水溶性羧基量子点与氨基分子偶联方案
【标记所需仪器与试剂】
2-20μl、20-200μl、100-1000μl 或相似量程的可调高精密及相应枪头,去离子水,磷酸缓冲
溶液,0.22μm 针头式滤器,pH 计或精密 pH 试纸(量程为 6-8),涡旋振荡器,磁力搅拌器,
待标记分子,手套,护目镜,口罩,实验服等防护用品。
【操作步骤】
- 待标记分子用磷酸缓冲液(0.01M,PH6.8)稀释至 5mg/ml
- 取一定量的量子点加入到反应器中,开始搅拌,依次加入计算好用量的 EDC 水溶液(10mg/ml)、NHS 水溶液(10mg/ml,调节 PH 至 7.0 左右),搅拌 0.5h。
- 反应结束,用 0.22μm 针头式滤器将样品过滤,测浓度。于 4℃保存。
【注意事项】
- 试剂检查:量子点样品在 365nm 紫外光照射下为发荧光的均质溶液。
- 调节 pH 时,要迅速,选择较稀浓度 NaOH 调节(建议 1M 左右),防止溶液调节过碱。
- 建议反应摩尔比为:QD-COOH:EDC:NHS:NH2-R=1:(2000-5000):(1000-2500):(5-50)。
参考比例:
|
QD-COOH(5uM)
|
EDC(10mg/ml)
|
NHS(10mg/ml)
|
NH2-R(5mg/ml)
|
实验比例
|
|
|
|
|
|
|
|
20μl
|
3.6μl
|
1.15μl
|
15μl
|
1:2000:1000:5
|
|
20μl
|
9.0μl
|
2.90μl
|
30μl
|
1:5000:2500:10
|
|
|
|
|
|
|
备注:本实验方案只供参考,具体实验需进一步确定实验条件,建议反应体系中量子点浓度
不得小于 1μM,客户可根据产品自行调整反应比例。