人结核菌素(Tuberculin)检测试剂盒产品信息:
中文名:人结核菌素(Tuberculin)检测试剂盒
英文名:Human Tuberculin ELISA Kit
包装:48T/96T
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用途:仅供科研,不建议做其他用途!
适用范围:酶联免疫检测
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双抗体夹心法实验步骤:
一、实验前准备
实验材料:血清、血浆、体液
实验仪器:酶标比色计、96 孔板、移液枪、离心管、离心管盒
所需试剂及试剂盒:碳酸盐包被缓冲液、抗体球蛋白、吐温-20、柠檬酸、硫酸
二、实验操作
包被抗体:用包被缓冲液稀释特异性抗体球蛋白至Z适浓度(1~10 μg /ml),每凹孔加 0.3 ml,4 ℃ 过夜,或 37 ℃ 水浴 3 小时,贮存冰箱
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洗涤:移去包被液,凹孔用洗涤缓冲液(含 0.05% 吐温-20)洗 3 次,每次 5 分钟
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每凹孔加入 0.2 ml 用稀释缓冲液稀释的含抗原的被检标本,37 ℃ 作用 1~2 小时
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加入 0.2 ml 用稀释缓冲液稀释的酶标记特异性抗体溶液,37 ℃ 作用 1~2 小时或由预试实验确定作用时间
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加入 0.2 ml 底物溶液于每个凹孔 (OPD 或 OT),室温作用 30 分钟(另作一空白对照,0.4 ml 底物加 0.1 ml 终止剂)
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加终止剂:每凹孔加 2M H2SO4 或 2 M 柠檬酸 0.05 ml
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观察记录结果:目测或用酶标比色计测定(OPD 用 492 nm)OD 值
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