重组人源血管内皮生长因子亲和琼脂糖凝胶

             重组人源血管内皮生长因子亲和琼脂糖凝胶 （rh-VEGF NUPharose）

品    名：重组人源血管内皮生长因子亲和琼脂糖凝胶（Recombinant Human VEGF NUPharose，rh-VEGF NUPharose）

目 录 号：NRPB03S

规    格：1 ml预装柱，5 ml预装柱

贮      存：20%乙醇，2~8℃保存。
运      输：2~25℃、常压、避光。
保 质 期：5年。

相关介绍： 

血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor，VEGF）又称血管通透因子（Vascular permeability factor，VPF），是胎儿和成人血管发生和血管生成过程中重要的调控因子，在增强血管的渗透性、诱导血管发生和血管生成及内皮细胞生长、促进细胞迁移、YZ细胞凋亡等方面发挥作用。

VEGF的表达水平和肿瘤内的血管生长情况呈正相关，并且和肿瘤的转移风险呈正相关，YZVEGF信号转导可以YZ多种肿瘤的发生和发展。将rh-VEGF165偶联到琼脂凝胶填料制备成的rh-VEGF165亲和琼脂糖凝胶填料预装柱可用于筛选能够同VEGF165相互作用的化合物。

技术指标：

应用举例：捕捉与VEGF165相互作用的分子

结合缓冲液：20 mM磷酸缓冲液，150 mM NaCl，pH 7.4

洗脱缓冲液I：0.1M柠檬酸缓冲液，pH 6.0

洗脱缓冲液II：0.1M甘氨酸缓冲液，pH 2.7

中和缓冲液：1 M Tris-HCl，pH 9.0

以上缓冲液需要用户自己准备！

• 5 ml rh-VEGF165亲和琼脂糖凝胶预装柱用5~10个柱床体积的蒸馏水洗去保存液；
• 用结合缓冲液平衡 5~10个柱床体积；
• 3~5 ml 目的样品经0.45 μm滤膜过滤后加载上柱；
• 用结合缓冲液冲洗 5~10个柱床体积；
• 用洗脱缓冲液I和洗脱缓冲液II先后洗脱10个柱床体积；
• 自2/3柱床体积处开始收集1个柱床体积的洗脱液，并用中和缓冲液调节其pH至中性；
• TLC双向扩散层析（图1）分析捕捉到的与VEGF165相互作用的分子。

注意事项：

• 预填柱使用简易方便，在没有仪器设备的条件下也可以完成纯化任务；
• 样品洗脱后一般pH很低，应立刻用碱性中和缓冲液（如1 M Tris-HCl，pH 9.0）将收集到的洗脱液中和到中性，或在收集容器中事先装5%~10%、pH 9.0的缓冲液（如1 M Tris-HCl或1 M 磷酸缓冲液），以利于维持目标分子的生物活性，避免目标分子失活；
• 使用时保证柱子和缓冲液的温度一致，避免柱床内产生气泡，如果已经产生气泡，可以自行重装柱子；
• 通常使用后应用4个柱床体积的0.1 M甘氨酸- HCl（pH 2.7）做再生处理，然而长期采用极端的洗脱条件将缩短亲和介质的使用寿命，每使用5次再生1次即可。

本产品使用10次后Z好先用20%乙醇洗5个柱床体积，然后再用70%乙醇洗脱5~10个柱床体积，可洗脱脂类和疏水性较强的蛋白质，恢复柱子的载量和流速。