碱性磷酸酶(AP)底物对硝基苯磷酸(pNPP)缓冲溶液产品说明书(中文版)
主要用途
碱性磷酸酶(AP)底物对硝基苯磷酸(pNPP)缓冲溶液是一种旨在通过碱性磷酸酶的催化,底物硝基苯磷酸水解产生可溶性黄色产物,以此鉴定碱性磷酸酶活性,进而确定目标分子表达的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于碱性磷酸酶标记的ELISA检测。产品即到即用,性能稳定,操作便捷,敏感度高,显色清晰,重复性好。
技术背景
对硝基苯磷酸((p-nitrophenyl phosphate;PNPP)受到碱性磷酸酶的水解,释放出黄色对硝基苯酚(p-nitrophenol)和磷酸(phosphate),通过分光光度仪检测对硝基苯酚(405nm),来分析碱性磷酸酶的活性,灵敏度高,特异性好。
产品内容
染色液(Reagent A) 100毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里,避免光照,有效保证3月
用户自备
培养箱:用于反应孵育
酶标板:用于ELISA操作的容器
酶标仪:用于比色分析
实验步骤
- 准备好ELISA检测的相关处理:包括固着、封阻、一抗(或生物素)处理、碱性磷酸酶(AP)标记的二抗(或链霉亲和素)以及清洗处理等步骤
- 小心加入200微升染色液(Reagent A)到酶标板的相应孔里
- 在37℃培养箱里孵育15至30分钟,或直至出现黄色,避免光照
- 加入50微升用户自备的终止液
- 即刻放进酶标仪(405nm波长)检测:获得吸光读数
注意事项
- 本产品为100毫升规格
- 操作时,须戴手套
- 染色时间可以根据情况调整,通常为15至60分钟
- 如果封闭欠佳,易造成背景颜色过深
- 本产品只能用于碱性磷酸酶(AP)标记的ELISA染色,不适合于免疫印迹染色
- 染色孵育后可以使用50微升3摩尔NaOH终止反应;终止后颜色稳定达2小时
- 如果染色过快或过深,建议稀释一抗和二抗浓度
- 本公司提供系列ELISA试剂产品
质量标准