茄链格孢（番茄早疫病菌）（斜面）

茄链格孢（番茄早疫病菌）（斜面）
资源名称    茄链格孢（番茄早疫病菌）（斜面）
种属    Alternaria solani
形态    菌丝体全部埋生或部分表身生。菌丝无色至褐色。很少形成子座，无刚毛及附属枝。分生孢子梗淡褐色至褐色，单枝或不规则分枝，短或长，弯曲或呈屈膝状。产孢细胞孔出式产孢，合轴式延伸或不再延伸，孢痕明显。分生孢子呈链状或单生，淡褐色至深褐色，形状不一，表面光滑或具微刺，有纵横隔膜，顶端常具喙。菌丝有隔膜和分枝，较老的颜色较深。分生孢子梗直立或稍弯曲，色深而短，单生或丛生，有1-7个隔膜，大小为50-90um ×6-9um.分生孢子自分生抱子梗顶端产生，通常单生，其形状差异很大，倒棍棒形至长椭圆形，颜色为淡金黄色至榄褐色，具长嚎，表面光滑，9-11个横隔膜，0到数个纵隔膜，大小为117-154um ×9.8-15.7um,嚎长等于或长于孢身，有时有分枝，嚎宽2. 5-5um。
分离基物    番茄叶片
提供形式    冻干物
致病类型    致病对象：植物。传播途径：病菌主要以菌丝和分生孢子随病株残体在土壤中越冬。翌年，气温适宜时，产生新的分生孢子，是初次侵染的来源。病斑上的分生抱子主要靠风、雨等传播，通过气孔或伤口侵入。
安全等级    1
模式菌株    no
应用领域    教学科研
培养方法
培养基    综合PDA：马铃薯煮汁1000mL，磷酸二氢钾 3g，硫酸镁 1.5g，葡萄糖 20g，维生素B1 10mg，琼脂 20g，pH自然。
生长条件    25-28℃，好氧。
存储条件    2-8℃。
收到菌株操作：
1、安瓿瓶开封：用浸过75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。
2、菌株恢复培养：用无菌吸管吸取0.3--0.5ml适宜的液体培养基，滴入安瓿管内，轻轻振荡，使冻干菌体溶解呈悬浮状。吸取全部菌体悬浮液，移植于1-2支建议的培养基试管中，并在建议的条件下培养。
3、注意事项：菌种活化前，请将安瓿管保存在6-10℃的环境下，某些菌种经过冷冻干燥保存后，延迟期较长，需要连续两次继代培养才能正常生长
4、复苏后的菌种在传1-2代后使用。
5、暂不启开的安瓿及复苏后需保藏的斜面应于4℃中保藏。
茄链格孢（番茄早疫病菌）（斜面）低温存法
①简单保存法，将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4℃冰箱保存,保存时间不超过1～2个月，若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3～4个月；②液氮超低温保存法，将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中，密封于安瓿管内，然后控制冷却速度，使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物，都可用此法长期保存。
茄链格孢（番茄早疫病菌）（斜面）脱水存法
①沙土保存法，能产孢子的细菌、放线菌及霉菌可采用此法保存,即将沙和土以3:2比例混合，经稀酸处理洗净过筛,装入小试管内,装置高度为1cm;灭菌2～3次，烘干后即可将在斜面培养基上生长良好的孢子，用无菌蒸馏水2～2.5ml制成孢子悬液，吸取少许加入沙土管中，经真空抽干，外观呈松散状态,于4℃冰箱保存，保存期可达5～7年。
② 冷冻干燥法,将孢子悬浮液与保护剂（一般用脱脂牛奶或血清）相混合，放在安瓿管内于-20～-30℃的乙醇浴中速冻。然后，在低温下用真空泵抽干，并用五氧化二磷或干冰使水汽结冻，熔封安瓿管，于低温下保存。保存期可达5～10年之久。
③ 石蜡油封存法，在斜面菌种培养物上,倒上灭菌后的石蜡油，高出斜面1cm，于4℃冰箱或低温干燥处保存，此法不适用于能利用石蜡油作碳源的微生物，保存期为一年以上。
茄链格孢（番茄早疫病菌）（斜面）特别注意事项
l、微生物菌种应保藏于低温、清洁和干燥的地方,室温放置时问过长会导致菌种衰退;
2、菌种操作应在无菌条件下进行,防止杂菌污染:
3、斜面菌种保藏时间通常为1-2个月,应根据菌种状况及时转接;冻干菌种保藏时间通常为5~10年;
4、菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时与我公司联系或更换新的菌种。
使优良菌种的性状保持稳定，人为地创造条件，使菌种的新陈代谢活动处于不活泼状态，即选取优良菌种的休眠体（孢子或芽孢）或富有生命力的悬浮液在低温或脱水状态下保存。