NL20细胞:人支气管上皮细胞系 低代次传代培养
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
造成实验室细胞污染常见情况总结:细胞培养中Z常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染,大多数较难处理。那么,哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢?我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】1)为节省时间,有人已经用超净台四个多小时,不开紫外灭菌30min,酒精擦拭后直接开始试验;2)器材或者溶液很久没用,未检测是否污染而直接使用;离心管多次使用,枪头为了方便交叉使用;3)超净台不点酒精灯;点了酒精灯放在右上角,而你在左下角做试验;4)不带手套,徒手操作;5)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋,未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具,如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需121°C高压灭菌20分钟后37%烤干备用)。超净台和桌面,东西太多太乱:超净台不是储物箱,什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台!这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面,切忌东西堆积如山,不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞!一不小心“飘”进你的细胞培养板里,细胞就会养的不好,啥时候死了都不知道!【培养箱太久没清洁】细胞污染了,并非直接扔了培养皿就不管了,首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染,如果有而且好几个板子都有类似的污染块,那很可能是培养箱中的水或者空气污染了,得给培养箱做个大扫除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水没了要记得加,还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂,难管理】在传代细胞这种卫生要求高,人多了,不确定因素多了,难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室,实验服当风衣穿,不扣纽扣,不戴鞋套,就容易造成细胞污染;超净台做实验时,喜欢说话聊着做试验,要是还不带口罩,里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢!
NL20细胞:人支气管上皮细胞系 低代次传代培养
细胞生长特性:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞形态特性:详见细胞说明书
体内细胞培养及其操作步骤:【瘤细胞悬液接种】1)无菌选取生长良好(有光泽,淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞;2)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨,经80~100目筛网过滤成细胞悬液;3)培养细胞应用PBS洗两遍;4)计数并调整细胞浓度至107~108/ml;5)常规消毒后,于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(0.1ml/部位,>106细胞)。初次接种成功率低,细胞数尽可能多一些;6)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期,以后随着传代潜伏期逐渐缩短,固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤细胞,将这种腹水反复传代,即可成为腹水瘤。初次传代时,腹水常呈血性(含大量红细胞),反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。1)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤,进行细胞计数;2)消毒动物,左下腹穿刺接种106腹水瘤细胞;3)接种腹水瘤细胞后约7~12d,待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9号针头抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水经3000rpm离心15min,收集上清,分装冻存备用。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
NL20细胞:人支气管上皮细胞系 低代次传代培养
细胞背景资料:支气管上皮细胞;SV40转化;女性
动物细胞实验室必备仪器进行简单介绍:1)CO2培养箱:CO2培养箱是细胞培养的必备仪器,它为细胞提供了一个体外培养的舒适环境,如适宜的温度、湿度、酸碱度、O2浓度等。细胞在体外培养时很容易受到各种细菌、微生物的感染,因此,CO2培养箱的灭菌和YJ能力就显得尤为重要;2)烘箱(干燥箱):用于细胞培养的一些器械、器皿必须烘干后才能使用,玻璃器皿等须干热消毒。干热消毒时,烘箱内温度一般要达到160℃以上,通常使用鼓风式烘箱。其优点是温度均匀、效果较好,缺点是升温过程较慢。升温时不能先升温后鼓风而应鼓风与升温同时开始,至100℃时,停止鼓风。需注意避免包裹器皿的纸或棉花烧焦,烧焦的碎屑可影响细胞的生长。消毒后不能立即打开箱门,以免骤冷导致玻璃器皿破裂,应等温度自然下降至100℃以下后可开门。3)超净工作台/生物安全柜:细胞培养对无菌环境要求很高,在细胞操作时,一般需要在100级空气质量条件下进行,因此超净工作台或生物安全柜就必须配备。4)液氮罐:为了保存细胞,特别是不易获得的突变型细胞或细胞株,要将细胞冻存。冻存的温度一般为液氮温度-196℃,因此,需要液氮罐。在此环境中,一般细胞可以保存十年具有活性。5)超低温冰箱:细胞的冻存过程需要一系列程序降温,一般4℃下存放30min,转放-20℃ 1 hour,再转入-70至-80℃过夜,之后才可以转移到液氮内(-196℃),这时就必须配备一台-86℃超低温冰箱。一般超低温冰箱保存细胞可达数月,对于不需要长期冻存的细胞,可暂时放于超低温冰箱保存。6)恒温水浴:从液氮或超低温冰箱中取出细胞冻存管需要立即放于37℃水浴中快速复苏之后才传代培养,因此,恒温水浴也是细胞实验室必备仪器。7离心机:细胞培养需要离心收集传代细胞,所以需要配置低速的常温离心机,对于后期细胞内容物的分离则需要高速冷冻离心机。除上述仪器外,移液器、高压灭菌锅、倒置显微镜、荧光显微镜也是细胞培养的必备仪器,发酵罐、转瓶机等也常常见于细胞培养实验室。
NL20细胞:人支气管上皮细胞系 低代次传代培养
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
JEG3细胞系(人绒毛膜癌细胞冷藏平台)
Jurkat CA细胞系(人急性T淋巴细胞冷藏平台)
HBL-100细胞系(人乳腺上皮细胞冷藏平台)
4-N,N-DiMethylaMinoazobenzene-4'-isothiocyanate
Ethyl 3-[(6-Methylpyrazin-2-yl)oxy]benzoate
2-Fluoro-4-biphenylboronic Acid (contains varying aMounts of Anhydride)
3-AMino-6-Methoxy-5-Methylpyridine
TriisopropanolaMine cyclic borate, 98+%
CHO-dhFr-细胞系(ZG仓鼠卵巢细胞冷藏平台)
NCI-H522细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
MCF-7B细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
MSC细胞系(人间充质干细胞冷藏平台)
Ramos细胞系(人B淋巴瘤细胞冷藏平台)
TE-1细胞系(人食管癌细胞冷藏平台)
GA-10细胞系(人B淋巴瘤细胞冷藏平台)
Methoxynitrobiphenyl; 98%
4-(3,4-diaminophenyl)sulfonylbenzene-1,2-diamine
4,4'-Dithiodibutyric acid
2'-Deoxyuridine
2-Acetonaphthone
H.A.细胞系(人羊膜细胞冷藏平台)
SJSA-1细胞系(人骨肉瘤细胞冷藏平台)
hFOB1.19细胞系(人成骨细胞冷藏平台)
NEC细胞系(人食管癌细胞冷藏平台)
BE(2)-C细胞系(人神经母细胞冷藏平台)
Y3-Ag1.2.3细胞系(大鼠瘤细胞冷藏平台)
L-M(TK-)细胞系(小鼠结缔组织细胞冷藏平台)
HLEB3细胞系(人晶状体上皮细胞冷藏平台)
T-CEM细胞系(人T淋巴细胞冷藏平台)
MDA-MB-415细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
HCC-2279细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
N-Methyl-D-Alanine
Tetrachloroethylene, 99%
Stearic acid hydrazide, 97%
FMoc-Lys(2-Cl-Z)-OH
1-Methylpyrazole-4-boronic acid pinacol ester
SF17细胞系(人脑瘤细胞冷藏平台)
TALL-1细胞系(人急性T淋巴细胞冷藏平台)
C3H/10T1/2细胞系(小鼠纤维原细胞冷藏平台)
HS-578T细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
MUS-M1细胞系(小鼠小肠平滑肌细胞冷藏平台)
NCI-H358[H-358,H358]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
1-(10-Hydroxydecyl)iMidazole
4,6-Dichloro-5-fluoro-2-MethylpyriMidine
(1R,2S)-(-)-2-AMino-1,2-diphenylethanol, 99%
Primaquine diphosphate
Malonyl Chloride
AHH-1细胞系(人外周血B淋巴细胞冷藏平台)
A204细胞系(人横纹肌肉瘤细胞冷藏平台)
MHCC97L细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
MCF7B细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
MHCC97H细胞系(人高转移性肝癌细胞冷藏平台)
RH-35细胞系(大鼠肝癌细胞冷藏平台)
NCL-H460细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
HPMEC细胞系(人肺微血管内皮细胞冷藏平台)
RMG-I细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台)
SNU216细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
HRT-S1细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台)
P388细胞系(小鼠淋巴瘤细胞冷藏平台)
MGH-u3细胞系(人膀胱癌细胞冷藏平台)
MC3T3-E1 Subclone 24细胞系(小鼠胚胎成骨细胞冷藏平台)
AV 12细胞系(叙利亚仓鼠细胞冷藏平台)
BxPC-3细胞系(人原位腺癌细胞冷藏平台)
Bv-2细胞系(小鼠小胶质瘤细胞冷藏平台)
(1-Naphthylmethyl)Trichlorosilane
2-bromo-6-chloropyridine
(S)-1,2,3,4-Tetrahydroisoquinoline-3-Methanol
Sp17 ELISA Kit
HCC-Y45细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
NPA细胞系(人甲状腺乳头状癌细胞冷藏平台)
BT549细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
SW579[SW579,SW-579]细胞系(人甲状腺鳞癌细胞冷藏平台)
TE-13细胞系(人食管癌细胞冷藏平台)
5-Bromoimidazo[1,2-a]pyridine
1-Fluoro-2,6-dichloropyridinium Tetrafluoroborate [Fluorinating Reagent]
2-Propylcyclohexanol (cis- and trans- mixture)
1-N-Boc-4-(4-pyridylmethylamino)piperidine
4,7,10-TRIOXA-1,13-TRIDECANEDIAMINE
Sz-2a细胞系(小鼠淋巴瘤细胞冷藏平台)
SW1417[SW-1417]细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台)
HMO6细胞系(人小胶质细胞冷藏平台)
NCI-H1184[H1184]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
NTera-2细胞系(人卵巢畸胎瘤细胞冷藏平台)
QBC-939细胞系(人胆管癌细胞冷藏平台)
ADTC5细胞系(小鼠成软骨细胞冷藏平台)
APOP ELISA Kit
Human schistosoma ELISA Kit
Human PRH ELISA Kit
SLE ELISA Kit
Rat EPO (Erythropoietin) ELISA Kit
Mxd1 ELISA Kit
Human CMA1 ELISA Kit
FFA ELISA Kit
MC3T3-E1 Subclone 24细胞系(小鼠胚胎成骨细胞冷藏平台)
AAV-293细胞系(人胚肾细胞冷藏平台)
SF126细胞系(人脑瘤细胞冷藏平台)
SMMC7721细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
OCM-1细胞系(人眼脉络膜黑色素瘤细胞冷藏平台)
BALB/3T3clone A31细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台)
SW1088细胞系(人脑星型胶质瘤细胞冷藏平台)
ST486细胞系(人B淋巴细胞冷藏平台)
HSC-1细胞系(人皮肤鳞癌细胞冷藏平台)
UO31细胞系(人肾癌细胞冷藏平台)
Glycine,N-[4-(2,5-dihydro-5-oxo-1,2,4-oxadiazol-3-yl)phenyl]-
5-Nitro-2-pyridineacetonitrile
2-Amino-5,6-dihydro-4H-cyclopentathiazole hydrochloride
GHRL ELISA Kit
LSECs细胞系(大鼠肝窦内皮细胞冷藏平台)
ER-30细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
OCI-LY18细胞系(人B淋巴瘤细胞冷藏平台)
AM-38细胞系(人脑胶质母细胞冷藏平台)
NCI-H2081细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
1,4-Diphenyl-1,4-butanedione
D-(-)-Pantolactone
2-Cyclohexen-1-ylethylisocyanide
1-Bromo-2-methoxymethylnaphthalene
3'-AMINOPROPIOPHENONE
YAC-1细胞系(小鼠淋巴瘤细胞冷藏平台)
LO2细胞系(人正常肝细胞冷藏平台)
SW48细胞系(人结肠腺癌细胞冷藏平台)
NCI-H1838细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
CCRF-CEM[CCRF CEM]细胞系(人急性淋巴细胞冷藏平台)
LS174T细胞系(人结肠癌肿瘤细胞冷藏平台)
ZR-75-30细胞系(人乳腺导管癌细胞冷藏平台)
ACE2 ELISA Kit
Human Vascular Endothelial cell Growth Factor D,VEGF-D ELISA Kit
FGF9 ELISA Kit
NP-Y ELISA Kit
PKCb1 ELISA Kit
IL-1sR II ELISA Kit
Human Calretinin,CR ELISA Kit
EGR3 ELISA Kit
HUMSC细胞系(人脐带间充质干细胞冷藏平台)
KG-1细胞系(人急性髓系细胞冷藏平台)
HFL-1细胞系(人上肺上皮细胞冷藏平台)
SF126细胞系(人脑瘤细胞冷藏平台)
U87细胞系(人神经胶质瘤细胞冷藏平台)
HCC-9724细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
UM-UC-1细胞系(人膀胱移行癌细胞冷藏平台)
4-Hydroxy-3-nitrobenzaldehyde
4-(DiMethylaMino)benzonitrile
4,10-Diaza-12-crown 4-Ether
2-AMino-4-broMobenzonitrile
Zinc chloride, 0.7M solution in THF, AcroSeal
Jurkat77细胞系(人T淋巴瘤细胞冷藏平台)
WiDr细胞系(人大肠癌细胞冷藏平台)
NCI-H322细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
HCC细胞系(人子宫高分化鳞癌细胞冷藏平台)
HBEpiC细胞系(人支气管上皮细胞冷藏平台)
HCC-9724细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
COLO-1细胞系(人角质形成细胞冷藏平台)
Isomannide
6-Methyl-2-methylsulfanyl-pyrimidin-4-ol
4-Picolyl chloride hydrochloride
Pyridinedicarboxylicaciddimethylester
Propyl gallate
CT-26.WT细胞系(小鼠大肠癌细胞冷藏平台)
NCI-H226[H226]细胞系(人肺鳞癌细胞冷藏平台)
SNU-368细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
FDC-P1细胞系(小鼠细胞冷藏平台)
LM-6细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
SF763细胞系(人脑瘤细胞冷藏平台)
SW480[SW-480]细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台)
PT-67细胞系(小鼠逆转录病毒包装细胞冷藏平台)
THP-1细胞系(人急性单核细胞冷藏平台)
LC-2/ad细胞系(人肺癌腺癌细胞冷藏平台)
293T细胞系(人胚肾细胞冷藏平台)
1-Chloropentane
Ethyl 5-broMonicotinate, 98%
2,4,5-TriMethoxybenzoic acid, 99%
Propiconazole
5-Br-PADAP
NCI-H719[H719]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
NCI-H1781[H1781]细胞系(人细支气管肺泡癌细胞冷藏平台)
CP70细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台)
PtK1(NBL-3)细胞系(袋鼠肾细胞冷藏平台)
NCI-H1238[H1238]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
H9c2(2-1)细胞系(大鼠心肌细胞冷藏平台)
2,4,5-TriMethylbenzophenone
2-DiMethylaMinoethyl chloride hydrochloride, 99%
Methyl 4-aMinothiophene-3-carboxylate hydrochloride, 97%
5-Iodo-2'-deoxycytidine
2-Methoxy-5-Methylphenylboronic Acid (contains varying aMounts of Anhydride)
HOPC细胞系(人少突胶质前体细胞冷藏平台)
NCI-H295R[H295R]细胞系(人肾上腺皮质腺癌细胞冷藏平台)
HPB-ALL细胞系(人T淋巴细胞冷藏平台)
NCI-H1869[H1869]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
3T3-E1细胞系(小鼠胚成骨细胞冷藏平台)
293A细胞系(人胚肾细胞冷藏平台)
KYSE450细胞系(人食管癌细胞冷藏平台)
HESMC细胞系(人食管平滑肌细胞冷藏平台)
LM-6细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
Hep3b细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
CHGF-003细胞系(大鼠乳腺癌细胞冷藏平台)
HS-578T细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
VEROC1008(E6)细胞系(非洲绿猴肾细胞冷藏平台)
NCCIT细胞系(人畸胎瘤细胞冷藏平台)
NCI-H187[H187]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
NCI-H2172细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
SW 626[SW-626,SW626]细胞系(人卵巢腺癌细胞冷藏平台)
1-Cyclopropyl-6-fluoro-7-chloride-4-oxo-1,4-dihydro-1,8-napthyridine-3-carboxylic acid
kaolinite
2-Pyridinamine, 3-iodo-5-nitro-
PDGFD ELISA Kit
NTera-2细胞系(人卵巢畸胎瘤细胞冷藏平台)
DMS 53细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
BV173细胞系(人外周血B淋巴细胞冷藏平台)
K7M2 wt细胞系(小鼠骨肉瘤成骨细胞冷藏平台)
RIN-m细胞系(褐鼠胰岛素瘤上皮细胞冷藏平台)
Methyl (3R)-(?)-3-(1-Methylindol-3-yl)butanoate
3,4-Dimethoxythiobenzamide
Boc-o-Methyl-D-serine
m-Toluidine Hydrochloride
Tricyclohexylchlorotin
CAL-27细胞系(人舌鳞癌细胞冷藏平台)
COLO320DM[COLO320DM]细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台)
AMO-1细胞系(人浆细胞冷藏平台)
NCI-H647细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
UO31细胞系(人肾癌细胞冷藏平台)
RAMSCs细胞系(大鼠脂肪间充质干细胞冷藏平台)
SW 962细胞系(人阴户磷癌细胞冷藏平台)
β-Secretase ELISA Kit
Human ITGα2 ELISA Kit
Human SIgA ELISA Kit
DHT ELISA Kit
GLβ ELISA Kit
ANG-II ELISA Kit
Human CYSLTR1 ELISA Kit
Human insulin-like growth factors binding protein 1,IGFBP-1 ELISA Kit
Ovary细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台)
MCF7B细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
RMD9细胞系(小鼠胚胎细胞冷藏平台)
AML-193细胞系(人急性单核细胞冷藏平台)