线粒体ToxGlo™ 检测试剂盒

Mitochondrial ToxGlo™ Assay （线粒体ToxGlo™ 检测试剂盒）是一个基于细胞的检测试剂盒，采用按顺序加两次试剂的叠加检测方法来预测外源化合物对线粒体功能异常的可能影响。

当细胞短暂暴露于外源化合物时，与空载体处理的对照细胞相比，细胞膜的完整性以及细胞内的ATP 水平可能会有所改变，本检测法基于差别检测与上述两个指标改变相关联的生物标志物。首先，细胞膜的完整性是通过检测与细胞坏死相关联的一个独特的蛋白酶（“死细胞蛋白酶”）的活性有无来实现的，死细胞蛋白酶的活性采用荧光肽底物（ bis-AAF-R110 ）来测量。 bis-AAF-R110 底物不能穿透完整的细胞膜，因此在活细胞中没有信号。其次，ATP 的测定是通过加入ATP 检测试剂来进行的，该试剂能导致细胞裂解，并产生与存在的ATP 量成正比的发光信号。综合这两组数据，可以分析是线粒体功能异常还是非线粒体的细胞毒性相关的机制。

哺乳动物细胞通过线粒体（氧化磷酸化）和非线粒体（糖酵解）的途径产生ATP 。为了得到的线粒体反应，优化细胞培养的条件是必要的。用包含半乳糖的培养基来代替添加葡萄糖的培养基可能会增加细胞的氧消耗，并增加线粒体对毒性物质的敏感性。

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