甘油酸激酶试剂盒说明书_详细资料

产品信息

货号： BJ-E1155 供应商：上海邦景检测限：用于测定血清、血浆、组织、尿液、及相关液体等样本检测方法：酶联免疫吸附法应用：酶联免疫吸附法适应物种：详见说明书标记物：详见说明书数量： 26 样本： GLYCTK ELISA Kit 规格： 48T96T

甘油酸激酶试剂盒说明书注意事项：
1．操作严格按照说明书进行，本试剂不同批号组分不得混用。
2．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
3．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
4．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
5．底物请避光保存。
6．试验结果判定必须以酶标仪读数为准，使用双波长检测时，参考波长为 630nm
7．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为 2M 的硫酸，使用时必须注意安全。
产品名称: 甘油酸激酶试剂盒说明书
英文名称: GLYCTK ELISA Kit
英文缩写：GLYCTK
甘油酸激酶试剂盒说明书实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的待测物质抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入待测物质，再与HRP标记的待测物质抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成的黄色。颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中待测物质浓度。
甘油酸激酶试剂盒说明书试剂配制
1、酶联板（Assay plate ）：一块（96孔或者48孔）。
2、标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3、样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液（HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
检测原理：本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗人EPCR单克隆抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体，经过孵育，样本中存在的EPCR与固相抗体和检测抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(streptavidin-HRP)。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中EPCR的浓度成正比。加入终止液终止反应，在 450 nm 波长测定吸光度值。实验方法：双抗夹心ELISA（定量）
样本类型：血清、血浆、细胞上清、组织等相关生物样本。
规格型式：96孔板、48孔板，可拆卸
保存条件：试剂盒未拆开，2-8℃保存。已拆开，标准品-20℃保存，其它2-8℃℃保存。
有效期：6个月。
检测范围：0.312-20ng/ml。
灵敏度：10.0pg/mL。敏感性/检测浓度计算方式：敏感性等于20个空白对照孔的平均O.D.值加上2个标准差后对应的浓度。样品的O.D.读数只有在高过敏感性指标的时候才具有统计学显著性。变异系数：板内变异系数<10%,板间变异系数<15%。
回收率：三组已知的高、中、低浓度样品，进行五次回收率评估，回收率在85%-115%之间。
甘油酸激酶试剂盒说明书操作步骤：
1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液 40μl，然后再加待测样品 10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，
3.温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用。
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重复 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂 50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同 3。
8.洗涤：操作同 5。
9.显色：每孔先加入显色剂 A50μl，再加入显色剂 B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10 分钟.
10.终止：每孔加终止液 50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。
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小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B1
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PTPN2 Others Mouse 小鼠 PTPN2 / TC-PTP (aa 2-314) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
T-47D细胞，管癌细胞人食管癌细胞,EC871214细胞大鼠骨肉瘤细胞;UMR-106
人肺成纤维细胞cDNAHPF cDNA
CDH2 Others Human 人 Cadherin-2 / CD325 / CDH2 / NCAD 人细胞裂解液 (阳性对照)
人肾癌Wilms细胞;G1
TNFSF4 Others Cynomolgus 食蟹猴 OX-L / TNFSF4 人细胞裂解液 (阳性对照)
CL-0441SK-N-BE(2) (人神经母细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×2
HLF细胞，胚肺细胞人前列腺上皮细胞,RWPE1细胞人胚胎肌肉组织来源细胞;CCC-HSM-2
猕猴肺细胞;MML2
TNFRSF21 Others Human 人 DR6 / TNFRSF21 人细胞裂解液 (阳性对照)
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人肺成纤维细胞cDNAHPF cDNA
CDH2 Others Human 人 Cadherin-2 / CD325 / CDH2 / NCAD 人细胞裂解液 (阳性对照)
甘油酸激酶试剂盒说明书需用户自己提供的实验器材和试剂：
1. 96孔读板仪器。
2. 自动洗板机.
3. 移液器和枪头。建议使用多通道移液器/排枪。
4. Eppendorf 管。
5. 额外洗板缓冲液 (neutral PBS 或 TBS。试剂盒内提供足量。如需额外缓冲液可参考如下配方)。
0.01M TBS: Add 1.2g Tris, 8.5g Nacl; 450μl of purified acetic acid or 700μl of concentrated hydrochloric acid to 1000ml H2O and adjust pH to 7.2-7.6. Finally, adjust the total volume to 1L.0.01M PBS: Add 8.5g sodium chloride, 1.4g Na2HPO4 and 0.2g NaH2PO4 to 1000ml distilled water and adjust pH to 7.2-7.6. Finally, adjust the total volume to 1L.*样品准备的相关试剂也不含在试剂盒中。

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