SK-N-AS细胞:人脑神经母细胞瘤细胞系 专业复苏培养经验
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
细胞冻存的步骤:1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天Z好换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为5×106~1×107/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具体要看培养的细胞类型来选择;3)将分装上述细胞悬液于2ml冻存管中,每管0.25ml。冻存管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数);4)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中,-80℃冰箱过夜。;如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐)Z好;或者可以在4℃,2h;然后转到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,Z好取出一只冻存管细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
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细胞生长特性:贴壁生长
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞形态特性:上皮样
养了几年细胞,说一点自己培养细胞方面的看法:1)培养细胞前,可以看看细胞特点说明书,包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等;2)不同细胞生长周期不同,有的生长很快,比如说MDA-MB-231,传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了,有的又是特别慢,等的人心焦,BT474就是,传代是一分二,复苏起始的时候两周多才能长满,所以就要在培养细胞的过程中多多摸索了;3)对于娇弱的细胞,就得细心呵护了,胰酶消化不能过久,吹得时候要轻柔,离心时候也要注意转速和时间,每天都要去看一下细胞,肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况;4)冻存细胞复苏后第二天Z好更换一次培养基;5)培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次;6)养细胞的教训:不能偷懒!细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋。1)不管买的细胞、惠赠的细胞,刚拿到手赶紧做两件事:检测是否有支原体污染; 迅速扩增冻存;2)发现有污染迅速处理掉,特别是当你养了很多种细胞时; 细菌污染,真菌污染很容易发现,支原体污染的话,细胞会长的慢,买个支原体检测的kit定期检测一下;3)传代细胞日常的值日清洁是必须的,此外还要定期熏蒸;4)细胞的传代一定要规律,保持相同的confluency和传代时间间隔,不要随心所欲或者拖延;5)注意个人卫生。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
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细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞培养相关培养基选购基本指南:如何选择培养基:经常听到有人问,这种细胞该用哪一种培养基呢?其实这个问题的答案可以很简单,也可以好复杂。为什么这样说呢?如果这种细胞是购自一些细胞库,那很简单,问供应商就行了。或者找到相关的文献,作为参考。培养基这么多种,要选择起来也是个头疼的事情。除了部分培养基是公开配方的,或者是专门针对某一种细胞的,如昆虫基本培养基和神经祖细胞基础培养基, 但是大部分液体培养基都是专利配方的,也就是说其中的成分是保密的。那么你只能是检索文献、让供应商推荐,然后用自己的细胞做几次传代培养来选出Z合适的培养基。毕竟实践出真知。怎么样才可以买到好的培养基产品:首先,当然需要找对品Pai,其次是找对自己所在区域的品Pai代理商,针对自己所养的细胞,咨询供应商该选用哪种的培养基进行培养,这样就可以买到好的而且适合自己的培养基产品。关于培养基品Pai,目前公司所知道的高校实验室有些同学在用Corning系列培养产品,也有同学在用Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等品Pai的产品。培养基的选择和使用;MEM:成分简单,贴壁细胞;DMEM:分高糖型和低糖型;IDMEM:适合细胞密度低,生长困难的细胞。如杂交细胞的筛选,DNA转染后转化细胞的筛选培养;RPM1640:应用Z广泛的培养基之一。悬浮细胞培养,主要针对淋巴细胞,也适合其他细胞;199、109培养基:成分齐全,培养效果较好;F10培养基:适合小鼠及人类二倍体细胞培养;F12培养基:适合单细胞分离培养及无血清培养;McCoy’s培养基:特别适合原代细胞及较难培养细胞的生长。
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细胞传代方法:1:5-1:10传代;每周换液2-3次。
HPC-Y5细胞系(人细胞冷藏平台)
NCI-H446细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
H1648细胞系(人肺淋巴癌细胞冷藏平台)
4,6-Dichloro-2-(methylthio)pyrimidine
Tropolone
1,11-DibroMoundecane
4-(4-BroMo-1H-pyrazol-1-yl)-N,N-diethylbenzenesulfonaMide
StigMasterol, 95%
HIBEC细胞系(人肝内胆管上皮细胞冷藏平台)
WISH细胞系(人羊膜细胞冷藏平台)
PED细胞系(猪内皮细胞冷藏平台)
GI-1细胞系(人神经胶质瘤和肉瘤细胞冷藏平台)
GAK细胞系(人恶性黑色素瘤细胞冷藏平台)
GOTO细胞系(人神经母细胞冷藏平台)
Neuro-2a细胞系(小鼠脑神经瘤细胞冷藏平台)
isoalantolactone
1-butylimidazole
methylene diacetate
5-Methyl-2-hexanone
2-Chlorobenzyl cyanide
HUAEC细胞系(人脐动脉内皮细胞冷藏平台)
EOC 20细胞系(小鼠小神经胶质细胞冷藏平台)
BMF细胞系(小鼠成纤维细胞冷藏平台)
AAV293细胞系(人胚肾细胞冷藏平台)
MCG803细胞系(人胃腺癌细胞冷藏平台)
MLO-Y4细胞系(小鼠骨样细胞冷藏平台)
AN3 CA细胞系(人子宫内膜腺癌细胞冷藏平台)
NCI-H2135[H2135]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
SK-N-FI细胞系(人脑神经母细胞冷藏平台)
Hs578Bst细胞系(人乳腺细胞冷藏平台)
BJAB细胞系(人B淋巴细胞冷藏平台)
(4-Chloro-Benzyl)-Methyl-AMine
NiobiuM(V) iodide
2,5-Dihydroxybenzoic acid, 99%
4′-(TrifluoroMethyl)propiophenone
2,5-Dichloropyridine-4-boronic acid
NCI-H378[H378]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
CP70细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台)
SW 1271[SW-1271]细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台)
HMVEC细胞系(人肺微血管内皮细胞冷藏平台)
NCI-H196细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
MLE 12细胞系(小鼠肺上皮细胞冷藏平台)
trans-1,3-Hexadiene (stabilized with TBC)
(1R,2R)-2-(N-BOC-AMino)cyclopentanecarboxylic acid
Dodecanedioyl dichloride, 98%
MEZEREIN
Undecanenitrile
Neuro-2a/N2a细胞系(小鼠脑神经瘤细胞冷藏平台)
U-87 MG细胞系(人脑星形胶质母细胞冷藏平台)
NCI-H1355细胞系(人肺癌腺癌细胞冷藏平台)
T98G细胞系(人脑胶质瘤细胞冷藏平台)
LUDLU-1细胞系(人肺癌鳞癌细胞冷藏平台)
SW 1271[SW-1271,SW1271]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
C-33A细胞系(人宫颈癌细胞冷藏平台)
COLO320DM[COLO320DM]细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台)
MLE-12细胞系(小鼠肺上皮细胞冷藏平台)
NCI-H650细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
WIL2-S细胞系(人B淋巴细胞冷藏平台)
VA-ES-BJ细胞系(人上皮样肉瘤细胞冷藏平台)
EA.hy926细胞系(人脐静脉融合细胞冷藏平台)
3T3-L1细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台)
LUDLU-1细胞系(人肺癌鳞癌细胞冷藏平台)
SW 954细胞系(人阴户鳞状癌细胞冷藏平台)
NCI-H1341细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
DL-4-Thiazolylalanine
Cyclobutanecarboxylic acid
2,5-dimethylindole
TRY ELISA Kit
E.G7-OVA细胞系(小鼠T淋巴瘤细胞冷藏平台)
MeT-细胞系(人膜间皮细胞冷藏平台)
HUV-EC细胞系(人脐静脉内皮细胞冷藏平台)
TF-1a细胞系(人红细胞冷藏平台)
MKN-1细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
N-NITROSOMORPHOLINE
4-Hexyloxybenzaldehyde, 99%
1-(4-Methoxyphenyl)-5-methyl-1H-pyrazole-4-carbaldehyde , 95%
1,2,3-Trifluoro-5-methoxy-4-nitrobenzene
2-(Methylsulfonyl)benzenol
NCI-H226[H226]细胞系(人肺鳞癌细胞冷藏平台)
BC-023细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
PAXC-012细胞系(人源癌细胞冷藏平台)
3T3-L1细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台)
RH-30细胞系(人横纹肌肉瘤细胞冷藏平台)
MDA-MB-175细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
HOEC细胞系(人口腔上皮细胞冷藏平台)
IL-23 ELISA Kit
Human TNFsR-Ⅰ ELISA Kit
Human LXRβ ELISA Kit
FASL ELISA Kit
CD30 ELISA Kit
Monkey Interferon γ ,IFN-γ ELISA Kit
Human HNRPA2B1 ELISA Kit
CLS ELISA Kit
293 Cells,low passage细胞系(人胚肾细胞冷藏平台)
NCTC1469细胞系(小鼠正常肝细胞冷藏平台)
PC-12[PC12]细胞系(大鼠肾上腺嗜铬细胞冷藏平台)
Kert-3细胞系(小鼠肾癌细胞冷藏平台)
IHH-4细胞系(人甲状腺癌细胞冷藏平台)
SW948细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台)
AtT-20细胞系(小鼠垂体瘤细胞冷藏平台)
CAMA-1细胞系(人乳腺腺癌细胞冷藏平台)
BAr-T细胞系(人食管上皮细胞冷藏平台)
A-498细胞系(人肾癌细胞冷藏平台)
2-[(tert-butoxycarbonyl)amino]-1,3-thiazole-5-carboxylic acid
5-Bromo-6-chloro-3-indolyl-beta-D-galactoside
N,N,N',N'-tetrakis(2,3-epoxypropyl)cyclohexane-1,3-dimethylamine
Porcine Insulin,INS ELISA Kit
OPM-2细胞系(人瘤细胞冷藏平台)
HK-2细胞系(人肾皮质近曲小管上皮细胞冷藏平台)
NCI-H1648细胞系(人肺癌腺癌细胞冷藏平台)
COS-1细胞系(非洲绿猴SV40转化的肾细胞冷藏平台)
NCI-H209[H209]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
1-(4-BroMophenylsulfonyl)-2-Methyl-1H-iMidazole
Carbazole ,97%
DL-Alanyl-DL-methionine
Bis(4-nitrophenyl) Disulfide
1-Methyl-2-nitro-3-(trifluoromethyl)benzene
CCRF-CEM[CCRF CEM]细胞系(人急性淋巴细胞冷藏平台)
HS683细胞系(人脑胶质瘤细胞冷藏平台)
RC-4BC细胞系(人垂体瘤细胞冷藏平台)
K7M2wt细胞系(小鼠骨肉瘤成骨细胞冷藏平台)
BT474细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
BpRc1细胞系(小鼠肝癌细胞冷藏平台)
KALS-1细胞系(人神经胶质瘤细胞冷藏平台)
IL-23 ELISA Kit
Human Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅱ,TNFsR-Ⅱ ELISA Kit
Human HDGF ELISA Kit
OT/BGP ELISA Kit
CD19 ELISA Kit
Monkey β2-microglobulin,BMG/β2-MG ELISA Kit
ADMA ELISA Kit
Human CT-1 ELISA Kit
HMVEC-L细胞系(人肺微血管内皮细胞冷藏平台)
HCC1187细胞系(人乳腺导管癌细胞冷藏平台)
EAG3细胞系(人子宫内膜低分化腺癌细胞冷藏平台)
OVHM细胞系(小鼠卵巢癌细胞冷藏平台)
MDCC-MSB-1细胞系(鸡淋巴瘤细胞冷藏平台)
NCI-H1755[H1755]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
SCL-1细胞系(人皮肤鳞状细胞冷藏平台)
N-Benzylmaleimide
2-Hydroxy-4-Methoxybenzaldehyde
Dodecylbenzene (soft type) (Mixture of linear chain isoMers)
Ethyl 6-broMo-4-hydroxyquinoline-3-carboxylate
1,2-Ethanedisulfonic acid dihydrate, 98%
HT 1197细胞系(人膀胱癌细胞冷藏平台)
SLMT-1细胞系(人食管鳞癌细胞冷藏平台)
PT67细胞系(小鼠逆转录病毒包装细胞冷藏平台)
KATO III细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
KATO III细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
KATO III细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
KNS-62细胞系(人肺支气管鳞状细胞冷藏平台)
Dichlorobenylchloride
Thiophene-2-Sulfonyl Chloride
Thorin I
2-Acetyl-5-methylfuran
1-Methyl-1-phenylhydrazine
HCC-95细胞系(人肺癌鳞癌细胞冷藏平台)
L-929细胞系(小鼠结缔组织细胞冷藏平台)
SNU-761细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
Pt K2细胞系(袋鼠肾细胞冷藏平台)
B104细胞系(大鼠神经母细胞冷藏平台)
Mouse podocyte细胞系(小鼠肾足细胞冷藏平台)
NCI-H1404[H1404]细胞系(人乳头状腺癌细胞冷藏平台)
GP5d细胞系(人结肠腺癌细胞冷藏平台)
McA-RH7777细胞系(大鼠肝癌细胞冷藏平台)
JCA-1细胞系(人前列腺癌细胞冷藏平台)
BALL-1细胞系(人B淋巴白血病细胞冷藏平台)
Lead
(+)-Diisopropyl O,O'-bis(triMethylsilyl)-L-tartrate, 99%
Pyridine-3,4-dicarboxiMide
Kerosene
Toltrazuril sulfoxide
RPC细胞系(大鼠垂体细胞冷藏平台)
LU99A细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
NCI-H1573[H1573]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
HCC-44细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
NMC-G1细胞系(人脑胶质细胞冷藏平台)
HFLS-OA细胞系(人滑膜关节炎成纤维细胞冷藏平台)
Methyl 5-(HydroxyMethyl)-1H-iMidazole-4-carboxylate
2-Chloro-6-fluoro-3-Methoxyphenol
Thieno[2,3-b]thiophene-2-carboxylic acid, 90%
Estrone 3-methyl ether
3-Chloro-4-fluoroanisole
NCI-H2171[H2171]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
NCI-H460[H460]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
DMS-53细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
A-375细胞系(人恶性黑色素瘤细胞冷藏平台)
COR-L105细胞系(人原发性肺癌细胞冷藏平台)
RWPE2细胞系(人前列腺上皮细胞冷藏平台)
293F细胞系(人胚肾上皮细胞冷藏平台)
LS 180细胞系(人结肠腺癌细胞冷藏平台)
Renca细胞系(小鼠肾癌细胞冷藏平台)
HMSC细胞系(人间充质干细胞冷藏平台)
CLL细胞系(人慢性淋巴白血病细胞冷藏平台)
CTLL-2[CTLL2]细胞系(小鼠T淋巴细胞冷藏平台)
NCI-H2073[H2073]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
HPAEC细胞系(人肺动脉内皮细胞冷藏平台)
AHH-1细胞系(人外周血B淋巴细胞冷藏平台)
IGROV-1细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台)
L428细胞系(人霍奇金淋巴瘤细胞冷藏平台)
Levamisole Hydrochloride
m-Aminobenzylamine
4,4'-Azoxyanisole
t-PA ELISA Kit
HAN细胞系(人羊膜细胞冷藏平台)
EL4细胞系(小鼠淋巴瘤细胞冷藏平台)
Tsu-Pr1细胞系(人非雄激素依赖型前列腺癌细胞冷藏平台)
HS683细胞系(人脑胶质瘤细胞冷藏平台)
Neuro-2a[N2a]细胞系(小鼠脑神经瘤细胞冷藏平台)
Xanthane Hydride , 95%
4-Nitrophenyl isothiocyanate
Ethyl N-[2-(4-hydroxyphenyl)ethyl]carbamate
Methyl 2,3,6-tri-O-benzoyl-a-D-glucopyranoside ,98%
Sodium octyl sulfate
NCI-H2087细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台)
SUP-B1细胞系(人Ph+急淋白血病细胞冷藏平台)
NCI-H520细胞系(人肺鳞癌细胞冷藏平台)
HA1800细胞系(人星形胶质细胞冷藏平台)
LoVo细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台)
NCI-H841细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
BC-019细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
α-MSH ELISA Kit
Human MUC13 ELISA Kit
Human Lung resistance-related protein,LRP ELISA Kit
ACTH ELISA Kit
ANG1 ELISA Kit
TLR4 ELISA Kit
CD100 ELISA Kit
Human VEGF (Vascular Endothelial Cell Growth Factor ) ELISA Kit
L-O2细胞系(人正常肝细胞冷藏平台)
NCI-H1793细胞系(人肺癌腺癌细胞冷藏平台)
LS180细胞系(人结肠腺癌细胞冷藏平台)
NCI-H1963细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)