DV-90细胞:人肺癌腺癌细胞系 更多技术指导
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
常见细胞培养中一些问题总结:1)培养基中血清的比例多少合适?血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为5%-15%,不要低于5%或高过20%,因为含量过低会导致细胞营养不足,过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为10%,可以适量加减;2)何时须更换培养基?视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上的更换时间,按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换;3)购买的复苏细胞,为何会有脱落?因为运输的过程中不可避免的会有震荡,收到后可以离心收集;4)购买的细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形?研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可;5)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久;6)收到的冷冻管瓶身破裂,瓶盖有裂纹,或瓶盖脱落之原因?冷冻管瓶盖裂纹,或瓶身破裂,可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当,造成冷冻管裂损,建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱,乃因热胀冷缩之物理现象,冷冻管有可能因此而造成细胞污染,故冷冻管于放入和取出液氮桶时,均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
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细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞形态特性:详见细胞说明书
传代培养及其操作步骤:原代细胞培养成功以后,需要进行分离培养,否则细胞会因生存空间不足或密度过大,营养障碍,影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株),可以进行细胞克隆,易于保存,但可能丧失一些特殊的细胞和分化特征。传代细胞形成细胞株的利处在于提供了大量持久的实验材料,便于实验。【操作步骤】1)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液;2)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜;3)置37℃孵箱或室温(25℃温度)下进行消化,2~5min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察,当发现胞质回缩、细胞间隙增大后,应立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶内加入Hanks液少量,轻轻转动培养瓶,把残留消化液冲掉,然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培养液,终止消化;5)使用弯头吸管,吸取瓶内培养液,按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞,使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔,以防用力过猛损伤细胞;6)用计数板计数后,分别接种于新的培养瓶中,置CO2培养箱中进行培养;7)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般2~3d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面,即可使用;也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】1)掌握好细胞消化的时间,消化时间过短时,细胞不宜从瓶壁脱落,过长的消化会导致细胞脱落、损伤;2)掌握好消化浓度,当消化液浓度过高时,消化时间应缩短,过低时细胞消化时间相对延长。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
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细胞背景资料:详见相关文献介绍
动物细胞实验室必备仪器进行简单介绍:1)CO2培养箱:CO2培养箱是细胞培养的必备仪器,它为细胞提供了一个体外培养的舒适环境,如适宜的温度、湿度、酸碱度、O2浓度等。细胞在体外培养时很容易受到各种细菌、微生物的感染,因此,CO2培养箱的灭菌和YJ能力就显得尤为重要;2)烘箱(干燥箱):用于细胞培养的一些器械、器皿必须烘干后才能使用,玻璃器皿等须干热消毒。干热消毒时,烘箱内温度一般要达到160℃以上,通常使用鼓风式烘箱。其优点是温度均匀、效果较好,缺点是升温过程较慢。升温时不能先升温后鼓风而应鼓风与升温同时开始,至100℃时,停止鼓风。需注意避免包裹器皿的纸或棉花烧焦,烧焦的碎屑可影响细胞的生长。消毒后不能立即打开箱门,以免骤冷导致玻璃器皿破裂,应等温度自然下降至100℃以下后可开门。3)超净工作台/生物安全柜:细胞培养对无菌环境要求很高,在细胞操作时,一般需要在100级空气质量条件下进行,因此超净工作台或生物安全柜就必须配备。4)液氮罐:为了保存细胞,特别是不易获得的突变型细胞或细胞株,要将细胞冻存。冻存的温度一般为液氮温度-196℃,因此,需要液氮罐。在此环境中,一般细胞可以保存十年具有活性。5)超低温冰箱:细胞的冻存过程需要一系列程序降温,一般4℃下存放30min,转放-20℃ 1 hour,再转入-70至-80℃过夜,之后才可以转移到液氮内(-196℃),这时就必须配备一台-86℃超低温冰箱。一般超低温冰箱保存细胞可达数月,对于不需要长期冻存的细胞,可暂时放于超低温冰箱保存。6)恒温水浴:从液氮或超低温冰箱中取出细胞冻存管需要立即放于37℃水浴中快速复苏之后才传代培养,因此,恒温水浴也是细胞实验室必备仪器。7离心机:细胞培养需要离心收集传代细胞,所以需要配置低速的常温离心机,对于后期细胞内容物的分离则需要高速冷冻离心机。除上述仪器外,移液器、高压灭菌锅、倒置显微镜、荧光显微镜也是细胞培养的必备仪器,发酵罐、转瓶机等也常常见于细胞培养实验室。
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细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HCT 116细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台)
VMRC-RCZ细胞系(人肾癌细胞冷藏平台)
NCI-H661细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
1,1'-Binaphthyl-2,2'-diyl hydrogenphosphate
(R)-(+)-1,1'-Bi-2-naphthol
3,5-Dichloro-2,4,6-trifluorobenzotrifluoride
N-Cyclohexyl 2-broMo-5-fluorobenzaMide
Tetraphenylboron sodiuM, ACS reagent
NMC-G1细胞系(人脑胶质细胞冷藏平台)
MHCC97细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
TGW细胞系(人神经母细胞冷藏平台)
TE3细胞系(小鼠B淋巴细胞冷藏平台)
TE10细胞系(人食道癌肿瘤细胞冷藏平台)
TE7细胞系(小鼠B淋巴细胞冷藏平台)
Acc-3细胞系(人涎腺腺样囊性癌细胞冷藏平台)
Methyl Orange
Vinyltriphenylphosphonium bromide
2,4-Dimethyl-1,3-dioxane
naptalam
1,3-Diphenoxy-2-propanol
HCC-2185细胞系(人乳腺转移性小叶癌细胞冷藏平台)
TE15细胞系(小鼠B淋巴细胞冷藏平台)
HBdSMC细胞系(人膀胱平滑肌细胞冷藏平台)
3T3-Swiss albino细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台)
NCI-H820细胞系(人乳头状腺癌肺癌细胞冷藏平台)
BCP-1细胞系(人B淋巴瘤细胞冷藏平台)
THC8307细胞系(人高分化结肠腺癌细胞冷藏平台)
GES细胞系(人肾上皮细胞冷藏平台)
NCI-H292[H292]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
JAR细胞系(人胎盘绒毛癌细胞冷藏平台)
CHO细胞系(仓鼠卵巢细胞冷藏平台)
5-MethyltryptaMine hydrochloride
Ethyl 3-pyridyloxyacetate, 98%
Phenylglyoxylic acid, 98%
Ethyl α-hydroxyisobutyrate
4-Chloro-1-naphthol (4-CN)
cos1细胞系(非洲绿猴肾细胞冷藏平台)
GOS-3细胞系(人胶质瘤细胞冷藏平台)
A498细胞系(人肾癌细胞冷藏平台)
PFSK-1细胞系(人恶性胚瘤细胞冷藏平台)
DiFi细胞系(人结直肠癌细胞冷藏平台)
mRTEC细胞系(小鼠肾小管上皮细胞冷藏平台)
2-Methylindazole-4-boronic acid
Ethynylcyclopropane, 98%
1,3-Thiazol-2-ylMethanol, 97%
Indigotrisulfonic Acid PotassiuM Salt
cis-1,2-CyclohexanediMethanol
SP20细胞系(小鼠瘤细胞冷藏平台)
NCI-H650[H650]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
NCI-H1385细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
BALB/3T3clone A31细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台)
MFC细胞系(小鼠前胃癌细胞冷藏平台)
RPMI6666细胞系(人何杰金淋巴瘤细胞冷藏平台)
NCI-H2141细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
ER-30细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
SNU-216细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
RN-c细胞系(大鼠皮层神经元细胞冷藏平台)
SW1463[SW 1463,SW-1463]细胞系(人直肠腺癌细胞冷藏平台)
HuT 78细胞系(人T淋巴细胞冷藏平台)
HSAS2细胞系(人皮肤成纤维细胞冷藏平台)
hEM1细胞系(人子宫异位内膜上皮细胞冷藏平台)
Bv-2细胞系(小鼠小胶质瘤细胞冷藏平台)
HMC细胞系(人肾小球系膜细胞冷藏平台)
HUMSC细胞系(人脐带间充质干细胞冷藏平台)
hydralazine
(3aR,7aS)-octahydro-1H-isoindole hydrochloride (1:1)
(±)-2,6-Diamino-4,5,6,7-tetrahydrobenzothiazole
AGT ELISA Kit
RMD9细胞系(小鼠胚胎细胞冷藏平台)
NCI-H1395[H1395]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
HFT-8810细胞系(人儿胸腺细胞冷藏平台)
L-M(TK-)[LM(tk-),LMTK-]细胞系(小鼠胸腺激酶缺陷细胞冷藏平台)
INS-1细胞系(大鼠胰岛细胞冷藏平台)
IODOCYCLOHEXANE
3-Fluorophthalic anhydride
Lithium 2-ethylhexanoate, min.98%
L-Ornithine Dihydrochloride
DL-3-(1-Methyl-1-ethenyl)-6-oxoheptanenitrile, 98%
PAXC-011细胞系(人源癌细胞冷藏平台)
LS174T[LS174T]细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台)
SEM细胞系(人前B淋巴白血病细胞冷藏平台)
Tca-8113[Tca8113]细胞系(人舌鳞癌细胞冷藏平台)
293 Ad5细胞系(人原胚肾转化细胞冷藏平台)
QG-56细胞系(人肺扁平上皮癌细胞冷藏平台)
MOLM-13细胞系(人急性髓系白血病细胞冷藏平台)
Mouse interferon-inducible protein 16,IFI16/p16 ELISA Kit
FABP ELISA Kit
Human CAPN5 ELISA Kit
Renin ELISA Kit
Rat PIIINP (N-Terminal Procollagen Ⅲ Propeptide) ELISA Kit
Aβ1-40 ELISA Kit
Human FGFR4 ELISA Kit
Human TMSβ4 (Thymosin Beta 4) ELISA Kit
HMEC细胞系(人乳腺上皮细胞冷藏平台)
RMD6细胞系(小鼠胚胎细胞冷藏平台)
Hep-3B2.1-7细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
Hth74细胞系(人未分化甲状腺癌细胞冷藏平台)
SNU-449细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
TMD8细胞系(人弥漫大B淋巴瘤细胞冷藏平台)
SW1116细胞系(人结肠腺癌细胞冷藏平台)
HepG2细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
SK-MEL-3细胞系(人恶性黑色素瘤细胞冷藏平台)
AAV-293细胞系(人胚肾细胞冷藏平台)
5-bromo-2,3-dichloropyridine
Ethyl 4-methyl-5-imidazolecarboxylate
Isocetyl stearate
Swine major histocompatibility complexⅢ,MHCⅢ/SLAⅢ ELISA Kit
UMR-106细胞系(大鼠骨肉瘤细胞冷藏平台)
HME2细胞系(人黑色素瘤细胞冷藏平台)
Neuro-2aN2a细胞系(小鼠脑神经瘤细胞冷藏平台)
HHSEC细胞系(人肝窦内皮细胞冷藏平台)
SEG1细胞系(人食管腺癌细胞冷藏平台)
1-Acetyl-1H-indole-2,3-dione
4-(Pyridin-4-yloxy)benzenesulphonyl chloride hydrochloride
4-Nitrophenyl β-L-fucopyranoside ,98%
4-Bromophenyl chloroformate, 95+%
4-(1-pyrrolidinylcarbonyl)-2-pyridinamine(SALTDATA: FREE)
HEL-1细胞系(人胚肺二倍体细胞冷藏平台)
6T-CEM细胞系(人T淋巴白血病细胞冷藏平台)
WI-38[WI38]细胞系(人胚肺成纤维细胞冷藏平台)
KYSE180细胞系(人食道癌肿瘤细胞冷藏平台)
IPI-2I细胞系(猪回肠上皮细胞冷藏平台)
L-cell细胞系(小鼠皮下结缔组织细胞冷藏平台)
HuTu 80细胞系(人十二指肠腺癌细胞冷藏平台)
C1q ELISA Kit
Human Histamine,HIS ELISA Kit
Human glutathione S-transferases,GSTs ELISA Kit
FT4 ELISA Kit
IP10 ELISA Kit
HJV ELISA Kit
Human cytosolic phospholipase A2,cPLA2 ELISA Kit
Human CCNA ELISA Kit
ME-180细胞系(人子宫颈表皮癌细胞冷藏平台)
CEC细胞系(大鼠脉络膜血管内皮细胞冷藏平台)
RPMI 8226细胞系(人多发性瘤细胞冷藏平台)
H3255细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
HSC-T6细胞系(大鼠肝星状细胞冷藏平台)
DAN-G细胞系(人癌细胞冷藏平台)
C8-D1A细胞系(小鼠小脑星形细胞冷藏平台)
2-Chlorobenzenesulfonyl chloride
6-Methyl-5-hepten-2-one
3,5-DiaMino-2,4,6-triMethylbenzenesulfonic Acid
8-Fluoro-4-hydroxy-2-Methylquinoline
3-(tert-Butyl)-1H-pyrazol-5-aMine, 97%
751-NA细胞系(人神经瘤细胞冷藏平台)
NCI-H929细胞系(人瘤细胞冷藏平台)
L-929细胞系(小鼠结缔组织细胞冷藏平台)
HEK293A细胞系(人胚肾细胞冷藏平台)
SUSM-1细胞系(人肺成纤维细胞冷藏平台)
BAr-T细胞系(人食管上皮细胞冷藏平台)
MG-63细胞系(人成骨肉瘤细胞冷藏平台)
L-a-Lecithin distearoyl
Chlorobenzofurazan
Butyl glycidyl ether
DL-Octopamine hydrochloride
(RS)-AMPA
HFF细胞系(人包皮成纤维细胞冷藏平台)
JEG-3细胞系(人绒毛膜癌细胞冷藏平台)
DU4475细胞系(人乳腺上皮细胞冷藏平台)
CT26WT细胞系(小鼠结肠癌细胞冷藏平台)
GLAG-66细胞系(人乳头状甲状腺癌细胞冷藏平台)
HCCLM3细胞系(人高转移肝癌细胞冷藏平台)
AAV293细胞系(人胚肾细胞冷藏平台)
CBRH 7919细胞系(大鼠肝癌细胞冷藏平台)
THLE-2细胞系(人肝永生化细胞冷藏平台)
Ealy926细胞系(人肠系膜下腔动脉血管内皮细胞冷藏平台)
H226细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
Ethyl 3-Hydroxybenzoate
3,5-Difluoro-2-Methoxypyridine, 97%
Ninhydrin, 99%
4-Androsten-11β-ol-3,17-dione
Bradykinin triacetate salt
BE(2)-M17细胞系(人神经母细胞冷藏平台)
SW 1271细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台)
MHCC97H细胞系(人高转移性肝癌细胞冷藏平台)
NOMO-1细胞系(人白血病细胞冷藏平台)
NCM460细胞系(人正常结肠上皮细胞冷藏平台)
MCF7B细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
2-Chloro-4-fluoro-5-(Methoxycarbonyl)phenylboronic acid
beta-Cyclodextrin hydrate, 99%
4-BroMo-2-chloro-6-Methylphenol, 97%
Piperonyl Isobutyrate
2-(TrifluoroMethyl)benzyl Chloride
SNU-886细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
BEP2D细胞系(人永生化支气管上皮细胞冷藏平台)
NCI-H1522[H1522]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
SK-MES-1细胞系(人肺鳞癌细胞冷藏平台)
WIL2-S细胞系(人B淋巴细胞冷藏平台)
NCI-H1993细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台)
HCC1428细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
SNU-869细胞系(人胆管癌细胞冷藏平台)
OVCA432细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台)
BSMSCs细胞系(牛骨骼肌卫星细胞冷藏平台)
U251细胞系(人神经胶质细胞冷藏平台)
HOPC-os细胞系(人少突胶质前体细胞冷藏平台)
293FT细胞系(人胚肾细胞冷藏平台)
NCI-H2052细胞系(人恶性胸膜间皮瘤细胞冷藏平台)
GBC-SD细胞系(人胆囊癌细胞冷藏平台)
MADB106细胞系(大鼠乳腺癌细胞冷藏平台)
AML12细胞系(小鼠肝细胞冷藏平台)
2,9-dibutyl-Decanedioic acid,ammonium salt
Anhydrotetracycline hydrochloride
4-Nitrophenylethylamine hydrobromide
Sil-7R/cd127 ELISA Kit
CNE1细胞系(人鼻咽癌细胞冷藏平台)
SNU-869细胞系(人胆管癌细胞冷藏平台)
MDCK细胞系(狗肾细胞冷藏平台)
Lu-165细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台)
SNU-182细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
Methyl 2-(2-fluorophenyl)acetate
Heptafluorobutyric Acid [Sequenation Reagent]
1H,1H,2H-Perfluorocyclopentane
Ethyl Phenyl Sulfide
5-[4-(tert-Butyl)phenyl]-1H-1,2,4-triazole-3-thiol
H4-II E细胞系(大鼠肝癌细胞冷藏平台)
H-4-Ⅱ-E细胞系(大鼠肝癌细胞冷藏平台)
HIBEpiC细胞系(人肝内胆管上皮细胞冷藏平台)
NCI-H711[H711]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
Kert-3细胞系(小鼠肾癌细胞冷藏平台)
293A细胞系(人胚肾细胞冷藏平台)
HelaS3[HeLaS3]细胞系(人宫颈癌细胞冷藏平台)
Mouse α1-Acid glycoprotein,α1-AGP ELISA Kit
Human REG1β ELISA Kit
Human non-neuronal enolase,NNE ELISA Kit
HbCO ELISA Kit
C-MYC ELISA Kit
PRL/LTH ELISA Kit
Human FOXC2 (Forkhead Box Protein C2) ELISA Kit
Human PDGFA (Platelet Derived Growth Factor Subunit A ) ELISA Kit
CCD-1112sk细胞系(人包皮成纤维细胞冷藏平台)
Hs68细胞系(人男性正常龟头细胞冷藏平台)
CNE细胞系(人鼻咽癌细胞冷藏平台)
SK-N-BE细胞系(人神经母细胞冷藏平台)