蛋白质转印印迹膜丽春红染色试剂盒产品说明书(中文版)
主要用途
蛋白质转印印迹膜丽春红染色试剂是一种旨在通过使用显色染料丽春红(Ponceau S)与蛋白质氨基基团的结合并显示红色蛋白条带,快速、敏感、可逆地检测在蛋白质转印印迹膜例如PVDF膜、硝酸纤维素膜(Nitrocellulose membrane;NC)、醋酸纤维素膜(cellulose acetate)上的蛋白成分的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。适用于WESTERN BLOT印迹膜的蛋白检测。产品即到即用,性能稳定,背景清晰,着色灵敏,可检测250纳克以上的蛋白。
技术背景
丽春红染色剂(Ponceau S)是一种水溶性的阴离子重氮染料,由重氮氨基偶氮苯二磺酸(diazotized 4-amino-1,1’-azobenzene-3,4’-disulfonic acid; Acid Yellow 9)和萘酚二磺酸(2-naphthol- 3,6-disulfonic acid;R acid)耦合到四钠盐上。其分子式为C22H12N4Na4O13S4,分子量为760.6。吸收光谱为520nm波长。带负电荷的丽春红分子与正电荷的蛋白质氨基基团结合,也可以非共价键形式与蛋白质非极性区域结合。
产品内容
染色液(Reagent A) 100毫升
去色液(Reagent B) 500毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存在室温下,避免光照,有效保证6月
用户自备
无离子水:用于染色后清洗
染色塑料盒:用于纤维膜蛋白印迹染色的容器
实验提示
实验开始前,完成蛋白质电泳和转印。然后进行下列操作。
- 将6 cm X 8 cm大小的含有蛋白的印迹膜置于染色塑料盒里
- 小心加入5毫升染色液(Reagent A),覆盖膜表面
- 室温下,孵育5分钟,或直至红色条带显现,避免光照
- 倒掉染色液(Reagent A)
- 加入适量的无离子水清洗,直至背景清晰(注意:不要过度清洗,造成褪色)
- 取出印迹膜烘干
- (选择步骤)去色处理
- 将染色后的印迹膜置于染色塑料盒里
- 加入适量的无离子水清洗
- 倒掉无离子水
- 小心加入25毫升去色液(Reagent B),覆盖膜表面
- 室温下,孵育15秒,或直至红色条带消失
- 倒掉去色液(Reagent B)
- 加入适量的无离子水清洗3分钟
- 继续各种后续,例如测序、免疫杂交等
注意事项
- 本产品为20次(6 cm X 8 cm)操作
- 用户根据膜片大小调整试剂用量
- 操作时须戴手套
- 本产品不适用尼龙膜(nylon)染色,因为尼龙膜为非中性膜
- 孵育时,避免光照
- 使用时,避免污染母液
- 本公司提供各种蛋白染色和WESTERN BLOT检测试剂产品
质量标准