创伤愈合(Wound healing)是创伤后人体皮肤和表皮组织再生的自然过程。正常来说,皮肤的表皮(Z外层)和(内部或深层)存在于一个平衡的状态,以形成一个保护伤口的屏障。而当焦痂破裂,正常的伤口愈合过程便会迅速地开始。
其基本过程包括以下阶段:①止血期、②炎症期、③增生期、④成熟及重塑期。
细胞划痕实验是一种操作简单,经济实惠的研究细胞迁移/肿瘤侵袭的体外试验方法。这种方法的原理是,当细胞长到融合成单层状态时,在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域,称为“划痕”。划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。
基本步骤:1. “划痕”的制造,2. 细胞迁移期间图像的获得,3. 后期数据的处理。
传统实验方法:
细胞融合后,用枪头在细胞层表面制造划痕
实验方法缺陷:
1.人工制造的“划痕”很难保证一致性,重复性差;
2.手动划痕可能会划伤培养器皿表面的包被,进而影响实验结果。
ibidi 实验方法:
培养插件
生物相容性硅胶制成的插件,可产生确定的500μm “划痕”区域 。
适合于伤口愈合实验,细胞迁移实验,2D侵袭和共培养。
操作步骤:
其他应用:
1. 二维侵袭实验:
2. 共培养:
特点:
1. 在一定程度上模拟了体内细胞迁移的过程。
2. 非常适合研究细胞与胞外基质(ECM),细胞与细胞之间相互作用引起的细胞迁移。
3. 与包括活细胞成像在内的显微镜系统兼容,可用于分析细胞间的相互作用。
4. 研究细胞迁移的体外实验中Z简单的方法。
ibidi 培养插件与传统划痕实验比较
ibidi 培养插件提供重复性更好的实验结果
实验结果分析
数据采集:
显微镜用于评估伤口愈合的过程。根据你的关注点和兴趣,不仅可以视频显微镜,还可以进行定点的成像观察。ibidi加热与孵育系统可以直接在培养的条件下进行活细胞成像,不用将样品反复的从孵育室移至显微镜上。