硝酸银浸染糖原法染色试剂盒
产品及特点 本产品采用硝酸银浸染法对组织中的糖原进行染色,本产品特点如下:
1. 操作简单、糖原的染色浓重,重复性好。
2. 糖原着色比 Best 法和 Baner-Feulgen 法更清晰。
3. 适用于各种动物组织,由于也能对结缔组织的网状纤维(reticulum fibers)染色,故不适用于网状纤维。
4. 本试剂盒至少可以染色 100 张切片。
规格及成分 成份 编号 大纸盒包装
硝酸银浸染糖原法染色溶液 A 160519a 100 mL
硝酸银浸染糖原法染色溶液 B 160519b 100 mL
硝酸银浸染糖原法染色成分 C
160519c 3 克(10 mL
棕色塑料瓶)
125 mL 棕色塑料瓶 - 1 个
125 mL 本色塑料瓶 1 个
氨水(23%) 160519d 10 mL
4%中性甲醛固定液 160251 100 mL
四水氯化金(干粉) 160519e 1 克(原包装)
硫代硫酸钠(干粉) 160519f 5 克(用 125mL
本色塑料瓶)
使用手册 160642sc 1 份
运输及保存 常温运输和保存,有效期一年。
自备试剂 40%氢氧化钠溶液、无水乙醇、蒸馏水
使用方法1. 切片的固定:待染色的动物组织必须先使用饱和(无水乙醇做溶剂) 和中性甲醛的 9:1 混合液固定 16 小时,然后用无水乙醇洗涤 5 次,再用 氯仿-无水乙醇的 1:1 混合液洗涤 5 次,用氯仿洗涤,然后封蜡切片。 注意:本试剂盒为染色试剂盒,不提供切片固定和制备所需的相关试剂。
2. 染色前,取适量的切片,按常规方法脱蜡。注意:本试剂盒为染色试剂盒, 不提供切片脱蜡所需的相关试剂。
3. 将切片放入硝酸银浸染糖原法染色溶液 A 中浸泡 10 分钟。
4. 放入蒸馏水中 2 分钟。
5. 放入硝酸银浸染糖原法染色溶液 B 中脱色 5 分钟。
6. 蒸馏水中短暂浸泡。
7. 转入到硝酸银浸染糖原法染色溶液 C(下称溶液 C)中浸泡 12-24 小时。 溶液 C 的配制:称取 2g 硝酸银浸染糖原法染色成分 C 到 100mL 棕色塑 料瓶中(本试剂盒提供,加入 100mL 蒸馏水,摇晃溶解后即可)。
8. 转移至新鲜配制的硝酸银浸染糖原法染色溶液 D(下面简称溶液 D)中 15-30 分钟。溶液 D 的配制方法:在一干净得 100-150mL 玻璃烧杯或 三角瓶中,加入 1 克硝酸银浸染糖原法染色成分 C,再加入 10mL 蒸馏 水中,摇匀溶解。加入 11 滴 40%氢氧化钠溶液(将 4 克氢氧化钠加入 到 10mL 水中,混匀溶解即得 40%氢氧化钠溶液。注意,此溶解过程产 热),加入氢氧化钠溶液后将有沉淀产生(使用玻璃器皿的目得时便于在 此步观察沉淀的形成)。再逐滴加入氨水,直到沉淀刚好溶解即停止。Z 后补加无水乙醇到 100mL,混匀即得溶液 D。
9. 将切片放入 4%中性甲醛固定液中 5-20 秒。
10. 流水冲洗 1 分钟。
11. 浸泡在 0.2%氯化金溶液中 5-10 分钟。0.2%氯化金溶液配制方法:将 0.2 克氯化金干粉加入到 125mL 的本色塑料瓶中(本试剂盒提供),加 入 100mL 蒸馏水,摇晃溶解即得 0.2%氯化金溶液。
12. 流水冲洗。
13. 将切片放入 5%硫代硫酸钠溶液中固定 10 分钟。5%硫代硫酸钠溶液配制 方法:在已经装有 5 克硫代硫酸钠干粉的 125mL 的本色塑料瓶中加入 100mL 蒸馏水,摇晃溶解即得。
14. 流水冲洗 1 min。
15. 用常规方法进行梯度乙醇脱水、二甲苯透明和中性树胶封固。本试剂盒不 提供本步所需要的试剂。
16. 显微镜检测,糖原将呈黑色。