SHEP1细胞：人神经母细胞瘤细胞系 更多技术指导

SHEP1细胞：人神经母细胞瘤细胞系 更多技术指导
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
造成实验室细胞污染常见情况总结：细胞培养中Z常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染，大多数较难处理。那么，哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢？我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】1)为节省时间，有人已经用超净台四个多小时，不开紫外灭菌30min,酒精擦拭后直接开始试验；2)器材或者溶液很久没用，未检测是否污染而直接使用；离心管多次使用，枪头为了方便交叉使用；3)超净台不点酒精灯；点了酒精灯放在右上角，而你在左下角做试验；4)不带手套，徒手操作；5)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋，未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具，如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需121°C高压灭菌20分钟后37％烤干备用)。超净台和桌面，东西太多太乱：超净台不是储物箱，什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台！这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面，切忌东西堆积如山，不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞！一不小心“飘”进你的细胞培养板里，细胞就会养的不好，啥时候死了都不知道！【培养箱太久没清洁】细胞污染了，并非直接扔了培养皿就不管了，首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染，如果有而且好几个板子都有类似的污染块，那很可能是培养箱中的水或者空气污染了，得给培养箱做个大扫除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水没了要记得加，还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂，难管理】在传代细胞这种卫生要求高，人多了，不确定因素多了，难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室，实验服当风衣穿，不扣纽扣，不戴鞋套，就容易造成细胞污染；超净台做实验时，喜欢说话聊着做试验，要是还不带口罩，里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢！
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细胞生长特性：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞形态特性：详见细胞说明书
【细胞培养中细菌、霉菌的污染情况总结】细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在高压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！可在培养液中加相应的抗生素处理；霉菌：培养液是清亮的，倒置显微镜下无杂质，37度孵箱培养2-3天，仍清亮，但出现絮状杂质，镜下可见呈细丝状的团状漂浮物，可看到明显的菌丝，细胞仍可生长，但时间长之后，细胞的活力状态变差，用硫酸铜溶液擦拭CO2孵箱内，再把水盘里也加上饱和量的硫酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒磷酸氢二钠高盐液体,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后，可把所有细胞暂时转移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱内一个小时，使其蒸汽弥漫。待的气味消散后，再移入细胞。孵箱应定期清洁(2月左右)，尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是：用84液擦洗－清水擦洗－75%酒精擦洗－紫外灯照。预防霉菌污染，可在培养基里加3u/ml的两性霉素或制霉菌素或D或双抗；但细胞一旦污染，很难挽救，制霉菌素或D或双抗都于事无补，建议舍弃该污染细胞，将环境彻底消毒，如果所有细胞都污染，可能是系统污染，检查一下培养基和器材，如果只是个别污染，可能是操作问题，就要注意操作。
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
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细胞背景资料：神经母细胞瘤；女性
养科研细胞是生物医学研究的基本功。有三个小经验可以和大家分享一下：1)不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子，觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑？知道为什么吗？烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸氢跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候，炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后，空气变冷，压力骤降，培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳，释放出来。培养基中的碳酸少了，当然会变碱。如果不烧瓶口的话，你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。(当然多多少少还是会有一点越用越碱，因为室温还是比冰箱内的温度高)，其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下，你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话，这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌，除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来美国以后发现这里更彻底，超净台内根本就不点酒精灯；2)不要频繁看细胞。对于初学者而言，养细胞就像养孩子一样，有空就要去看看。细胞越是养不好，就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处，特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后，密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围，形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞，培养瓶这么一晃，把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞，细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管，细胞疯长；3)不要怕消化。在传代的时候，初学者往往生怕细胞消化过度，早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯，吹得满瓶子都是气泡。在我看来，用力吹打对细胞的损伤比消化更大。我师兄在做血管平滑肌原代的时候，37度消化过夜，细胞也没事。我一般是等细胞完全变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有，动作要轻柔，尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大，对细胞的伤害也是很大的。
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细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。

VA-ES-BJ细胞系(人上皮样肉瘤细胞冷藏平台）
HUVEC细胞系(人脐静脉内皮细胞冷藏平台）
EB-3[EB3]细胞系(人淋巴样Burkitt淋巴瘤细胞冷藏平台）
4-AMino-2-nitrophenol
4-Chlorophenyl isocyanate
Glycine Sulfate
Benzo[b]thiophen-3-ylaMine, HCl
SodiuM hexanoate, 99%
Lec1细胞系(仓鼠卵巢细胞冷藏平台）
CCD-112CoN细胞系(人结肠成纤维细胞冷藏平台）
BT-20细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台）
HUVSMC细胞系(人脐静脉平滑肌细胞冷藏平台）
Myla 2059细胞系(人皮肤T淋巴细胞冷藏平台）
Myla 2059细胞系(人皮肤T淋巴细胞冷藏平台）
NCI-H2107[H2107]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
3-Ethynylpyridine
Benzo-15-crown-5-ether
2,3-dihydro-5-hydroxyindol-2-one
pebulate
1,3-DIETHYL-2-THIOBARBITURIC ACID
UM-UC-1细胞系(人膀胱移行癌细胞冷藏平台）
Mc57G细胞系(小鼠纤维肉瘤细胞冷藏平台）
DOK细胞系(人口腔黏膜癌前病变细胞冷藏平台）
ISK细胞系(人子宫内膜癌细胞冷藏平台）
HCE1细胞系(人宫颈癌细胞冷藏平台）
A-498细胞系(人肾癌细胞冷藏平台）
LOU-NH91细胞系(人肺癌鳞癌细胞冷藏平台）
NE-4C细胞系(小鼠神经干细胞冷藏平台）
MDA-MB-468细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台）
U2932细胞系(人弥漫大B淋巴细胞冷藏平台）
SK-MES-1细胞系(人肺鳞癌细胞冷藏平台）
SodiuM BroMate
Benzyl benzoate, 99+%
Nalidixic acid, 99%
5,6,7-TriMethoxyflavone, 97%
2-Chloropropane
M-NFS-60细胞系(小鼠髓性白血病细胞冷藏平台）
H1563细胞系(人胚肺细胞冷藏平台）
HSC-3细胞系(人口腔鳞癌细胞冷藏平台）
MGH-u3细胞系(人膀胱癌细胞冷藏平台）
Fox-NY细胞系(小鼠瘤细胞冷藏平台）
GH3细胞系(大鼠垂体瘤细胞冷藏平台）
2-Fluoro-3-Methylphenylboronic acid, pinacol ester
Diethylstilbestrol, 99%
Azure A Eosinate, pure
4-Piperidinopiperidine
Butyl 2-Ethylhexanoate
WM239A细胞系(人黑色素瘤细胞冷藏平台）
Mo7e细胞系(人巨细胞冷藏平台）
THLE-2细胞系(人肝永生化细胞冷藏平台）
HBVAF细胞系(人脑血管外膜成纤维细胞冷藏平台）
HPDE6-C7细胞系(人正常导管上皮细胞冷藏平台）
CRL-1548细胞系(大鼠肝癌细胞冷藏平台）
preB-697细胞系(人前B淋巴细胞冷藏平台）
THC8307细胞系(人高分化结肠腺癌细胞冷藏平台）
PAN-1细胞系(人导管上皮癌细胞冷藏平台）
HFF-1细胞系(人包皮成纤维细胞冷藏平台）
NCI-H295R[H295R]细胞系(人肾上腺皮质腺癌细胞冷藏平台）
IR983F细胞系(大鼠瘤细胞冷藏平台）
NIH929细胞系(小鼠成纤维细胞冷藏平台）
NCI-H711[H711]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
HRMC细胞系(人肾小球系膜细胞冷藏平台）
GLC-15细胞系(人肺癌腺细胞冷藏平台）
MGC80-3细胞系(人胃癌细胞冷藏平台）
2,3-Pyrazinedimethanol
[R-(R*,S*)]-[[2-methyl-1-(1-oxopropoxy)propoxy]-(4-phenylbutyl)phosphinyl] acetic acid, (-)-cinchonidine (1:1) salt
L-isoleucine allyl ester*P-toluenesulfonate
MMP-9 ELISA Kit
P3X63Ag8细胞系(小鼠瘤细胞冷藏平台）
AR42J细胞系(大鼠外分泌腺肿瘤细胞冷藏平台）
D283 Med细胞系(人脑髓母细胞冷藏平台）
NCI-H2009细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台）
KU812细胞系(人外周血嗜碱性白血病细胞冷藏平台）
Ethyl 2-(hydroxyimino)-3-oxobutanoate
2-Iodo-5-methylbenzoic acid
2-pyridin-3-ylpyrimidine-5-carboxylic acid(SALTDATA: FREE)
4-Propylpiperidine
4-PHENOXYPHENYLACETIC ACID
HECV细胞系(人血管内皮细胞冷藏平台）
SUP-T1细胞系(人T淋巴母细胞冷藏平台）
A-431细胞系(人表皮癌细胞冷藏平台）
LS513细胞系(人盲肠癌细胞冷藏平台）
CMT-167细胞系(小鼠肺癌细胞冷藏平台）
PC12细胞系(大鼠肾上腺嗜铬细胞冷藏平台）
THC-8307细胞系(人高分化结肠腺癌细胞冷藏平台）
GP6 ELISA Kit
Human Arresten ELISA Kit
Human Estradiol，E2 ELISA Kit
Eotaxin 1 ELISA Kit
CCK ELISA Kit
1BACE1 ELISA Kit
Human ACTN1 ELISA Kit
Human Apo-C2 ELISA Kit
HRGEC细胞系(人肾小球内皮细胞冷藏平台）
HCC 94[HCC941122]细胞系(人子宫鳞癌细胞冷藏平台）
COLO 829细胞系(人黑色素瘤细胞冷藏平台）
WB-F344细胞系(大鼠肝上皮样细胞冷藏平台）
FRO细胞系(人未分化甲状腺癌细胞冷藏平台）
ED-25细胞系(人肝静脉内皮细胞冷藏平台）
HMrSV5细胞系(人腹膜间皮细胞冷藏平台）
M2e细胞系(人喉癌细胞冷藏平台）
MC-3T3-E1细胞系(小鼠胚胎成骨细胞冷藏平台）
NCI-H1954细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
Pitavastatin Ethyl Ester
(2Z)-(hydroxyimino)(4-methoxyphenyl)ethanenitrile
2-(3-Methoxyphenyl)oxirane
GLUT1 ELISA Kit
TF-1a细胞系(人红细胞冷藏平台）
EOMA细胞系(小鼠血管内皮瘤细胞冷藏平台）
NCI-H441[H441]细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台）
OMC-1细胞系(人眼脉络膜黑色素瘤细胞冷藏平台）
CNE-2Z细胞系(人鼻咽癌细胞冷藏平台）
3,5-Dichloro-2,4,6-trifluorobenzoic acid
5-Bromo-furan-2-carboxylic acid
L-Valine, N-CBZ protected
1-Chloro-1,1-dibromo-2,2,2-trifluoroethane (FC-113aB2) 97%
2-Hydroxy-5-methyl-3-nitropyridine
U-2OS细胞系(人胫骨肉瘤细胞冷藏平台）
NCI-H2085[H2085]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
Anglne细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台）
NK-92细胞系(人恶性非霍奇金淋巴瘤细胞冷藏平台）
MKN28细胞系(人胃癌细胞冷藏平台）
HUP-T4细胞系(人癌细胞冷藏平台）
HCC38细胞系(人乳腺导管癌细胞冷藏平台）
CD4 ELISA Kit
PL ELISA Kit
Human API5 ELISA Kit
Fish C3 ELISA Kit
IL-2sR ELISA Kit
SAA ELISA Kit
Human Aβ1-42 ELISA Kit
Human OCA2 ELISA Kit
769-P细胞系(人肾癌细胞冷藏平台）
Mino细胞系(人淋巴瘤细胞冷藏平台）
MDA-MB-231细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台）
SKM-1细胞系(人增生异常综合征细胞冷藏平台）
EMT6细胞系(小鼠乳腺癌细胞冷藏平台）
SK-OV-3[SKOV-3,SKOV3]细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台）
Calu-6细胞系(人退行性癌细胞冷藏平台）
4-Aminoveratrole
4-(Pyrid-2-yloxy)benzoyl chloride
(2-Butoxyethoxy)acetic Acid
2-(4-AMino-1h-pyrazol-1-yl)ethanol
SalicylaMide, 99%
TE-6细胞系(人食管癌细胞冷藏平台）
GES-1细胞系(人胃粘膜细胞冷藏平台）
Neuro-2a/N2a细胞系(小鼠脑神经瘤细胞冷藏平台）
CHO/dhFr细胞系(仓鼠卵巢细胞冷藏平台）
TF-1a细胞系(人红细胞冷藏平台）
SW 1088细胞系(人脑星型胶质瘤细胞冷藏平台）
WEHI-3B细胞系(小鼠髓样单核白血病细胞冷藏平台）
3-Amino-5-methoxybenzotrifluoride
(R)-2-methylsuccinic acid
1-(3,4-dimethoxyphenyl)-2-phenylethan-1-one
4-Amino-3-phenylbutyric acid
Cyclohexanecarboxaldehyde
SNB19细胞系(人胶质瘤细胞冷藏平台）
TYK-nu细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台）
NCI-H1793细胞系(人肺癌腺癌细胞冷藏平台）
HNE2细胞系(人鼻咽癌细胞冷藏平台）
OVCAR4细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台）
HFL-1细胞系(人上肺上皮细胞冷藏平台）
HFLS-OA细胞系(人滑膜关节炎成纤维细胞冷藏平台）
hRMECs细胞系(人视网膜微血管内皮细胞冷藏平台）
MEC-1细胞系(人粘液表皮样癌细胞冷藏平台）
CT-26.WT细胞系(小鼠大肠癌细胞冷藏平台）
Hela S3细胞系(人宫颈癌细胞冷藏平台）
n-Propyl forMate, 97%
2-Methyl-3,5-dinitrobenzoic acid, 98%
Zinc acetate dihydrate, 97+%
GuM guaiac
(R)-(+)-2,2′-Bis(di-p-tolylphosphino)-1,1′-binaphthyl
HFL-1细胞系(人上肺上皮细胞冷藏平台）
A498细胞系(人肾癌细胞冷藏平台）
NCI-H2141细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
KYSE520细胞系(人食管癌细胞冷藏平台）
TYK-nu细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台）
HDF-a细胞系(人成纤维细胞冷藏平台）
Glycyl-L-phenylalanine
4-AMino-2-piperidinone, HCl
3-Phenoxypropionic acid, 99%
Sodium octanoate
17alpha-Hydroxyprogesterone Caproate
A-204细胞系(人横纹肌肉瘤细胞冷藏平台）
COS-7细胞系(非洲绿猴SV40转化的肾细胞冷藏平台）
TE10细胞系(人食道癌肿瘤细胞冷藏平台）
MHCC97-H(MHCC97H)细胞系(人高转移性肝癌细胞冷藏平台）
MHCC97-H(MHCC97H)细胞系(人高转移性肝癌细胞冷藏平台）
HMrSV5细胞系(人腹膜间皮细胞冷藏平台）
C33A细胞系(人宫颈癌细胞冷藏平台）
NCI-H1341[H1341]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
SW1417[SW-1417]细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台）
MS1细胞系(小鼠胰岛内皮细胞冷藏平台）
L5178-R细胞系(小鼠淋巴瘤细胞冷藏平台）
NCI-H1563[H1563]细胞系(人胚肺细胞冷藏平台）
SNU-C1细胞系(人结肠癌细胞冷藏平台）
CRFK细胞系(猫肾细胞冷藏平台）
CMT-93细胞系(小鼠直肠多倍体癌细胞冷藏平台）
Romas细胞系(人淋巴瘤细胞冷藏平台）
CW-2细胞系(人结肠腺癌细胞冷藏平台）
6-Methoxy-1-indanone
DL-Asparagine monohydrate
N,N',N'',N'''-tetramethylethylenediylidenetetraamine
AFA ELISA Kit
A-204[A204]细胞系(人横纹肌肉瘤细胞冷藏平台）
HHDPC细胞系(人毛乳头细胞冷藏平台）
Nalm-6细胞系(人前B急性淋巴细胞冷藏平台）
HNE-2细胞系(人鼻咽癌细胞冷藏平台）
EAC细胞系(艾氏腹水癌细胞冷藏平台）
Lawessons reagent
4-Methyl-1-cyclohexanemethanol (cis- and trans- mixture)
Lupenone
2-Amino-4,6-dichloropyridine
D-Lactose ,98%
MPC-11细胞系(小鼠浆细胞冷藏平台）
HSkMC细胞系(人骨骼肌细胞冷藏平台）
TEC细胞系(人胸腺上皮细胞冷藏平台）
HHSEC细胞系(人肝窦内皮细胞冷藏平台）
CF-1细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台）
HCC-1395细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台）
SW 1271细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台）
17-KS ELISA Kit
Human NOX1 (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 1) ELISA Kit
Human PDIA6 ELISA Kit
HP-lgM ELISA Kit
MMP-9/Gelatinase B ELISA Kit
HO2 ELISA Kit
Human GAL3ST4 ELISA Kit
APAF1 ELISA Kit
Hs695T细胞系(人恶性黑色素瘤细胞冷藏平台）
M059K细胞系(人脑恶性胶质母细胞冷藏平台）
SK-BR-3细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台）
Detroit562细胞系(人咽头癌胸水转移细胞冷藏平台）