转录因子活性芯片实验外包服务

【嘉美实验】嘉美实验提供转录因子活性芯片技术服务，您只需提供保存完好的标本（组织或细胞），嘉美实验的芯片技术服务人员就可替您完成实验操作与数据分析，向您提供由您所选的任何一种芯片的实验结果，可以为您节省大量的时间与精力。
 
嘉美实验转录因子芯片实验外包服务内容
1、核蛋白抽提
a.  实验对象为细胞样品，每份样品取1×107细胞，PBS清洗细胞，去PBS加1ml BufferA 混合液破碎细胞膜，离心收集细胞核，加150ul Buffer B混合液裂解细胞核，抽提核蛋白并定量。
b.  实验对象为组织样品，取500ug新鲜组织样品或正确保存的组织样品，切成小块放入管中， 加1.5ml BufferA混合液匀浆，离心收集细胞核，加150ul Buffer B混合液裂解细胞核，抽提核蛋白并定量。
2、制备转录因子结合探针
a.  TranSignal 探针混合物与核蛋白孵育，核蛋白抽提物中有活性的转录因子与相应的探针结合形成复合物。
b.  分离纯化复合物。
c.   洗脱探针并收集探针。
3、芯片与探针杂交
使用实验ZX优化的缓冲液和实验方法将收集的探针与所选择的转录因子芯片杂交。
4、 化学发光检测
探针与芯片杂交后，加HRP标记的链亲和素抗体与化学发光底物反应。X射线胶片曝光在胶片上显示检测结果。
5、图像采集与数据分析
a.   通过X胶片曝光，调整曝光时间使大多数spots有相同的信号强度。
b.   将胶片上的图象用扫描仪扫描并转换为灰度TIFF格式的图片文件保存。运行ScanAlyze软件，将灰度TIFF格式图片的点阵转化为数字型数据，将此原始数据储存为Microsoft Excel文件。
c.   任何spot有2倍增强或减弱都认为是有意义的，当然还需通过EMSA或luciferase reporterassay验证。

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