor) ELISA Kit
GA-10(Clone4)细胞系(人B淋巴细胞冷藏平台)
MC3T3-E1细胞系(小鼠胚胎成骨前体细胞冷藏平台)
H929细胞系(人瘤细胞冷藏平台)
Sf-21细胞系(昆虫细胞冷藏平台)
MG-63细胞系(人成骨肉瘤细胞冷藏平台)
Caki-2细胞系(人肾透明细胞冷藏平台)
LA-4细胞系(小鼠肺癌细胞冷藏平台)
1-(2-Methoxyphenyl) hydrochloride
4-Nitrophenyl-beta-D-glucuronide
3',4'-Dihydroxyacetophenone
5-AMino-8-broMoquinoline
Silver chloride, 99.9999%, (trace Metal basis)
BEL-7402细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
HL-7702(L-02)细胞系(人正常肝细胞冷藏平台)
Caki-2细胞系(人肾透明细胞冷藏平台)
DU-145细胞系(人前列腺癌细胞冷藏平台)
ZR75-1细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
RWPE2细胞系(人前列腺上皮细胞冷藏平台)
LAN-1细胞系(人神经母细胞冷藏平台)
3-Fluoro-4-methylpyridine
4-bromoisoquinolin-1(2H)-one
3-chloropropyl chloroformate
pyrrole
3-AMINO-4-METHYLBENZOTRIFLUORIDE
22RV1细胞系(人前列腺癌细胞冷藏平台)
HCMEC细胞系(人心脏微血管内皮细胞冷藏平台)
HCC 94细胞系(人子宫鳞癌细胞冷藏平台)
NCI-H1703细胞系(人肺鳞癌细胞冷藏平台)
HEL299细胞系(人白血病细胞冷藏平台)
WB-F344细胞系(大鼠肝上皮样细胞冷藏平台)
VA-ES-BJ细胞系(人上皮样肉瘤细胞冷藏平台)
M059J细胞系(人神经胶质瘤细胞冷藏平台)
MG-63细胞系(人成骨肉瘤细胞冷藏平台)
KARPAS299细胞系(人淋巴瘤细胞冷藏平台)
AtT20细胞系(小鼠垂体瘤细胞冷藏平台)
(R)-(-)-Epichlorohydrin
4,6-DibenzyloxypyriMidine, 95%
2-BroMo-6-fluoroaniline, 98+%
Triacontane
4-(Methylthio)aniline
SSP-25细胞系(人肝胆管癌细胞冷藏平台)
HMCB细胞系(人黑色素瘤细胞冷藏平台)
Ramos细胞系(人B淋巴瘤细胞冷藏平台)
NCI-H2444细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
AMC-HN-8细胞系(人喉癌细胞冷藏平台)
LSECs细胞系(大鼠肝窦内皮细胞冷藏平台)
2-(4-(4,4,5,5-TetraMethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)-1h-pyrazol-1-yl)acetaMide
Isobutyric anhydride, 97%
Tetrabutyl orthosilicate, 95%
2-Chloro-5-nitrobenzonitrile
SRBR3细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
MDBK(NBL-1)细胞系(牛肾细胞冷藏平台)
HCC2218细胞系(人乳腺导管癌细胞冷藏平台)
HCC-LY10细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
TE-9细胞系(人食管癌细胞冷藏平台)
RCM-1细胞系(人直肠腺癌细胞冷藏平台)
NCI-H1755[H1755]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
NRK-52E细胞系(大鼠肾细胞冷藏平台)
A427细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
HRGEC细胞系(人肾小球内皮细胞冷藏平台)
FLS细胞系(大鼠成纤维样滑膜细胞冷藏平台)
CEM-3G-2细胞系(人T淋巴细胞冷藏平台)
hTERT RPE-1细胞系(人视网膜色素上皮细胞冷藏平台)
RPMI-8226[RPMI8826]细胞系(人多发性瘤细胞冷藏平台)
NS2OY细胞系(小鼠神经母细胞冷藏平台)
U-2 OS细胞系(人骨肉瘤细胞冷藏平台)
LC-2/ad细胞系(人肺癌腺癌细胞冷藏平台)
5-methyl-2-pyrrolidinone
Fmoc-Orn(Fmoc)-OH
1-Boc-2-Methyl
ADCY4 ELISA Kit
GRC-1细胞系(人肾癌细胞冷藏平台)
CMT-93细胞系(小鼠直肠多倍体癌细胞冷藏平台)
SK-NEP-1细胞系(人肾母细胞冷藏平台)
SNU-1细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
SW480[SW-480]细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台)
5-BroMofuroic acid
2-amino-6-methylphenol(SALTDATA: HCl)
1-(3-ethoxyphenyl)ethanone(SALTDATA: FREE)
Dimethyl (2-oxohept-1-yl)phosphonate 98%
Choline Dihydrogen Citrate
HaCaT细胞系(人永生化表皮细胞冷藏平台)
AR42J细胞系(大鼠外分泌腺肿瘤细胞冷藏平台)
DMS153细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
TE3细胞系(小鼠B淋巴细胞冷藏平台)
VP303细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
COLO-320细胞系(人结肠腺癌细胞冷藏平台)
T47D[T-47D]细胞系(人乳腺导管癌细胞冷藏平台)
Mouse 17-Hydroxycorticosteroids,17-OHCS ELISA Kit
Human NIACR1 ELISA Kit
Human PDIA2 ELISA Kit
Monkey ADP/Acrp30 (Adiponectin) ELISA Kit
Rat 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3 ELISA Kit
PTF1α ELISA Kit
Human NPC ELISA Kit
Human ATA ELISA Kit
NCI-H727细胞系(人肺支气管良性肿瘤细胞冷藏平台)
NCI-H2135细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
HCC-1395细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
KGN细胞系(人卵巢颗粒细胞冷藏平台)