BT-474细胞：人乳腺导管瘤细胞系 低代次传代培养

BT-474细胞：人乳腺导管瘤细胞系 低代次传代培养
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
造成实验室细胞污染常见情况总结：细胞培养中Z常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染，大多数较难处理。那么，哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢？我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】1)为节省时间，有人已经用超净台四个多小时，不开紫外灭菌30min,酒精擦拭后直接开始试验；2)器材或者溶液很久没用，未检测是否污染而直接使用；离心管多次使用，枪头为了方便交叉使用；3)超净台不点酒精灯；点了酒精灯放在右上角，而你在左下角做试验；4)不带手套，徒手操作；5)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋，未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具，如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需121°C高压灭菌20分钟后37％烤干备用)。超净台和桌面，东西太多太乱：超净台不是储物箱，什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台！这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面，切忌东西堆积如山，不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞！一不小心“飘”进你的细胞培养板里，细胞就会养的不好，啥时候死了都不知道！【培养箱太久没清洁】细胞污染了，并非直接扔了培养皿就不管了，首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染，如果有而且好几个板子都有类似的污染块，那很可能是培养箱中的水或者空气污染了，得给培养箱做个大扫除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水没了要记得加，还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂，难管理】在传代细胞这种卫生要求高，人多了，不确定因素多了，难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室，实验服当风衣穿，不扣纽扣，不戴鞋套，就容易造成细胞污染；超净台做实验时，喜欢说话聊着做试验，要是还不带口罩，里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢！
BT-474细胞：人乳腺导管瘤细胞系 低代次传代培养
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞形态特性：详见细胞说明书
【细胞培养中支原体、黑蛟虫、真菌的污染情况总结】支原体：黑色的，好象多为多形，培养液一般培养液一般会浑浊，原体感染，国内血清很多都没有做支原体阴性检测，而支原体是牛血清中Z常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后，细胞病变不很明显，只是慢慢死去。用泰乐菌素，兽用支原体病的药，但可用于细胞培养，无任何不良反应。如果作为常用的抗生素的话, 建议用8ug/ml的浓度；黑蛟虫：可以穿透滤膜，也可以通过空气传播，低倍下为黑色点状，高倍下可看见黑色的小虫游来游去，培养液也是不浑的，一般不会太影响，细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好，且观测到的运动物无明显增多，且培养液颜色、透明度无明显变化，可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响，在细胞增殖旺盛之后会自然消失，除更换血清外无须特殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话，可以增加细胞的种板密度，以提高细胞的生存率；真菌：一般培养液清亮，不变色，镜下有丝状物，有些真菌开始很像死细胞碎片，只是它很多很多的小块很清楚，象珊瑚状，不象细胞碎片分不清，慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢，不象细菌那么容易被发现，但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了，也很难救活了。
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
BT-474细胞：人乳腺导管瘤细胞系 低代次传代培养
细胞背景资料：详见相关文献介绍
传代细胞培养注意事项：1)掌握好细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；2)掌握好消化浓度，当消化液浓度过高时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。体内细胞培养及其操作步骤：瘤细胞悬液接种1)无菌选取生长良好(有光泽，淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞；2)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨，经80～100目筛网过滤成细胞悬液；3)培养细胞应用PBS洗两遍；4)计数并调整细胞浓度至10(7)～10(8)/ml；5)常规消毒后，于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(0.1ml/部位，＞10(6)细胞)。初次接种成功率低，细胞数尽可能多一些；6)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期，以后随着传代潜伏期逐渐缩短，固定为一个相对稳定的时间。腹水瘤的建立与腹水瘤的接种：将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤细胞，将这种腹水反复传代，即可成为腹水瘤。初次传代时，腹水常呈血性(含大量红细胞)，反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下：1)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤，进行细胞计数；2)消毒动物，左下腹穿刺接种1×10(6)腹水瘤细胞；3)接种腹水瘤细胞后约7-12d，待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用9号针头抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽3-5ml；4)抽取的腹水经3000rpm离心15min，收集上清，分装冻存备用。
BT-474细胞：人乳腺导管瘤细胞系 低代次传代培养
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。

NCI-H1963[H1963]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
Daoy细胞系(人髓母细胞冷藏平台）
HS-578T细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台）
5-Cyanopyridine-3-boronic acid
4,4'-BisMaleiMidodiphenylMethane
3-Hydroxy-3-Methyl-2-butanone OxiMe
4-Ethoxy-2-fluoro-1-nitrobenzene
(R)-(-)-Mandelic acid, 99%
VCaP细胞系(人前列腺癌细胞冷藏平台）
SK-N-AS细胞系(人神经母细胞冷藏平台）
SMMC-7721细胞系(人肝癌细胞冷藏平台）
CBRH 7919细胞系(大鼠肝癌细胞冷藏平台）
CBRH 7919细胞系(大鼠肝癌细胞冷藏平台）
GOS-3细胞系(人胶质瘤细胞冷藏平台）
VEROC1008(E6)细胞系(非洲绿猴肾细胞冷藏平台）
2-methoxy-2-phenylethanol
Bismuth subsalicylate
L-2,3-Diaminopropionic acid
2-Picoline
3-Acetyl-2,5-dichlorothiophene
FDC-P1细胞系(小鼠细胞冷藏平台）
JK(Jurkat)细胞系(人淋巴细胞冷藏平台）
Human podocyte细胞系(人肾足细胞冷藏平台）
SK-N-MC细胞系(人神经上皮瘤细胞冷藏平台）
MS1细胞系(小鼠胰岛内皮细胞冷藏平台）
SNU-C2B细胞系(人结直肠癌细胞冷藏平台）
293A细胞系(人胚肾细胞冷藏平台）
SW403[SW-403]细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台）
NCI-H920细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
HPMC细胞系(人腹膜间皮细胞冷藏平台）
DU145[DU145,DU-145]细胞系(人前列腺癌细胞冷藏平台）
2-Methoxy-5-nitropyridine
2-AMinobenzaMidoxiMe, 97%
2,3-DiMethylpentane, 97%
N,N'-Diphenylurea
3-BroMo-4-Methylbenzonitrile
COR-L23细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
H-4-Ⅱ-E细胞系(大鼠肝癌细胞冷藏平台）
CEM-3G-2细胞系(人T淋巴细胞冷藏平台）
HL-7702细胞系(人肝细胞冷藏平台）
Daudi细胞系(人Burkitt淋巴瘤细胞冷藏平台）
SNU-601细胞系(人胃癌细胞冷藏平台）
2-Fluoro-4-iodotoluene
2-AMino-5-fluoropyriMidine
4-Fluorobenzoic hydrazide, 96%
FMOC-L-BETA-HOMOSERINE(OTBU)
1H-Pyrrolo[2,3-b]pyridine
BEL7405细胞系(人肝癌细胞冷藏平台）
E.G7-OVA细胞系(小鼠T淋巴瘤细胞冷藏平台）
A-172[A172]细胞系(人脑胶质瘤细胞冷藏平台）
EVSA-T细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台）
SK-LU-1细胞系(人低分化肺腺癌细胞冷藏平台）
LS174T[LS174T]细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台）
NCI-H1048[H1048]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
BC3H1细胞系(小鼠脑瘤细胞冷藏平台）
SPC-A-1细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台）
NCI-H2286细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
IHH-4细胞系(人甲状腺癌细胞冷藏平台）
GES-1细胞系(人胃粘膜细胞冷藏平台）
CEM-SS-2细胞系(人T淋巴细胞冷藏平台）
SUP-B1细胞系(人Ph+急淋白血病细胞冷藏平台）
FC33细胞系(人胚肾细胞冷藏平台）
C-33A细胞系(人宫颈癌细胞冷藏平台）
NCI-H2405细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
H-D-Asp(OBzl)-OH
3-Methyl-1-phenyl-2-butanone
2-n-Octylthiophene
NUP160 ELISA Kit
SW 1271[SW-1271,SW1271]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
GES细胞系(人肾上皮细胞冷藏平台）
EC-304细胞系(人血管内皮细胞冷藏平台）
HEEC细胞系(人正常食管上皮细胞冷藏平台）
Pt K1细胞系(袋鼠肾细胞冷藏平台）
3-(Trifluoromethoxy)aniline, 97%
5-Bromouridine ,98%
3-(Trimethylsilylethynyl)thiophene ,98%
2-Chloro-6-(trifluoromethyl)nicotinonitrile 98%
1H-INDAZOL-3-YLAMINE
H522细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台）
NCI-H2195[H2195]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
NCI-H292细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
LP-1细胞系(人多发性瘤白细胞冷藏平台）
KNS-81细胞系(人脑神经胶质瘤细胞冷藏平台）
HARA-B细胞系(人肺癌鳞癌细胞冷藏平台）
MDBK细胞系(牛肾细胞冷藏平台）
SNRPC ELISA Kit
aGT ELISA Kit
Human high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA Kit
CCRL1 ELISA Kit
Rat PDI (Protein Disulfide Isomerase) ELISA Kit
CST3 ELISA Kit
Human CLSTN3 ELISA Kit
Human OBSCN ELISA Kit
MC38细胞系(小鼠结肠癌细胞冷藏平台）
GES细胞系(人肾上皮细胞冷藏平台）
SNU-423细胞系(人肝癌细胞冷藏平台）
Mv.1.Lu(NBL-7)细胞系(水貂肺上皮细胞冷藏平台）
NCI-H1693细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
C-33 A细胞系(人子宫颈癌细胞冷藏平台）
MADB106细胞系(大鼠乳腺癌细胞冷藏平台）
NCI-H1930细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
PC-61细胞系(小鼠杂交瘤细胞冷藏平台）
NE-4C细胞系(小鼠神经干细胞冷藏平台）
3,3'-[5'-[3-(3-Pyridinyl)phenyl][1,1':3',1''-terphenyl]-3,3''-diyl]bispyridine
L-7-Hydroxy-1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline-3-carboxylic acid
1,4-Dimethoxy-2-fluorobenzene
MHB ELISA Kit
L-02细胞系(人肝细胞冷藏平台）
Dami细胞系(人巨核细胞冷藏平台）
HCPEpiC细胞系(人脉络丛上皮细胞冷藏平台）
NK-92MI[NK92MI]细胞系(人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞冷藏平台）
U-2OS[U2OS,U2-OS,U-2OS]细胞系(人骨肉瘤细胞冷藏平台）
3-Pyrimidin-2-ylphenyl isocyanate
2-(Piperazin-1-yl)pyridin-3-amine ,97%
5-Amino-2-methyl-2H-indazole
Allyltriisopropylsilane
1-Boc-5-hydroxyindole
NCI-H2330[H2330]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
HEK-2细胞系(人胚肾二倍体细胞冷藏平台）
HO8910细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台）
MHCC97细胞系(人肝癌细胞冷藏平台）
MASMC细胞系(小鼠气道平滑肌细胞冷藏平台）
gpc-1细胞系(人前列腺癌细胞冷藏平台）
NCI-H69[H69]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
VA ELISA Kit
Human AED ELISA Kit
CFD ELISA Kit
PT ELISA Kit
D1R ELISA Kit
FGF-10 ELISA Kit
Human EFNB3 ELISA Kit
Human FLOT2 ELISA Kit
COLO320DM[COLO320DM]细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台）
RAW264.7细胞系(小鼠单核巨噬细胞冷藏平台）
NCI-H211细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
FBM细胞系(人胎儿间充质细胞冷藏平台）
GIST-T1细胞系(人胃肠道间质瘤细胞冷藏平台）
Farage细胞系(人B淋巴瘤细胞冷藏平台）
CHL-1细胞系(ZG仓鼠肺细胞冷藏平台）
2-Fluorobenzenesulfonyl chloride
Methyl 2,4-difluorobenzoate
4,4'-DiMethyl-trans-stilbene
1,3-DiMethyl-1h-pyrazole-4-carbaldehyde
Saccharin, 98+%
THP1细胞系(人急性单核细胞冷藏平台）
MCF 7B细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台）
SHZ-88细胞系(大鼠乳腺癌细胞冷藏平台）
SW 626细胞系(人卵巢腺癌细胞冷藏平台）
HuTu 80细胞系(人十二指肠腺癌细胞冷藏平台）
Capan-2细胞系(人癌细胞冷藏平台）
HPF细胞系(人肺成纤维细胞冷藏平台）
D-ornithine
Nitroethylene
N-acetyl-dl-proline
3-(Trifluoromethyl)anisole
2-Methoxy-5-pyridineboronic acid
NK­92细胞系(人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞冷藏平台）
H-97细胞系(人高转移肝癌细胞冷藏平台）
EBC-1细胞系(人肺癌鳞癌细胞冷藏平台）
HS-746T细胞系(人胃癌细胞冷藏平台）
GA-10细胞系(人B淋巴瘤细胞冷藏平台）
RPMI-7951细胞系(人黑色素瘤细胞冷藏平台）
MG-63细胞系(人成骨肉瘤细胞冷藏平台）
JVM-3细胞系(人慢性髓细胞冷藏平台）
HEK293A细胞系(人胚肾细胞冷藏平台）
NCI-H1417细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
NCI-H446细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
1-Dodecanesulfonyl chloride, 98+%
1-Fluoro-2-(trifluoroMethylsulfonyl)benzene, 95%
2,5-DiMethoxytetrahydrofuran, cis + trans, 98%
2-Ethylhexyl acrylate
N-Boc-4-piperidineacetaldehyde
MHCC97-L细胞系(人低转移性肝癌细胞冷藏平台）
SW948细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台）
SK-OV-3[SKOV-3,SKOV3]细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台）
D407细胞系(人视网膜色素上皮细胞冷藏平台）
Hela 299细胞系(人宫颈癌细胞冷藏平台）
L-M(TK-)细胞系(小鼠结缔组织细胞冷藏平台）
N-Methyl-4-nitro-o-toluidine
Methyl 2-iodonicotinate
7-BroMo-5-Methyl-1-benzofuran, 95%
N-Acetyl-cysteine
4,4'-DibroMo-trans-stilbene
NCI-H740[H740]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
Tca-8113细胞系(人舌鳞癌细胞冷藏平台）
NCI-H2286[H2286]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
Wien 133细胞系(人非何杰金氏淋巴瘤细胞冷藏平台）
NCI-H295细胞系(人肾上腺皮质癌细胞冷藏平台）
SW626[SW626,SW-626]细胞系(人卵巢腺癌细胞冷藏平台）
NCI-H1944细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
Mino细胞系(人淋巴瘤细胞冷藏平台）
NCI-H358[H-358,H358]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
Granta519细胞系(人淋巴瘤细胞冷藏平台）
CL-40细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台）
FM88细胞系(人黑色素瘤细胞冷藏平台）
Hut78细胞系(人皮肤T淋巴瘤细胞冷藏平台）
Ramos(RA 1)细胞系(人B淋巴细胞冷藏平台）
NP69细胞系(人鼻咽上皮细胞冷藏平台）
Y3-Ag1.2.3细胞系(大鼠瘤细胞冷藏平台）
MuM-2C细胞系(人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞冷藏平台）
1,2,3,4-Tetrahydro-9-methylcarbazol-4-one
Bromine Pentafluoride
Ethyl carbazate
Anti-RRNP ELISA Kit
Hs695T细胞系(人恶性黑色素瘤细胞冷藏平台）
HTR8-S/Vneo细胞系(人绒毛膜滋养层细胞冷藏平台）
KYSE-150细胞系(人食管鳞癌细胞冷藏平台）
NCI-H2286[H2286]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
NCI-H676B细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台）
Sodium Hydroxymethanesulfonate
N-Boc-Prop-2-ynylamine
5-Chloro-2-hydroxybenzeneboronic acid 97%
3,3',5,5'-Tetrakis(trifluoromethyl)benzhydrol
1-Bromo-4-cyclohexylbenzene
hEM1细胞系(人子宫异位内膜上皮细胞冷藏平台）
hFOB 1.19细胞系(人SV40转染成骨细胞冷藏平台）
NCI-H1781[H1781]细胞系(人细支气管肺泡癌细胞冷藏平台）
Vero E6细胞系(非洲绿猴肾细胞冷藏平台）
SW948[SW-948]细胞系(人结肠腺癌细胞冷藏平台）
DAN-G细胞系(人癌细胞冷藏平台）
Karpas-299细胞系(人间变性大细胞冷藏平台）
Cys-C ELISA Kit
TGF-β1 ELISA Kit
Human HDL ELISA Kit
UBC ELISA Kit
Rat Beta-Endorphin,β-EP ELISA Kit
uPA ELISA Kit
PROS ELISA Kit
Human PA-IgM ELISA Kit
Nalm-6细胞系(人前B急性淋巴细胞冷藏平台）
SW1116细胞系(人结肠腺癌细胞冷藏平台）
NCI-H1238[H1238]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
KM12细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台）