双脱氧dNTP溶液,10mM
本产品是浓度分别为5 mM的4种ddNTP(ddATP、ddTTP、ddCTP和ddGTP),用于Sanger法测序时终止反应,也可以用于任何DNA聚合酶的终止反应。
低温运输和-20℃保存、有效期一年。
双脱氧dNTP溶液,10mM产品及特点
由于血液富含RNase,因此血液RNA非常容易降解,是临床分子生物学研究中的一个棘手的问题。为解决此问题,本公司在非冻型组织RNA保存液的基础上,开发了本产品,它具有下列特点:
1. 能快速渗透到新鲜血液细胞内,YZRNA分子的降解。保存的血液RNA常温可放置3天,4℃可放置5天,-20℃可放置3个月。
2. 操作简单,直接将本产品和新鲜血液细胞沉淀按比例混合即可。
3. 适用于人新鲜血和哺乳动物新鲜血液,不适用于陈旧血液和冻凝血液,也不适用于禽类血液和其他动物血液。
4. 重复性好,效果跟进口同类产品相当。
5. 保存的样品可直接用本公司血液RNAout提取RNA。
双脱氧dNTP溶液,10mM使用及效果
将本产品与新鲜血液样品按4:1的比例(4份本产品加1份新鲜血液)混合后即可放置。放置结束后将样品转移到离心管中,5000 g室温离心1分钟,小心吸出浅粉红色的上清液,棕红色沉淀(血细胞和蛋白沉淀)直接用于后续的总RNA提取。
1. 新鲜细胞:如果试剂没有问题,且外源性污染也可以排除,那么降解几乎都来自裂解液的用量不足。如果将裂解液直接加入培养皿中裂解细胞,一定要使裂解液能覆盖住细胞。
2. 新鲜组织:某些富含内源核酸酶的样品(如肝脏,胸腺等),即使使用电动匀浆器匀浆也不能避免RNA的降解。双脱氧dNTP溶液,10mM更可靠的方法是:在液氮条件下将组织研碎,并且匀浆时使用更多裂解液。
3. 冷冻样品:样品取材后应立即置于液氮中速冻,然后移至-70℃冰箱保存。样品决不能未经液氮速冻而直接保存于-70℃冰箱中。冷冻样品,即使是冷冻细胞,如果不在液氮条件下研磨碎,而直接加入裂解液中匀浆,RNA也比新鲜样品更容易降解。样品在与裂解液充分接触前决不能出现融化,所以研磨用具必须预冷,在碾磨过程中要及时补充液氮。样品研碎后,在液氮刚刚挥发完时,将样品迅速转移到含裂解液的容器中,立即混匀匀浆。
4. 外源RNA酶的污染:试剂,器械及实验环境中的RNA酶进入实验系统,可考虑华越洋产品:外源RNA酶清除剂(RNase remover)解决。
5. 内源RNA酶的污染:YZ剂失效或者用量不够,实验样品过多;匀浆时温度过高。
双脱氧dNTP溶液,10mMRNA提取得率低
1. 该组织或者细胞中RNA含量偏低:不同细胞和组织中RNA的丰度不同,如肝脏,,心脏等是高丰度组织(总RNA含量2-4μg/mg),脑,胚胎,肾脏,肺,胸腺,卵巢等是中丰度组织(总RNA含量0.05-2μg/mg),膀胱,骨,脂肪等是低丰度组织(总RNA含量<0.05μg/mg)。
2. 组织起始量太少或者太多:样品量过少,则细胞组织中RNA含量较低;样品量过多则可能超过裂解液的裂解能力,裂解将不完全,从而导致RNA得率低。
XYpyj19细胞培养基1套XYygtz22荧光探针和示踪剂1瓶XYfly100细胞分离液1瓶XYydyz23细胞凋亡诱导剂和YZ剂1瓶XY100407人淋巴细胞分离液A型100mLXY90307青链霉素溶液100mLXY131134Percoll100mLXY131136Ficoll-Paque介质100mLXY100601细胞核微量制备试剂盒50次XY111207动物线粒体纯化试剂盒15次(A)|15次(B)XY111208植物线粒体纯化试剂盒15次(A)|15次(B)XY120308植物叶绿体纯化试剂盒15次XY100410超快转染试剂盒1mLXY130821阿尔玛蓝细胞增殖与细胞毒检测试剂100次|500次XY111105MTT检测试剂盒500次XY121205CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒5mLXY81026一站式生物素检测TUNEL试剂盒(DAB法)10次XY81025双染细胞凋亡检测试剂盒25次|50次XY130596荧光染色细胞凋亡检测试剂盒200次XY130862DAPI干粉10mgXY130863碘化丙啶干粉10mgXY130864Hoechst 33258干粉10mgXY130865Hoechst 33342干粉10mg