环丙沙星酶联免疫定量检测试剂盒

【类别】   食品安全试剂盒
【品Pai】   钰博生物/Ybscience
【用途】   仅供科研使用，不得用于临床检验。
【规格】   96T/48T
【实验方法】   定量检测( 竞争法)
【发货周期】   现货
【参考价格】   询价
【产品详情】  
【检测原理】：本试剂盒采用间接竞争ELISA方法检测蜂蜜、动物组织（鸡肉、猪肉、鱼、虾）、牛奶、奶粉和鸡蛋等样本中的环丙沙星（Ciprofloxacin，CPFX），试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂组成。检测时，加入标准品或样品溶液，样本中的环丙沙星和酶标板上预包被偶联抗原竞争抗环丙沙星抗体，加入酶标记物后，用TMB底物显色，样本吸光度值与其所含环丙沙星含量成负相关，与标准曲线比较即可得出样本中环丙沙星的残留量。
                                                                                                                             

【实验方法】：竞争法ELISA（定量）                                                                                                                         

【样本类型】：组织、蜂蜜、牛奶、奶粉、鸡蛋等样品。
                                                                                                 
【规格型式】：96孔板       

【保存条件】：试剂盒未拆开，2-8℃保存。                                                                                                          

【有效期】：6个月。                                          

【灵敏度】：0.1ppb(ng/ml)
                                                                                                                             
【检测下限】：
组织（鸡肉、猪肉、鱼、虾）…………0.3ppb 
蜂蜜 ……………………………………0.4ppb 
牛奶 ……………………………………3ppb 
奶粉 ……………………………………6ppb 
鸡蛋 ……………………………………3ppb 
                                                      【样本回收率】：
组织、蜂蜜、牛奶、奶粉、鸡蛋……85%±15% 

【组织、蜂蜜、牛奶、奶粉、鸡蛋等样品处理方法】：                                                                             动物组织（鸡肉、猪肉、鱼、虾）处理方法
1）称2.0±0.05g 均质过的组织样本于50ml离心管中；
2）加入8ml样本提取液（配液2），振荡5分钟，室温4000转/分离心10分钟；
3）取2ml清澈上层有机相至洁净干燥的10ml玻璃试管中，50-60℃水浴氮气吹干；
4）加入1ml正己烷，振荡2分钟，再加1ml复溶液（配液3），振荡30秒，室温4000转/分离心5分钟；
5）去除上层正己烷，取下层水相50µl液体用于分析。
样本稀释倍数：2    检测下限：0.3ppb
5.3.2 蜂蜜处理方法
1）取1.0±0.05g蜂蜜至50ml聚苯乙烯离心管中，加6ml样本提取液（配液2），振荡5分钟，使其充分溶解；
2）加入3ml复溶液（配液3），加入11ml二氯甲烷，振荡5分钟，室温4000转/分，离心5分钟；
3）吸去上层，取下层有机相8ml至干燥溶器中，50-60℃水浴氮气吹干；
4）用1ml复溶液溶解干燥的残留物，再加入正己烷1ml混合30秒，室温3000转/分以上，离心5分钟；
5）去除上层取下层50µl液体用于分析。
样本稀释倍数：2    检测下限：0.4ppb
5.3.3 牛奶处理方法：
1）取25µl样本液与475µl复溶液（配液3）混合，振荡1分钟，使其充分溶解；
2）取50µl液体用于分析。
样本稀释倍数：20    检测下限：3ppb
5.3.4 奶粉处理方法：
1）称取0.5±0.02g均质物至10ml聚苯乙烯离心管中，加入5ml去离子水，振荡，使其充分溶解；
2）取100µl样本液与400µl复溶液（配液3）混合，振荡1分钟；
3）取50µl液体用于分析。
样本稀释倍数：50    检测下限：6ppb
5.3.5 鸡蛋处理方法：
1）称取1.0±0.02g均质物至10ml聚苯乙烯离心管中，加入5ml去离子水，振荡，使其充分溶解；
2）取100µl样本液与400µl复溶液（配液3）混合，振荡1分钟；
3）取50µl液体用于分析。

【注意事项】：    1 室温低于25℃或试剂及样本没有回到室温（25℃）会导致所有标准的OD值偏低。
2 在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况，则会出现标准曲线不成线性，重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。
3 混合要均匀，洗板要彻底，在ELISA分析中的再现性，很大程度上取决于洗板的一致性。
4 在所有孵育过程中，用盖板膜封住微孔板，避免光线照射。
5 不要使用过了有效期的试剂盒，不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。
6 显色液若有任何颜色表明变质，应当弃之。0标准的吸光度值小于0.5个单位（A450nm< 0.5 ）时，表示试剂可能变质。
7 反应终止液有腐蚀性，避免接触皮肤。
   
【需用户自己提供的实验器材和试剂】：              
1. 96孔读板仪器。
2. 自动洗板机.
3. 移液器和枪头。建议使用多通道移液器/排枪。
4. Eppendorf 管。
5. 额外洗板缓冲液 (neutral PBS 或 TBS。试剂盒内提供足量。如需额外缓冲液可参考如下配方)。
0.01M TBS: Add 1.2g Tris, 8.5g Nacl; 450μl of purified acetic acid or 700μl of concentrated hydrochloric acid to 1000ml H2O and adjust pH to 7.2-7.6. Finally, adjust the total volume to 1L.0.01M PBS: Add 8.5g sodium chloride, 1.4g Na2HPO4 and 0.2g NaH2PO4 to 1000ml distilled water and adjust pH to 7.2-7.6. Finally, adjust the total volume to 1L.*样品准备的相关试剂也不含在试剂盒中。