mouseN6细胞：细胞系 复苏培养细胞平台

mouseN6细胞：细胞系 复苏培养细胞平台
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
细胞冻存的步骤：1)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天Z好换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min，10分钟)；2)去上清液，加入含20%小牛血清的完全培养基，于4℃预冷15分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为5×106～1×107/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；3)将分装上述细胞悬液于2ml冻存管中，每管0.25ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；4)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中，-80℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜，放入液氮罐)Z好;或者可以在4℃，2h;然后转到-20℃，2h;-80℃，2h;放入液氮罐；5)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，Z好取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
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细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞形态特性：详见细胞说明书
养了几年细胞，说一点自己培养细胞方面的看法：1)培养细胞前，可以看看细胞特点说明书，包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等；2)不同细胞生长周期不同，有的生长很快，比如说MDA-MB-231，传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了，有的又是特别慢，等的人心焦，BT474就是，传代是一分二，复苏起始的时候两周多才能长满，所以就要在培养细胞的过程中多多摸索了；3)对于娇弱的细胞，就得细心呵护了，胰酶消化不能过久，吹得时候要轻柔，离心时候也要注意转速和时间，每天都要去看一下细胞，肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况；4)冻存细胞复苏后第二天Z好更换一次培养基；5)培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次；6)养细胞的教训：不能偷懒!细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。1)不管买的细胞、惠赠的细胞，刚拿到手赶紧做两件事：检测是否有支原体污染; 迅速扩增冻存；2)发现有污染迅速处理掉，特别是当你养了很多种细胞时; 细菌污染，真菌污染很容易发现，支原体污染的话，细胞会长的慢，买个支原体检测的kit定期检测一下；3)传代细胞日常的值日清洁是必须的，此外还要定期熏蒸；4)细胞的传代一定要规律，保持相同的confluency和传代时间间隔，不要随心所欲或者拖延；5)注意个人卫生。
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
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细胞背景资料：详见相关文献介绍
养科研细胞是生物医学研究的基本功。有三个小经验可以和大家分享一下：1)不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子，觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑？知道为什么吗？烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸氢跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候，炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后，空气变冷，压力骤降，培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳，释放出来。培养基中的碳酸少了，当然会变碱。如果不烧瓶口的话，你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。(当然多多少少还是会有一点越用越碱，因为室温还是比冰箱内的温度高)，其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下，你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话，这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌，除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来美国以后发现这里更彻底，超净台内根本就不点酒精灯；2)不要频繁看细胞。对于初学者而言，养细胞就像养孩子一样，有空就要去看看。细胞越是养不好，就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处，特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后，密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围，形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞，培养瓶这么一晃，把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞，细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管，细胞疯长；3)不要怕消化。在传代的时候，初学者往往生怕细胞消化过度，早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯，吹得满瓶子都是气泡。在我看来，用力吹打对细胞的损伤比消化更大。我师兄在做血管平滑肌原代的时候，37度消化过夜，细胞也没事。我一般是等细胞完全变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有，动作要轻柔，尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大，对细胞的伤害也是很大的。
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细胞传代方法：1：2传代

OVHM细胞系(小鼠卵巢癌细胞冷藏平台）
VP229细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台）
HCT-15细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台）
OROTIC ACID MONOHYDRATE
Perfluorooctyl broMide
5-AMino-6-chloro-2,3-dicyanopyrazine
3-(4-BroMophenyl)-5-(4-fluorophenyl)-1,2,4-oxadiazole
SodiuM bisulfate Monohydrate, 97%, extra pure, reagent, crystals
MC3T3-E1 Subclone 14细胞系(小鼠颅顶前骨细胞冷藏平台）
HFLS-RA细胞系(人关节炎成纤维样滑膜细胞冷藏平台）
HS 683细胞系(人脑胶质瘤细胞冷藏平台）
TE-9细胞系(人食管癌细胞冷藏平台）
TE-4细胞系(人食管癌细胞冷藏平台）
TGW细胞系(人神经母细胞冷藏平台）
MIN-6细胞系(小鼠胰岛素瘤细胞冷藏平台）
2-Amino-4-(trifluoromethyl)benzoic acid
4-Methylpiperidin-4-ol
2,4-Dibromoaniline
Benzyl butyrate
RHODIUM (III) SULFATE
H441细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台）
MDA-MB-468细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台）
SW620[SW620,SW-620]细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台）
MUS-M1细胞系(小鼠小肠平滑肌细胞冷藏平台）
MC-38细胞系(小鼠结肠癌细胞冷藏平台）
ECA细胞系(小鼠艾氏腹水瘤细胞冷藏平台）
Ranca细胞系(小鼠肾癌细胞冷藏平台）
L-M(TK-)细胞系(小鼠结缔组织细胞冷藏平台）
NHEK细胞系(人表皮角质形成细胞冷藏平台）
NCI-H146细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
HCC1954细胞系(人乳腺导管癌细胞冷藏平台）
Methyl 2-aMinothiophene-3-carboxylate
3-BroMobenzyl alcohol, 99%
Methyl 2-(3-chloropropanoylaMino)-5,6-dihydro-4H-cyclopenta[b]thiophene-3-carboxylate, 96%
Ethyl tiglate
2,3-DiMethylbenzoic acid
OVTOKO细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台）
WI-38细胞系(人胚肺细胞冷藏平台）
Vero细胞系(非洲绿猴肾细胞冷藏平台）
KMST-6细胞系(人胚成纤维细胞冷藏平台）
BEL7402细胞系(人肝癌细胞冷藏平台）
SW579[SW579,SW-579]细胞系(人甲状腺鳞癌细胞冷藏平台）
2-Methylpyridine-3-boronic acid, pinacol ester
Fullerene C60, 99.9%
3-endo-HydroxyMethylbicyclo[2.2.1]heptyl-2-endo-aMine hydrochloride, 99+%
2,3-DiMethyl-1-propyliMidazoliuM Bis(trifluoroMethanesulfonyl)iMide
2'-Fluoro-4'-hydroxyacetophenone
IM95细胞系(人胃癌细胞冷藏平台）
P388D1细胞系(小鼠淋巴样瘤细胞冷藏平台）
NCI-H1693细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
CHO-K1细胞系(仓鼠卵巢细胞冷藏平台）
NCI-H661细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
SPC-A1细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台）
SW1222细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台）
BEL7402细胞系(人肝癌细胞冷藏平台）
A253细胞系(人唾液腺肿瘤细胞冷藏平台）
SW 954[SW-954,SW954]细胞系(人阴户鳞癌细胞冷藏平台）
A-204[A204]细胞系(人横纹肌肉瘤细胞冷藏平台）
CCRF-CEM细胞系(人急性淋巴细胞冷藏平台）
MCF10A细胞系(人正常乳腺上皮细胞冷藏平台）
RBMEC细胞系(大鼠脑微血管内皮细胞冷藏平台）
Raw246.7细胞系(小鼠单核巨噬细胞冷藏平台）
TALL-104细胞系(人急性T淋巴细胞冷藏平台）
NCI-H2052细胞系(人恶性胸膜间皮瘤细胞冷藏平台）
1,2,3-Trichlorobenzene
protostemotinine
N,5'-O-Diacetyl-2',3'-O-isopropylideneguanosine
CRY1 ELISA Kit
SNU-719细胞系(人胃癌细胞冷藏平台）
NCI-H211细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
VSMC细胞系(大鼠胸主动脉平滑肌细胞冷藏平台）
MC3T3-E1 Subclone 4细胞系(小鼠原成骨细胞冷藏平台）
MFE-296细胞系(人子宫内膜癌细胞冷藏平台）
4-Methylphthalic acid
Dipotassium 2-Naphthol-6,8-disulfonate Hydrate
trans-2,5-Dichlorocinnamic Acid
3-butynoic acid(SALTDATA: FREE)
Copper(II) naphthenate, 77% in mineral spirits (8% Cu)
PA12细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台）
HUC细胞系(人尿道上皮细胞冷藏平台）
NCI-H522细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
ALVA细胞系(人前列腺癌细胞冷藏平台）
BIN-S1细胞系(牛皮肤细胞冷藏平台）
LN-229细胞系(人大脑神经母瘤细胞冷藏平台）
FDC-P1细胞系(小鼠细胞冷藏平台）
Mouse Leukotriene B4,LT-B4 ELISA Kit
Human CDKN3 ELISA Kit
Human ISG15 (Interferon Stimulated Gene 15) ELISA Kit
FSH ELISA Kit
COL4α1 ELISA Kit
TGFβ1 ELISA Kit
Human C5c ELISA Kit
Human ADCY4 ELISA Kit
DAN-G细胞系(人癌细胞冷藏平台）
HS445细胞系(人霍奇金淋巴瘤细胞冷藏平台）
GIST-48细胞系(人胃肠道间质瘤细胞冷藏平台）
CT-26细胞系(小鼠大肠癌细胞冷藏平台）
Clone9细胞系(大鼠肝脏上皮细胞冷藏平台）
WB-F344细胞系(大鼠肝上皮样细胞冷藏平台）
MGH-u3细胞系(人膀胱癌细胞冷藏平台）
RC-4BC细胞系(人垂体瘤细胞冷藏平台）
IPEC-J2细胞系(猪小肠上皮细胞冷藏平台）
BHK-21细胞系(叙利亚仓鼠肾细胞冷藏平台）
2-Amino-4-imino-2-thiazoline hydrochloride
allyl cyanoacetate
O-tert-butyl-L-threoninetert-butyl ester acetate
TAP ELISA Kit
HLEB3细胞系(人晶状体上皮细胞冷藏平台）
NCI-H1688细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
COS-7细胞系(非洲绿猴SV40转化的肾细胞冷藏平台）
HDMEC细胞系(人微血管内皮细胞冷藏平台）
Ovary细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台）
Ethyl butyrate
Benzophenone imine ,98%
Isophthalamide
2,3-Dibromopropionyl Chloride
2-({1-[3-(Trifluoromethyl)phenyl]prop-2-yl}amino)ethyl benzoate hydrochloride
NCI-H322细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
LNCaP细胞系(人前列腺癌细胞冷藏平台）
GP293细胞系(人胚肾细胞冷藏平台）
NCI-H2122[H2122]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
WM239A细胞系(人黑色素瘤细胞冷藏平台）
Caco-2细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台）
293A细胞系(人胚肾细胞冷藏平台）
IL-23 ELISA Kit
Human Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅰ,TNFsR-ⅠELISA Kit
Human PHC ELISA Kit
Ub ELISA Kit
Rat Cluster of differentiation 30,CD30 ELISA Kit
Aβ1-42 ELISA Kit
Human HNRPK ELISA Kit
Human CLCF1 (Cardiotrophin Like Cytokine Factor 1) ELISA Kit
LA-4细胞系(小鼠肺癌细胞冷藏平台）
Ealy926细胞系(人肠系膜下腔动脉血管内皮细胞冷藏平台）
NIE-115细胞系(小鼠神经母细胞冷藏平台）
Hep B1.2细胞系(人肝癌细胞冷藏平台）
RMD6细胞系(小鼠胚胎细胞冷藏平台）
Raji细胞系(人淋巴瘤细胞冷藏平台）
SNU-1细胞系(人胃癌细胞冷藏平台）
(E)-Ethyl 3-aMino-4,4,4-trifluorocrotonate
4-Methylcyclohexanone
2,5-DibroMothieno[3,2-b]thiophene
Methyl 5-broMothiazole-4-carboxylate
SodiuM nitroferricyanide dihydrate, 99+%
SNU-182细胞系(人肝癌细胞冷藏平台）
HL-60细胞系(人原髓白血病细胞冷藏平台）
MLE 12细胞系(小鼠肺上皮细胞冷藏平台）
NCI-H2196细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
NCI-H2141细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
NCI-H2342细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
RMG-I细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台）
Geranic acid
8-bromoguanosine
5,6-dihydro-2H-pyran-2-one
(Carbethoxymethylene)triphenylphosphorane,free of carbomethoxymethylene-analogue
2-Methoxythiophene
NCI-H1569细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
C4-2细胞系(人前列腺癌细胞冷藏平台）
AtT-20细胞系(小鼠垂体瘤细胞冷藏平台）
DU145[DU145,DU-145]细胞系(人前列腺癌细胞冷藏平台）
JHH-2细胞系(人肝癌细胞冷藏平台）
L Wnt 3A细胞系(小鼠皮下结缔组织细胞冷藏平台）
A-204细胞系(人横纹肌肉瘤细胞冷藏平台）
Jurkat D,E细胞系(人T淋巴瘤细胞冷藏平台）
PMVECs细胞系(大鼠肺微血管内皮细胞冷藏平台）
HEB细胞系(人脑胶质细胞冷藏平台）
ZRLC-1细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台）
5-Methoxy-2-Methylindole, 99+%
4-BroMo-3-Methylanisole, 97%
4-Methoxybenzyl Mercaptan, 98%
2,6-Dinitrophenol
5-Fluoro-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridine
SW 1088[SW-1088]细胞系(人脑星型胶质瘤细胞冷藏平台）
PLC/PRF/5细胞系(人肝癌亚力山大细胞冷藏平台）
NCI-H1341细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
C13K细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台）
PAXC-008细胞系(人源癌细胞冷藏平台）
SF17细胞系(人脑瘤细胞冷藏平台）
D-GlucosaMine OxiMe Hydrochloride
4-AMino-3-nitrobenzenesulfonaMide
EPPS, 99%, for biocheMistry
2-Oxetanone
Butyl ChloroforMate
NCI-H838[H838]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
NK-92MI细胞系(人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞冷藏平台）
SK-MES-1细胞系(人肺鳞癌细胞冷藏平台）
TE-1细胞系(人食管癌细胞冷藏平台）
L-02细胞系(人肝细胞冷藏平台）
AHH-1细胞系(人外周血B淋巴细胞冷藏平台）
KYSE270细胞系(人食管鳞癌细胞冷藏平台）
KYSR450细胞系(人食管癌细胞冷藏平台）
SK-BR-3[SKBR-3,SKBR3]细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台）
NCI-H810细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
Vero E6细胞系(非洲绿猴肾细胞冷藏平台）
HPDE6-C7细胞系(人正常导管上皮细胞冷藏平台）
NCI-H1048[H1048]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
H08910细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台）
HUV-EC细胞系(人脐静脉内皮细胞冷藏平台）
HCC1569细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台）
SZ95细胞系(人皮脂腺细胞冷藏平台）
cerium(4+) disulphate
dimethyl octafluoroadipate
Nafcillin sodium
CX26 ELISA Kit
MUS-M1细胞系(小鼠小肠平滑肌细胞冷藏平台）
NCI-H838细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
Hep-G2细胞系(人肝癌细胞冷藏平台）
NCI-H211[H211]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
NCI-H524[H524]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
7-Bromoisoquinoline
1-Bromoperfluorononane
3-(4-Carboxyphenyl)propionic Acid
N-Formyl-L-methionine
Erdosteine
MHCC97-L(MHCC97L)细胞系(人低转移肝癌细胞冷藏平台）
Karpas-299细胞系(人间变性大细胞冷藏平台）
NCI-H2291细胞系(人肺癌腺癌细胞冷藏平台）
WB-F344细胞系(大鼠肝上皮样细胞冷藏平台）
MOPC细胞系(小鼠少突胶质前体细胞冷藏平台）
KE-37细胞系(人T淋巴瘤细胞冷藏平台）
B16-F10细胞系(小鼠皮肤黑色素瘤细胞冷藏平台）
VB12 ELISA Kit
ASD ELISA Kit
Human CFD ELISA Kit
LZM ELISA Kit
6-OHDA ELISA Kit
FBN1 ELISA Kit
Human mIgD ELISA Kit
Human AR ELISA Kit
NCI-H250[H250]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
NCI-H716细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台）
KYSE270细胞系(人食管鳞癌细胞冷藏平台）
Raji细胞系(人淋巴瘤细胞冷藏平台）