溶壁酶(破壁酶)干粉本产品是一种多种水解酶的混合物,它能分解真菌细胞壁,具有广谱性和GX性这两大特点,可以用于核酸纯化和GX获得优质的原生质体,是真菌生物工程研究的重要工具酶,其效果跟国外的真菌去壁酶-Novozyme234相当。
低温运输,-20℃干燥保存(3个月以上),或4℃干燥保存(3个月以内),有效期一年。
溶壁酶(破壁酶)干粉产品及特点
由于血液富含RNase,因此血液RNA非常容易降解,是临床分子生物学研究中的一个棘手的问题。为解决此问题,本公司在非冻型组织RNA保存液的基础上,开发了本产品,它具有下列特点:
1. 能快速渗透到新鲜血液细胞内,YZRNA分子的降解。保存的血液RNA常温可放置3天,4℃可放置5天,-20℃可放置3个月。
2. 操作简单,直接将本产品和新鲜血液细胞沉淀按比例混合即可。
3. 适用于人新鲜血和哺乳动物新鲜血液,不适用于陈旧血液和冻凝血液,也不适用于禽类血液和其他动物血液。
4. 重复性好,效果跟进口同类产品相当。
5. 保存的样品可直接用本公司血液RNAout提取RNA。
溶壁酶(破壁酶)干粉使用及效果
将本产品与新鲜血液样品按4:1的比例(4份本产品加1份新鲜血液)混合后即可放置。放置结束后将样品转移到离心管中,5000 g室温离心1分钟,小心吸出浅粉红色的上清液,棕红色沉淀(血细胞和蛋白沉淀)直接用于后续的总RNA提取。
1. 新鲜细胞:如果试剂没有问题,且外源性污染也可以排除,那么降解几乎都来自裂解液的用量不足。如果将裂解液直接加入培养皿中裂解细胞,一定要使裂解液能覆盖住细胞。
2. 新鲜组织:某些富含内源核酸酶的样品(如肝脏,胸腺等),即使使用电动匀浆器匀浆也不能避免RNA的降解。溶壁酶(破壁酶)干粉更可靠的方法是:在液氮条件下将组织研碎,并且匀浆时使用更多裂解液。
3. 冷冻样品:样品取材后应立即置于液氮中速冻,然后移至-70℃冰箱保存。样品决不能未经液氮速冻而直接保存于-70℃冰箱中。冷冻样品,即使是冷冻细胞,如果不在液氮条件下研磨碎,而直接加入裂解液中匀浆,RNA也比新鲜样品更容易降解。样品在与裂解液充分接触前决不能出现融化,所以研磨用具必须预冷,在碾磨过程中要及时补充液氮。样品研碎后,在液氮刚刚挥发完时,将样品迅速转移到含裂解液的容器中,立即混匀匀浆。
4. 外源RNA酶的污染:试剂,器械及实验环境中的RNA酶进入实验系统,可考虑华越洋产品:外源RNA酶清除剂(RNase remover)解决。
5. 内源RNA酶的污染:YZ剂失效或者用量不够,实验样品过多;匀浆时温度过高。
溶壁酶(破壁酶)干粉RNA提取得率低
1. 该组织或者细胞中RNA含量偏低:不同细胞和组织中RNA的丰度不同,如肝脏,,心脏等是高丰度组织(总RNA含量2-4μg/mg),脑,胚胎,肾脏,肺,胸腺,卵巢等是中丰度组织(总RNA含量0.05-2μg/mg),膀胱,骨,脂肪等是低丰度组织(总RNA含量<0.05μg/mg)。
2. 组织起始量太少或者太多:样品量过少,则细胞组织中RNA含量较低;样品量过多则可能超过裂解液的裂解能力,裂解将不完全,从而导致RNA得率低。
XY001结核杆菌荧光定量PCR检测试剂盒 TB40/96次XY002牛病毒性腹泻/粘膜病病毒荧光定量PCR检测试剂盒 BVDV40/96次XY003牛传染性鼻气管炎病毒荧光定量PCR检测试剂盒 IBRV40/96次XY004布鲁氏菌荧光定量PCR检测试剂盒 BS40次/盒XY005炭疽杆菌荧光定量PCR检测试剂盒 BA40次/盒XY006口蹄疫通用型荧光定量PCR检测试剂盒 FMDV40次/盒XY007口蹄疫A型荧光定量PCR检测试剂盒 FMDV-A40次/盒XY008口蹄疫O型荧光定量PCR检测试剂盒 FMDV-O40次/盒XY009口蹄疫亚I型荧光定量PCR检测试剂盒 FMDV-I40次/盒XY010副结核荧光定量PCR检测试剂盒 paratuberculo sis40次/盒XY001禽流感病毒(即A型禽流感)通用型荧光定量PCR检测试剂盒 AIV-M40/96次XY002禽流感病毒H5亚型荧光定量PCR检测试剂盒 AIV-H540/96次XY003禽流感病毒N1亚型荧光定量PCR检测试剂盒 AIV-N140/96次XY004禽流感病毒H7亚型荧光定量PCR检测试剂盒 AIV-H740/96次XY004-1禽流感病毒H7N9荧光定量PCR检测试剂盒 AIV-H7N924/40次XY005禽流感病毒H9亚型荧光定量PCR检测试剂盒 AIV-H940/96次XY006新城疫病毒通用型荧光定量PCR检测试剂盒 NDV40/96次