454(GS FLX 系统)超高通量测序技术服务

实验技术原理：GS FLX测序系统依靠生物发光进行DNA序列分析，在DNA聚合酶、ATP硫酸化酶、荧光素酶和双磷酸酶的协同作用下，将每一个dNTP的聚合与一次化学发 光信号的释放偶联起来通过检测化学发光信号的聚合与次化学发光信号的释放偶联起来，通过检测化学发光信号的有无和强度来达到实时测定DNA序列的目的。

实验操作流程：
1、样品输入并片段化
2、文库制备
3、一个DNA片段＝一个磁珠
4、乳液PCR扩增
5、一个磁珠＝一条读长
6、数据分析

 

实验注意事项：
客户提供：
1、样品量：细胞样品请提供至少5×10⁶个细胞，组织样品请提供至少100mg的组织块或切片。DNA样品请提供2μg以上的基因组DNA。
2、样品质量：DNA无明显降解，OD260/280值在1.7～1.9之间，浓度≥ 50ng/μl。
3、样品保存：细胞样品或新鲜组织块（切成～50mg的小块）用液氮速冻后，-80℃保存。DNA样品可溶于的超纯水或TE（PH8.0）中，-20℃短期保存或者-80℃长期保存。样品保存期间避免反复冻融。
4、样品运输：细胞或组织样品置于1.5 ml管中，封口膜封好，干冰运输。DNA样本放离心管或者PCR板中，密封后，冰袋运输。
5、目的基因或转录因子的相关背景资料。
交付标准：
完整项目报告（材料、试剂、仪器、方法、数据分析、实验结果）
其他：
1、单一读长达到平均200-300 bp。
2、通量更高，每个反应可以得到超过40万个序列读长。
3、读长超过200 bp时，单一读长的准确性可以超过99.5％，测学结果一致准确性大于99.99％。