HA细胞：人羊膜细胞系 低代次传代培养

HA细胞：人羊膜细胞系 低代次传代培养
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
如何进行细胞复苏：1)从液氮容器中取出冻存管，直接浸入37℃温水中，并不时摇动令其尽快融化；2)从37℃水浴中取出冻存管，打开盖子，用吸管吸出细胞悬液，加到离心管并滴加10倍以上培养液，混匀；3)离心，1000rpm，5min；4)弃去上清液，加入含10%小牛血清培养液重悬细胞，计数，调整细胞密度，接种培养瓶，37℃培养箱静置培养；5)次日更换一次培养液，继续培养。【温馨提醒】1)从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存，但Z好为对数生长期细胞。在冻存前一天Z好换一次培养液；2)将冻存管放入液氮容器或从中取出时，要做好防护工作(戴棉手套)，以免冻伤；3)冻存和复苏Z好用新配制的培养液。细胞复苏的时候，有些初次实验员将冻存管从液氮中取出后，放在室温下，经常发生冻存管爆炸，该怎么避免出现这种情况吗？其中在拧紧冻存管的时候是否有哪些细节要注意的？一般常用的方法是取出冻存管后在超净工作台中用酒精棉球擦试管口，再稍拧松盖子，再放37度水浴锅中摇溶，在将细胞转移到装有37度预热过的培养基的试管中，迅速离心，再用培养基洗一遍。
HA细胞：人羊膜细胞系 低代次传代培养
细胞生长特性：贴壁生长
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞形态特性：详见细胞说明书
传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些特殊的细胞和分化特征。传代细胞形成细胞株的利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。【操作步骤】1)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；2)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；3)置37℃孵箱或室温(25℃温度)下进行消化，2~5min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；4)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；5)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；6)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO2培养箱中进行培养；7)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般2～3d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】1)掌握好细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；2)掌握好消化浓度，当消化液浓度过高时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
HA细胞：人羊膜细胞系 低代次传代培养
细胞背景资料：详见相关文献介绍
养科研细胞是生物医学研究的基本功。有三个小经验可以和大家分享一下：1)不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子，觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑？知道为什么吗？烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸氢跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候，炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后，空气变冷，压力骤降，培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳，释放出来。培养基中的碳酸少了，当然会变碱。如果不烧瓶口的话，你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。(当然多多少少还是会有一点越用越碱，因为室温还是比冰箱内的温度高)，其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下，你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话，这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌，除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来美国以后发现这里更彻底，超净台内根本就不点酒精灯；2)不要频繁看细胞。对于初学者而言，养细胞就像养孩子一样，有空就要去看看。细胞越是养不好，就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处，特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后，密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围，形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞，培养瓶这么一晃，把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞，细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管，细胞疯长；3)不要怕消化。在传代的时候，初学者往往生怕细胞消化过度，早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯，吹得满瓶子都是气泡。在我看来，用力吹打对细胞的损伤比消化更大。我师兄在做血管平滑肌原代的时候，37度消化过夜，细胞也没事。我一般是等细胞完全变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有，动作要轻柔，尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大，对细胞的伤害也是很大的。
HA细胞：人羊膜细胞系 低代次传代培养
细胞传代方法：消化3-5分钟，1：2,3天内可长满

TCMK-1细胞系(小鼠肾小管上皮细胞冷藏平台）
SNU-398细胞系(人肝癌细胞冷藏平台）
TE15细胞系(小鼠B淋巴细胞冷藏平台）
Methyl malonyl chloride
4-BroMo-2-chlorophenol
2',4'-DiMethoxyacetoacetanilide
2-BroMo-1-Methyl-4-(trifluoroMethylsulfonyl)benzene
RhodaMine B base, 99%
Caov-3细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台）
BAEC细胞系(牛主动脉内皮细胞冷藏平台）
Hepa 1-6细胞系(小鼠肝癌细胞冷藏平台）
NCI-H1688[H1688]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
NCI-H1373[H1373]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
NCI-H295R[H295R]细胞系(人肾上腺皮质腺癌细胞冷藏平台）
McA-RH7777细胞系(大鼠肝癌细胞冷藏平台）
3,3'-difluorobenzophenone
(dimethylamino)acetaldehyde diethyl acetal
2,2-Dibromopropane
Dihydroxyacetone
Ethyl 4-dimethylaminobenzoate
293H(HEK-293)细胞系(人胚肾细胞冷藏平台）
HCC 94细胞系(人子宫鳞癌细胞冷藏平台）
NCI-H2405[H2405]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
Pt-K2(PtK2)细胞系(袋鼠肾细胞冷藏平台）
CCL13细胞系(人张氏肝细胞冷藏平台）
VEROC1008(E6)细胞系(非洲绿猴肾细胞冷藏平台）
Hela299细胞系(人宫颈癌细胞冷藏平台）
U87MG细胞系(人恶性胶质母细胞冷藏平台）
AN3 CA细胞系(人子宫内膜腺癌细胞冷藏平台）
U-118MG细胞系(人脑星形胶质母细胞冷藏平台）
MC-38细胞系(小鼠结肠癌细胞冷藏平台）
1-BroMo-2-Methylpropane
AllylpalladiuM(II) chloride diMer, Pd 56.0% Min
4-Methylbenzeneboronic acid neopentyl glycol ester, 99%
2-BroMophenol, 98%
TetraphenylarsoniuM(V) chloride hydrate
6T-CEM细胞系(人T淋巴白血病细胞冷藏平台）
JAR细胞系(人胎盘绒毛癌细胞冷藏平台）
HCC1419细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台）
NCI-H1993细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台）
SK-GT-4细胞系(人食道癌肿瘤细胞冷藏平台）
HCC-366细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
TetraMethylaMMoniuM p-Toluenesulfonate
2,2,2-Trifluoroethanol, 99.8%, extra pure
2-Methoxy-5-(trifluoroMethyl)aniline, 96%
ETHYLENE GLYCOL
2-BroMoethyl Acetate
MARC145(MARC-145)细胞系(非洲绿猴胚胎肾细胞冷藏平台）
NCI-H2106[H2106]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
CAL-12T细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
RKN细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台）
NCI-H1944细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
NCI-H1436细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
HCPF细胞系(人脉络丛成纤维细胞冷藏平台）
HLEC细胞系(人淋巴内皮细胞冷藏平台）
NCI-H2452[H2452]细胞系(人间皮瘤细胞冷藏平台）
RuCa细胞系(小鼠肾癌细胞冷藏平台）
CAL27细胞系(人舌鳞状癌细胞冷藏平台）
Rat Kidney Podocytes细胞系(大鼠肾足突细胞冷藏平台）
SG231细胞系(人胆管上皮癌细胞冷藏平台）
SW 1573[SW-1573,SW1573]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
U251细胞系(人神经胶质细胞冷藏平台）
SNU-C2B细胞系(人结直肠癌细胞冷藏平台）
T1-73细胞系(人骨肉瘤细胞冷藏平台）
Esmolol hydrochloride
7-methoxy-2,3-dihydro-1H-inden-1-one
N-TERT-BUTYLBENZENESULFENAMIDE
MADCAM1 ELISA Kit
Calu-3细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台）
T3T-L1细胞系(小鼠脂肪细胞冷藏平台）
MKN1细胞系(人胃癌细胞冷藏平台）
NCI-H1092[H1092]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
MLO-Y4细胞系(小鼠骨样细胞冷藏平台）
(R)-(-)-1-AMino-2-propanol
Tetrabutylammonium Borohydride [Reducing Reagent]
2-Bromoacetophenone ,99%
2-Fluoro-5-(isopropylcarbamoyl)benzeneboronic acid 98%
4-N-Butyltoluene ,97%
HEp-2细胞系(人喉表皮样癌细胞冷藏平台）
HCGC细胞系(人小脑颗粒细胞冷藏平台）
A204细胞系(人横纹肌肉瘤细胞冷藏平台）
786-O[786-0]细胞系(人腺癌细胞冷藏平台）
HLF-02细胞系(人胚肺二倍体细胞冷藏平台）
HCC-2279细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
RBSMC细胞系(大鼠脑动脉平滑肌细胞冷藏平台）
Mouse GAL6 (Galectin 6) ELISA Kit
TTR ELISA Kit
Human High mobility group protein B1，HMGB-1 ELISA Kit
LH ELISA Kit
HSPA5 ELISA Kit
APOE ELISA Kit
Human Her2 ELISA Kit
Human FGβ ELISA Kit
NCI-H1869细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
SK-MEL-2细胞系(人恶性黑色素瘤细胞冷藏平台）
Sf21细胞系(昆虫卵巢细胞冷藏平台）
JCA-1细胞系(人前列腺癌细胞冷藏平台）
SK-N-BE细胞系(人神经母细胞冷藏平台）
HCAEC细胞系(人冠状动脉内皮细胞冷藏平台）
T/G HA-VSMC细胞系(人血管平滑肌细胞冷藏平台）
H1648细胞系(人肺淋巴癌细胞冷藏平台）
B104细胞系(大鼠神经母细胞冷藏平台）
GIST882细胞系(人胃肠道间质瘤细胞冷藏平台）
N-[5-[bis(2-methoxyethyl)amino]-2-[(2-bromo-6-cyano-4-nitrophenyl)azo]phenyl]acetamide
Potassium hexacyanoruthenate (II) hydrate
Quinoxaline-6-carbocylic acid
Cys-C ELISA Kit
MSCs细胞系(小鼠脐带间充质干细胞冷藏平台）
SK-HEP-1细胞系(人肝癌细胞冷藏平台）
OAW42细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台）
HBZY-1细胞系(大鼠肾小球系膜细胞冷藏平台）
RKO-AS45-1细胞系(人结肠癌转基因细胞冷藏平台）
4-Fluoro-2-nitrotoluene ,98%
3,5-Dichlorophenylhydrazine
N-Ethylisopropylamine
Cyclopentyl-methyl-amine
6-Bromoquinoxaline
PCK细胞系(大黄鱼肾细胞冷藏平台）
AGS细胞系(人胃腺癌细胞冷藏平台）
NCI-H2172[H2172]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
NCI-H719[H719]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
801-D细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
FRH-0201细胞系(人胆管癌细胞冷藏平台）
CLL细胞系(人慢性淋巴白血病细胞冷藏平台）
FDP ELISA Kit
Human angiotensin Ⅱ receptor type Ⅰa,AgtrⅠa ELISA Kit
EV71-IgM ELISA Kit
Dyn ELISA Kit
LDLR ELISA Kit
BJP ELISA Kit
Human GNMT ELISA Kit
Human Eukaryotic translation initiation factor 3a,eIF3a ELISA Kit
CCD-1095Sk细胞系(人乳腺浸润性导管癌旁皮肤细胞冷藏平台）
HIBEC细胞系(人肝内胆管上皮细胞冷藏平台）
RAMSCs细胞系(大鼠脂肪间充质干细胞冷藏平台）
PK15细胞系(猪肾细胞冷藏平台）
ASH-3细胞系(人未分化甲状腺癌细胞冷藏平台）
DOHH-2细胞系(人胸腔积液滤泡ZX母细胞冷藏平台）
OPM-2细胞系(人瘤细胞冷藏平台）
3-AMino-5-phenylpyrazole
3-FurylMethylaMine
2-Fluoro-5-(trifluoroMethyl)benzoic Acid
N-Acetyl 5-broMo-2-fluoroaniline
2-AMino-4,5-diMethoxybenzoic acid, 98%
H1299细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
HHSteC细胞系(人肝脏星形细胞冷藏平台）
NCI-H596细胞系(人肺腺鳞癌细胞冷藏平台）
HeLa 229细胞系(人宫颈癌细胞冷藏平台）
QGY-7703细胞系(人肝癌细胞冷藏平台）
CNE细胞系(人鼻咽癌细胞冷藏平台）
BEND细胞系(牛子宫内膜上皮细胞冷藏平台）
Furfuryl methyl sulfide
Diastase
Cyclohexanepropanamine
1,4-dicarboxaldehyde, 2,3,5,6-tetrahydroxy-
2-Aminobenzylalcohol
EMT-6细胞系(小鼠乳腺癌细胞冷藏平台）
Rat Kidney Podocytes细胞系(大鼠肾足突细胞冷藏平台）
NCI-H2087[H2087]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
95-D细胞系(人高转移肺癌细胞冷藏平台）
Hep3b细胞系(人肝癌细胞冷藏平台）
A-375[A375]细胞系(人恶性黑色素瘤细胞冷藏平台）
KARPAS 299细胞系(人淋巴瘤细胞冷藏平台）
HCC94细胞系(人子宫鳞癌细胞冷藏平台）
RSMC细胞系(大鼠主动脉平滑肌细胞冷藏平台）
HCC1599细胞系(人乳腺原发性导管癌细胞冷藏平台）
MuM-2B细胞系(人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞冷藏平台）
Irinotecan Hcl
TriMethyl orthovalerate, 98%
2,4,6-TriMethylbenzyl alcohol, 98+%
Methylglycol chitosan
Corazonin
HuTu-80细胞系(人十二脂肠腺癌细胞冷藏平台）
RA FLSs细胞系(人关节炎成纤维样滑膜细胞冷藏平台）
CCRFS-180细胞系(小鼠肉瘤细胞冷藏平台）
SAS细胞系(人舌头鳞状肿瘤细胞冷藏平台）
GI-1细胞系(人神经胶质瘤和肉瘤细胞冷藏平台）
LX-1细胞系(人肝星形细胞冷藏平台）
N-Methyl-1-naphthylaMine Hydrochloride
5,6-DichloropyriMidin-4-aMine
2-Oxo-2,3-dihydro-1,3-benzoxazole-6-sulfonyl chloride, 95%
trans-3-Indoleacrylic acid
1-BroMo-2,3-dichlorobenzene
U-87 MG细胞系(人脑星形胶质母细胞冷藏平台）
HMEC细胞系(人乳腺上皮细胞冷藏平台）
MLMA细胞系(人恶性淋巴瘤细胞冷藏平台）
NEC细胞系(人食管癌细胞冷藏平台）
CMK细胞系(人原始巨核细胞冷藏平台）
A20[A-20]细胞系(小鼠B淋巴瘤细胞冷藏平台）
NCI-H2122[H2122]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
OV-1063细胞系(人卵巢上皮细胞冷藏平台）
SAEC细胞系(羊肺泡上皮细胞冷藏平台）
Ketr-3细胞系(人肾癌细胞冷藏平台）
LMH细胞系(鸡肝癌细胞冷藏平台）
NSCF细胞系(人瘢痕成纤维细胞冷藏平台）
NCI-H1915[H1915]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
NCI-H1963[H1963]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
U266[U266B1]细胞系(人瘤细胞冷藏平台）
HuCCT1细胞系(人胆管上皮癌细胞冷藏平台）
HCECs细胞系(人角膜上皮细胞冷藏平台）
fargesin
prolidase from lactococcus lactis
2-Cyclohexylethanol
PAI ELISA Kit
LTPEP-a-2细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台）
HSAS3细胞系(人皮肤成纤维细胞冷藏平台）
NCI-H1755细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
RASMC细胞系(大鼠主动脉平滑肌细胞冷藏平台）
COLO 320DM细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台）
2-Chloro-4-trifluoroMethoxyphenylboronic acid
tert-Butyl 5-bromo-2-chlorobenzoate
sec-Butyl Methyl Ether
2,6-Diisopropyl-N,N-dimethylaniline, 97%
Methyl 2,2-dithienylglycolate
KATOⅢ细胞系(人胃癌细胞冷藏平台）
RWPE-2细胞系(人前列腺正常细胞冷藏平台）
143TK-细胞系(人胸腺激酶缺陷型细胞冷藏平台）
Sp2/0-Ag14细胞系(小鼠瘤细胞冷藏平台）
Acc-3细胞系(人涎腺腺样囊性癌细胞冷藏平台）
NE-4C细胞系(小鼠神经干细胞冷藏平台）
CCK-81细胞系(人结肠癌腺癌细胞冷藏平台）
Mouse GATA1 (GATA Binding Protein 1) ELISA Kit
Human OSM ELISA Kit
DRD5 ELISA Kit
KDR ELISA Kit
Rat RELB (V-Rel Reticuloendotheliosis Viral Oncogene Homolog B) ELISA Kit
BSA ELISA Kit
Human MAO ELISA Kit
Human cardiotrophln 1,CT-1 ELISA Kit
JAR细胞系(人胎盘绒毛癌细胞冷藏平台）
HCMEC细胞系(人心脏微血管内皮细胞冷藏平台）
AE1201细胞系(人肺转化细胞冷藏平台）
BEL-7404细胞系(人肝癌细胞冷藏平台）