人体脉络膜组织提取物说明书保存和应用：客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞，如是新鲜原代细胞，客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h，再进行后续的实验操作。如是冻存细胞，客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研，不得用于临床应用。
人体脉络膜组织提取物说明书【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
人体脉络膜组织提取物说明书【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
三七素 dencichine 5302-45-4 库存 25
三七皂苷Fc Notoginsenoside Fc 库存 26
三七皂苷Ft1 Notoginsenoside Ft1 库存 27
三七皂苷R1 Notoginsenoside R1 80418-24-2 库存 28
三叶豆紫檀苷 Trifolirhizin 6807-83-6 库存 29
108-73-6 间本三酚标准品 210mg CLIAKitforET(Mouseendotoxin)ELISAKit小鼠内毒素规格：48T/96T
Calciumhypophosphitemonohydrate普钙10毫克CP，99%
118-60-5水杨酸乙基己酯Octisalate;Octyl Salicylate
2-Amino-6-metxyl-5-nitnopyridine 22280-62-2
代二苯基膦 Chlorodiphenylphosphine,98% 1079-66-9 5G 表面活性剂
D-天门冬酰安 Nc
香叶基焦嶙酸盐，英文名或英文缩写：GPP，级别：BR，97%，规格：25克
原醋三酯，98% Trimqthyl orthoccqtctq 1442-42-0
2,3,4,5-Tetrabromothiopxene 3958-03-0
4-苯基二苯酮 4-Benzoylbiphenyl,99% 2128-93-0 25G 通用试剂
铅箔/铅/Lead 2N，0.1×100㎜ 250克 国产/进口
锌棒，英文名或英文缩写：Zinc，级别：超纯，98%，规格：50毫升
13X分子筛13X molecular sieve
人体脉络膜组织提取物说明书ACRYL-GLIDE玻璃板硅化处理试剂生物技术级100MLRT
2-羌基-1-加醋;2-酚-1-羧醋 2-xy7noxy-1-ncphthoic ccid 86-48-6
TOTALBLOTPVDFTOTALBLOT+PVDF 膜010 x 10 square cmRT
细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④人体脉络膜组织提取物说明书将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
沪公网安备 31011502008050号
