CCRF-CEM [CCRF CEM]人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞【可带STR鉴定】(培养基:1640+10% FBS+1% 双抗)如需CCRF-CEM [CCRF CEM]细胞的详细资料、照片及细胞培养操作指南欢迎联系我们。
发货方式:复苏后发货:我们复苏细胞后发货,货期一周左右,免运费。(气温较好建议复苏后发货)
冻存发货(干冰运输):需增加干冰运费,选择干冰运输的我们发两管细胞,为了保证客户接种可靠性多发一管细胞。
(气温低于0℃须冻存发货)细胞发货采取专业的运输包装,并选择Z快捷的运输方式(顺丰速运或其他空运快递)
本公司细胞引种来源:ATCC、DSMZ、ECACC、JCRB、武大细胞库、上海生化细胞所、ZG科学院典型培养物保藏委员会等
细胞在发货前进行质检:1、细胞存种的活性检测
2、细菌、真菌、霉菌污染物镜检
3、衣原体、支原体检测(荧光法、培养法等)
细胞质量保证及售后:1、 细胞为三代以内,活体。运输过程中细胞出现污染和状态不好,我们完全免费重新发货。
2、 实验过程中若确定是客户问题,客户仅需支付物流和耗材费用,我们可重新发货。其他根据情况灵活处理。
3、 产品使用过程中,华拓生物可提供技术上的指导。
细胞收货处理方法:一、贴壁细胞
1、 接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞 100X,200X 各一张)。
2、用 75%的酒精消毒外包装,在超净工作台内打开外包装。
3、严格遵循无菌操作规范,打开细胞培养瓶。
4、37度平衡1-2小时。
5、用移液管吸取培养基,到50ml离心管中,剩下细胞密度达到80%至90%可以传代,如没有达到添加6ml新鲜培养基继续培养。
6、如果肉眼检查上清有细胞,对50ml上清进行离心收集细胞,如果细胞连片状态,弃掉上清对收集的细胞进行胰酶消化(1ml胰酶37度),接种培养。
二、悬浮细胞
1、接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞 100X,200X 各一张)。
2、用 75%的酒精消毒外包装,在超净工作台内打开外包装。
3、严格遵循无菌操作规范,打开细胞培养瓶。
4、细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(不能直接倾倒)。
5、1000rpm,5min 离心,用吸管小心吸出上清,加入培养基,重悬细胞。
6、将重悬好的细胞转入六孔板或者细胞培养瓶种,加入新鲜培养基,置于 37℃,5%CO2 培养(大部分细胞)。
细胞培养操作:华拓细胞培养操作指南细胞常见问题:细胞培养常见问题分析CCRF-CEM [CCRF CEM]人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞培养步骤:1、吸走用于培养基,加入3-5mL PBS后轻轻晃动培养瓶润洗细胞;
2、吸干净PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,轻轻摇晃培养皿使胰酶浸没细胞表面,培养瓶放37度培养箱消化;(悬浮细胞不需要消化,细胞对于消化比较敏感,消化过度会严重影响细胞状态,导致细胞传代死亡漂浮或者传代后不长。细胞消化到细胞间隙变大但未脱落,可以轻轻吹下时即可终止,禁止消化到细胞完全漂浮。混匀细胞时尽量轻柔,不要吹出大量气泡。)
3、加入6-8ml完全培养基终止消化,轻轻吹下细胞混匀;
4、将混匀的细胞1000rpm(约150g)离心3min,弃上清,再用新鲜培养基重悬37度培养箱继续培养;
5、传代比例: 不同细胞生长速度不一,具体传代比例视细胞生长速度而定,大部分细胞适用1:3-1:4传代,生长较慢的细胞可以1:2传代。
6、细胞冻存:冻存液:92%完全培养基+8%DMSO(可以根据实验室条件自行选择);降温步骤:4度10min,-20度2h,-80过夜后液氮保存。推荐冻存液:92%完全培养基+8%DMSO,也可以根据实验室条件自行选择。