CNE1 Cell:人鼻咽癌复苏传代细胞系 货号:GD-C6519793
细胞来源:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
产品规格:≥1*10(6)/ml
安全级别:1
以下对初次培养细胞人员来说,是非常好的开门教程:准备室的设备:单蒸馏水蒸馏器、双蒸馏水蒸馏器、酸缸、烤箱、高压锅、储品柜(放置未消毒物品)、储品柜(放置消毒过的物品)、包装台;配液室的设备:扭力天平和电子天平(称量药品)、PH计(测量培养用液PH值)、磁力搅拌器(配置溶液室搅拌溶液);培养室的设备:液氮罐、储品柜(存放杂物)、日光灯和紫外灯、空气净化器系统、低温冰箱(-80℃)、空调、二氧化碳缸瓶、边台(书写实验记录);必须放在无菌间的设备:离心机(收集细胞)、超净工作台、倒置显微镜、CO2孵箱(孵育培养物)、水浴锅、三氧消毒杀菌机、4℃冰箱(放置serum和培养用液)。无菌室的灭菌:定期打扫无菌室:每周打扫一次,先用自来水拖地、擦桌子、超净工作台等,然后用3‰来苏尔或者新洁尔灭或者0.5%过氧乙酸擦拭;CO2孵箱(培养箱)灭菌:先用3‰新洁尔灭擦拭,然后用75%酒精擦拭或者0.5%过氧乙酸,再用紫外灯照射;实验前灭菌:打开紫外灯、三氧杀菌机、空气净化器系统各20-30分钟;实验后灭菌:用75%酒精(3‰新洁尔灭)擦拭超净台、边台、倒置显微镜的载物台;实验人员的无菌准备:肥皂洗手、穿好隔离衣、带好隔离帽、口罩、放好拖鞋、用75%酒精棉球擦净双手。
细胞培养相关培养基选购基本指南:如何选择培养基:经常听到有人问,这种细胞该用哪一种培养基呢?其实这个问题的答案可以很简单,也可以好复杂。为什么这样说呢?如果这种细胞是购自一些细胞库,那很简单,问供应商就行了。或者找到相关的文献,作为参考。培养基这么多种,要选择起来也是个头疼的事情。除了部分培养基是公开配方的,或者是专门针对某一种细胞的,如昆虫基本培养基和神经祖细胞基础培养基, 但是大部分液体培养基都是专利配方的,也就是说其中的成分是保密的。那么你只能是检索文献、让供应商推荐,然后用自己的细胞做几次传代培养来选出Z合适的培养基。毕竟实践出真知。怎么样才可以买到好的培养基产品:首先,当然需要找对品Pai,其次是找对自己所在区域的品Pai代理商,针对自己所养的细胞,咨询供应商该选用哪种的培养基进行培养,这样就可以买到好的而且适合自己的培养基产品。关于培养基品Pai,目前公司所知道的高校实验室有些同学在用Corning系列培养产品,也有同学在用Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等品Pai的产品。培养基的选择和使用;MEM:成分简单,贴壁细胞;DMEM:分高糖型和低糖型;IDMEM:适合细胞密度低,生长困难的细胞。如杂交细胞的筛选,DNA转染后转化细胞的筛选培养;RPM1640:应用Z广泛的培养基之一。悬浮细胞培养,主要针对淋巴细胞,也适合其他细胞;199、109培养基:成分齐全,培养效果较好;F10培养基:适合小鼠及人类二倍体细胞培养;F12培养基:适合单细胞分离培养及无血清培养;McCoy’s培养基:特别适合原代细胞及较难培养细胞的生长。
物种来源:人源或鼠源等
细胞形态:上皮细胞样/成纤维细胞样/淋巴母细胞样等
养了几年细胞,说一点自己培养细胞方面的看法:1)培养细胞前,可以看看细胞特点说明书,包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等;2)不同细胞生长周期不同,有的生长很快,比如说MDA-MB-231,传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了,有的又是特别慢,等的人心焦,BT474就是,传代是一分二,复苏起始的时候两周多才能长满,所以就要在培养细胞的过程中多多摸索了;3)对于娇弱的细胞,就得细心呵护了,胰酶消化不能过久,吹得时候要轻柔,离心时候也要注意转速和时间,每天都要去看一下细胞,肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况;4)冻存细胞复苏后第二天Z好更换一次培养基;5)培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次;6)养细胞的教训:不能偷懒!细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋。1)不管买的细胞、惠赠的细胞,刚拿到手赶紧做两件事:检测是否有支原体污染; 迅速扩增冻存;2)发现有污染迅速处理掉,特别是当你养了很多种细胞时; 细菌污染,真菌污染很容易发现,支原体污染的话,细胞会长的慢,买个支原体检测的kit定期检测一下;3)传代细胞日常的值日清洁是必须的,此外还要定期熏蒸;4)细胞的传代一定要规律,保持相同的confluency和传代时间间隔,不要随心所欲或者拖延;5)注意个人卫生。
细胞特性:贴壁/悬浮等
细胞检测:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等污染物
培养条件:详见细胞说明书
传代方法:建议1:2-1:3传代;两天换液一次(具体详细询问公司细胞培养专家)
β-NADH
4-BroMoanisole
2-BroMo-6-nitrotoluene
trans-2-Hexen-1-ol
Undecanedioic acid
2-(1H-pyrrol-2-ylMethyl)-1H-pyrrole
5-Fluoro-2-methylphenol
Boc-(2S,3aS,7aS)-Octahydro-1H-indole-2-carboxylic acid
Methyl 4-bromo-1-naphthoate 98%
5-amino-2-fluorobenzamide(SALTDATA: FREE)
Nelarabine
4-HYDROXY-6-(TRIFLUOROMETHOXY)-2-(TRIFLUOROMETHYL)QUINOLINE
Methyl hexanoate
4'-Butyl-4-biphenylcarbonitrile
DiethoxyMethane
3,3′-Dichlorobenzidine dihydrochloride
N-Ethyl-p-toluidine
4-(4-ForMyl-3-Methoxy-phenoxy)-butyric acid
Silver iodate, 95%, pure
2-METHYLNAPHTHALENE
Glycyl-DL-aspartic Acid
L-histidine dihydrochloride
diethylene glycol ditosylate
MALTOPENTAOSE
2,3-Cyclopenteno pyridine
4-(METHYLTHIO)THIOPHENOL
HEPARIN CALCIUM
PotassiuM Hydrogen Phosphate Trihydrate
N-(5-Fluoro-2-Methylphenyl)thiourea, 97%
3,5-DiMethylbenzaldehyde, 98+%
2-Hydroxyacetophenone
Citric acid
2-Methylpyridine-5-boronic acid, pinacol ester
N-BOC-L-CYCLOHEXYLGLYCINOL
Di-tert-butyl acetylenedicarboxylate
Hexafluoroacetone trihydrate
(+)-5-Fluoro-2'-deoxyuridine, 99+%
4-Acetylbenzoic acid, 98%
(-)-Di-p-anisoyl-L-tartaric Acid
4,6-O-Benzylidene-D-galactose ,98%
Methyltriphenylphosphonium bromide
2-FLUORO-6-NITROBENZYL BROMIDE
Methyl hexadecanoate
Chrysoidine;Chrysoidine Y;Chrysoidine G;Chrysoidin;Chrysoidine orange;Basic orange 2;2,4-DiaMinoazobenzene hydrochloride;C.I. 11270
N-Methyl-N-(2-thien-2-ylbenzyl)aMine
H-Glu-OtBu.HCl
3-(2-Pyridyl)-5,6-bis(4-sulfophenyl)-1,2,4-triazine DisodiuM Salt Hydrate
[1,2,4]Triazolo[1,5-a]pyridine
4-(IsocyanatoMethyl)tetrahydropyran, 95%
BARIUM HYDROXIDE OCTAHYDRATE
Methyl 2-[4-(BroMoMethyl)phenyl]benzoate
Tungsten(VI) oxide
1,2-Pyrrolidinedicarboxylicacid, 1-(1,1-dimethylethyl) ester
fusicoccin from fusicoccum amygdali
Sodium metaniobate
1-Chlorotetradecane
1,4-DIOXANE-D8
3-Methoxy-2-Methylaniline
2,6-Dichloro-3-Methylaniline
Cholesterol Hexanoate
2-(2,4-Dichlorophenoxy)ethanethioamide
Dimethyl fluoroterephthalate
2-Bromo-3-nitroanisole 99%
HEXAFLUOROISOPROPYL TOSYLATE
Caprylylglycine
Fenoxanil
Diethyl oxalate;Diethyl ethanedioate;Oxalic acid diethyl ester
cis-2-AMino-1-cyclopentanecarboxylic acid
2-(4-AMinophenyl)ethylaMine
EtoMidate
1-(3-Chlorophenyl)cyclopropanecarbonitrile
N-Methyl-N-[(5-Methyl-3-phenylisoxazol-4-yl)Methyl]aMine, 97%
METRIBUZIN
2,6-Dichlorophenylboronic Acid (contains varying aMounts of Anhydride)
p-Bromoethylbenzene
N-ethyl-2-nitroaniline
1,4-diphenyl-3-(phenylammonio)-1H-1,2,4-triazolium
D(+)-Malic acid
Dyn ELISA Kit
C-P ELISA Kit
Human acetylcholine receptor antibody,AChRab ELISA Kit
Human M-AChR M2 (Muscarinic Acetylcholine Receptor M2) ELISA Kit
Monkey α2-M (Alpha-2 Macroglobulin) ELISA Kit
Rat IL-1ra (Interleukin 1 Receptor Antagonist) ELISA Kit
KLK3 ELISA Kit
Human LRP-6 ELISA Kit
Human CHRNβ3 ELISA Kit
16-a OHE-1 ELISA Kit
Ruthenium Skim Milk Agar Medium
Tomato Juice Agar
Acetic Acid
Trans-2-BroMo-1-Indanol
4-Isopropylaniline
SodiuM 2-biphenylate
L-histidine dihydrochloride
2-Ethylthiazole
1-(2-Thienyl)-1-propanone
Cholesteryl benzoate
4-Bromo-2-methylbenzoic acid
SILVER
FireMaster Pht4
4-Chloro-2-Methylphenol, 97%
4,6-Diphenylthieno[3,4-d]-1,3-dioxol-2-one 5,5-dioxide, 97%
3-AMino-1-Boc-piperidine
6-Nitro-2,3-dihydroxyquinoxaline
2,2,6,6-TetraMethyl-4-(Methylsulfonyloxy)-1-piperidinooxy, free radical
3,3,3-Trifluoro-1-propanesulfonyl chloride, 95%
2,5-Difluoronitrobenzene
OCTAFLUORO-4,4'-BIPHENOL
3,3',5-Triiodo-L-thyronine, sodium salt, 95%
2,4-Dichloro-6-(trifluoromethyl)aniline
4,6-Dichloro-1-methyl-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidine
4,4'-Diaminobenzophenone