运输和保存：
Cas9稳定表达的人胃癌细胞；MKN-45-Cas9-526视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
Cas9稳定表达的人胃癌细胞；MKN-45-Cas9-526
形态特性 圆形
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞是采用慢病毒感染的方式使MKN45细胞稳定表达Cas9-Flag-Neo，经400ug/mlG418筛选得到的单克隆，经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白，可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 20%FBS；400ug/ml G418
传代方法 建议初始浓度2.0×105 cells/ml，1:3传代；4~5天１次。
传代情况 C3
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法（-）
STR Amelogenin：x,x；CSF1PO：12,12；D12S391：26,26；D13S317：8,11；D16S539：10,10；D18S51：16,16；D19S433：14,16.2；D21S11：31,31；D2S1338：18,18；D3S1358：15,16；D5S818：10,11；D6S1043：14,14；D7S820：10,11；D8S1179：13,17；FGA：19,24；Penta E：10,10；TH01：7,7；TPOX：8,8；vWA：19,19；
同工酶
染色体
5)细胞生长方式：上皮样，不规则细胞，贴壁培养。
注意事项：
（1）冻存前细胞状态，细胞Z好在对数生长期，细胞密度适合，刚刚发生细胞融合，过密或连成片的细胞状态不好，而且消化时不容易分散；
（2）冻存的密度不宜过低，10的6次方-7次方的数量级比较好，我冻存的细胞一般T25培养瓶（5*107），一瓶冻一管（1.5ml冻存管），10cm培养皿（大概10的8次方个细胞）分成两管。
（3）消化和吹打，切忌胰酶消化过度，吹打不可太用力，Z好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培养基吹打哦，不是加入冻存液再吹打。
（4）离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于肿瘤细胞株而言要求不是很严格，我从10%-90%都用过，问题不大，个人认为10%-20%可以了，能节约处就节约点嘛！另外，冻存液可以在处理细胞前配置，放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬，移入冻存管。
（5）关于“慢冻”，传统的方法，LLC细胞冻存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更长，-80度过夜，液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室，推荐使用程序降温盒，内装异丙醇，在-80度并内可以逐渐降温，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。
ERdj5/DNAJC10 Erdj5/DNAJC10蛋白抗体 0.2ml
CCR4/CD194 细胞表面趋化因子受体4抗体 0.1ml
phospho-ATF2(Ser322) 磷酸化活化复制因子2抗体 0.1ml
Rabbit anti-mouse Kappa light chain/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的兔抗小鼠k链 0.1ml
CHCHD6 卷曲螺旋结构域蛋白CHCHD6抗体 0.2ml
Junctophilin 4 连接蛋白JPH4抗体 0.2ml
PAK6 P21蛋白激活的蛋白激酶6抗体 0.1ml
phospho-c-Abl(Ser735) 磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体 0.1ml
CYP7A1 细胞色素P450 7A1抗体/胆固醇7a羟化酶 0.2ml
Rabbit Anti-Goat IgG/PE-Cy7 PE-Cy7标记的兔抗羊IgG 0.1ml
KLK13 激肽释放酶13抗体 0.1ml
腺素 英文名称 对照品 规格: 20mg/支进口/国产 含量： HPLC含量测定
维生素D2 英文名称 对照品 规格: 20mg/支进口/国产 含量： 含量测定
维生素K1 英文名称 对照品 规格: 20mg/支进口/国产 含量： 含量测定
Cas9稳定表达的人胃癌细胞；MKN-45-Cas9-526西咪替丁 英文名称 对照品 规格: 20mg/支进口/国产 含量： 鉴别
盐酸氟奋乃静 英文名称 对照品 规格: 20mg/支进口/国产 含量： TLC法检查用
盐酸丙咪嗪 英文名称 对照品 规格: 20mg/支进口/国产 含量： 检查
盐酸地尔硫卓 英文名称 对照品 规格: 20mg/支进口/国产 含量： HPLC法含量测定
盐酸唑嗪 英文名称 对照品 规格: 20mg/支进口/国产 含量： UV法含量测定
盐酸雷尼替丁 英文名称 对照品 规格: 20mg/支进口/国产 含量： HPLC法含量测定
盐酸 英文名称 对照品 规格: 20mg/支进口/国产 含量： 检查
可以重发的情况有哪些？
（1）Cas9稳定表达的人胃癌细胞；MKN-45-Cas9-526细胞运输途中遭遇的各种问题，细胞丢失、破损、漏液等，重发；
（2）冻存的细胞复苏后，绝大多数细胞未存活，重发；
（3）存活的细胞静置24小时后，绝大多数细胞未存活，重发；
（4）冻存的细胞复苏后或存活的细胞静置4小时后并且未开封，出现污染，重发；
（5）视具体情况而定。
出现问题，不予以重发的情况有哪些？
（1）Cas9稳定表达的人胃癌细胞；MKN-45-Cas9-526客户造成细胞污染，不重发；
（2）客户不正确操作致细胞状态不好，不重发；
（3）细胞状态不好，未细胞培养前3天照片的，不重发；
（4）细胞培养时经其它处理的，不重发；
（5）细胞收到2天内，未告知，不重发；
沪公网安备 31011502008050号
