系统配置
整套智能化的葡萄糖钳夹实验系统,包括了微量注射泵, 血管内埋植管路,不锈钢转镮, 拴绳,3或4通道连接头,马甲,鼠笼,饮食饮水装置等。系统配件的主要特点如下:
- 微电脑控制的微量注射泵,可以设置工作模式,多重方式编程,具有精度高,适用范围广等优势;
- 转环支架采用弹性托盘天平设计,增加了对于快速移动动物的感应灵敏度,实现清醒动物的在体灌流,取样;
- 转环的材质有塑料和不锈钢两种,双通道的不锈钢转环可以重复使用,侧边通道给药, 中间通道采血;
- 动静脉置管术使小鼠处于清醒可自由活动的生理状态,避免了麻醉及手术应激对小鼠葡萄糖代谢的影响;
- 肝素化的 PE/PVC管路,可以极大的降低管路和药物之间的反应,减少动静脉置管术后感染及导管堵塞;
- PinPort连接头是用硅胶封闭的堵头,连接在采血管末端,实现快速、无菌采血,并且可以避免气泡进入血管;
- 三通、四通连接头ZX的液体流通部位采用惰性的PCTFE支撑,药物反应少,通道之间死体积少于3 μL;
- 在体动静脉埋置管可以定制,有很强的通用性,管路长度可以满足手术的需求,经过EtO消毒处理;
- 栓绳和马甲,主要是用来固定大小鼠,能实现一次置管,多次灌流采样的目的,实验结束后快速断开;
- 大鼠的双通道马甲和小鼠的马甲结构一样,包含两个独立的port,采血的同时,实现给药或者其他干预;
实验注意事项
以动物为研究对象的高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验,除了可应用于研究以胰岛素抵抗为病理生理基础的相关疾病的动物模型,也可用于判断某些药物有无胰岛素增敏作用及其作用强度。微量保证实验的成功率,需要注意一下几点:
使用钠和水合氯醛麻醉时,实验动物会出现体温降低,呼吸不畅,呼吸频率不齐等影响葡萄糖代谢的情况,故在应用中应小心控制麻醉的剂量。
避免感染。所有手术器械要高温消毒,PE 导管、硅胶管用 75%乙醇浸泡消毒,手术过程中尽量保持无菌,切口缝合前用含有青霉素的生理盐水大量冲洗手术部位。
在实验中,特别是麻醉状态下,控制动物体温非常重要。体温与胰岛素敏感性密切相关。
小鼠动脉置管内容易凝血,文献报道动脉插管内注入含 300U 肝素的 PVP10 溶液,可大大降低动脉导管堵塞的发生率。
清醒小鼠的正糖钳夹实验需要小鼠在动静脉置管术后恢复 3-7 天进行,研究表明小鼠术后恢复时间越长小鼠敏感性越好。
实验方法
手动方式如下图, 利用注射器在红色PinPort进行手动抽血。
2. 自动采血
配合自动采血仪Instech ABS2,由计算机程序采血,还能回补IV溶液, 保持动物体液恒定。
类似的实验配备也可选配使用于小鼠实验。