MicroRotofor 微型电泳槽是一种制备型等电聚焦(IEF)仪,它可以将溶液中的复杂蛋白样品按等电点不同分开。无论是单独使用还是做为完整蛋白纯化流程的一部分,MicroRotofor微型电泳槽都可以简单、快速、有效地将蛋白从复杂的蛋白混和物中分离和富集出来。使用MicroRotofor 微型电泳槽,等电聚焦(IEF)是在可自由流动的溶液中进行的。因此,每一个组分都可以非常容易地收集得到,甚至可将某些组分再进行分离。液相IEF对于分离那些在凝胶IEF介质中易于沉淀或分离不好的蛋白更有效。而且,在溶液中进行IEF能够让蛋白保持其天然等电点(pI)。,因为IEF的pH梯度是通过载体两性电解质产生的,所以用户可以随心所欲地造成任意连续的pH梯度,从而真正通过pI值筛选蛋白样品。
特点
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优势
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设计
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小量蛋白溶液体积
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- 容许研究者分析非常有限的蛋白样品
- 可以自主优化分离流程
- 与其他蛋白分离溶液兼容 (例如 Aurum 血清蛋白小型试剂盒, ReadyPrep 双向电泳净化试剂盒)
- 使用Rotofor 和小型 Rotofor电泳槽分离的组分可以用来再次分离
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易于安装
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10个组分(200–250 µl/组分)
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- 完全、彻底地从样品中筛选蛋白
- 富集特定蛋白浓度可达10倍
- 如果只需较少组分,可将组分合并
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内置Peltier半导体冷却: (2 档:-20°C或-10°C)
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- 聚焦时保持恒温将提高重复性
- 防止蛋白质水解和胺甲酰化
- 可实现蛋白质天然状态下分离 (保持蛋白的天然构向和功能)
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紧凑的外形
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技术
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液体分离介质
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- 可分离在其它介质中难溶的蛋白 (例如疏水蛋白、膜蛋白、大分子量蛋白等)
- 易于配合其它的分离方案
- 可实现蛋白质天然状态下分离
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膜核心
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- 在收集蛋白时可防止组分间液体相互流动,从而使组分更稳定
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连续pH梯度/建立特定pH值
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- 可通过等电点筛选蛋白
- 可分辨异构体
- 灵活性 — 可根据不同pH梯度
- 可与窄范围和微小范围的IPG胶条的结果相匹配
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真空收集
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一次性使用的分离腔
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可旋转腔体
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1D MicroRotofor操作图示:
实验结果1:
实验结果2:
在蛋白组学研究中,经典的双向凝胶电泳法(2-DE)对碱性蛋白及低丰度蛋白的分离存在技术障碍,但预分离技术的应用可弥补其缺陷。液相等电聚焦可有效地分离富集复杂蛋白样品。碱性胶条用于2-DE可极大地提高蛋白上样量和凝胶分辨率。将上述两种技术相结合用于碱性蛋白质和低丰度蛋白质的分离鉴定,可使碱端区域双向凝胶图谱质量显著提高,蛋白点更清晰且点数增多,质谱鉴定确信度提高,碱性蛋白和低丰度蛋白质谱鉴定成功率提高,对于蛋白组学研究具有一定的意义。