呋喃唑酮代谢产物检测试剂盒
一、产品概要
硝基呋喃类药物因其具有价格便宜、KJ效果好等特点,曾经被广泛应用,作为禽类、水产和猪促生长的添加剂。但在长时间的实验研究过程中发现,硝基呋喃类药物和代谢物均可以使实验动物发生癌变和基因突变,为了保证人类的食品安全,目前各国已禁止硝基呋喃类药物作为药物添加剂添加至动物饲料中。
二、试剂原理
本试剂盒采用间接竞争ELISA方法检测蜂蜜、鱼、虾、禽、肝脏等中的呋喃唑酮代谢物(AOZ),试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂组成。检测时,加入标准品或样品溶液,样本中的呋喃唑酮代谢物和酶标板上预包被偶联抗原竞争抗呋喃唑酮代谢物抗体,加入酶标记物后,用TMB底物显色,样本吸光度值与其所含呋喃唑酮代谢物含量成负相关,与标准曲线比较即可得出样本中呋喃唑酮代谢物的残留量。
三、适用范围
呋喃唑酮代谢产物检测试剂盒可定性、定量检测动物组织(鸡、猪、牛、水产等)以及蜂蜜产品中呋喃唑酮代谢物的残留量。
四、技术指标
1 试剂盒灵敏度:0.02ppb(ng/ml)
2 反应模式:25℃,45min~15min。
3 检测下限:
组织、肝脏:0.04ppb 蜂蜜、牛奶、肠衣:0.04ppb
鱼/虾等水产品组织因有一定干扰,定量下限为0.1ppb
4 交叉反应率:
呋喃唑酮代谢物…………………100%
呋喃它酮代谢物…………………<0.1%
呋喃妥因代谢物…………………<0.1%
呋喃西林代谢物…………………<0.1%
5 样本回收率:
组织、肝脏…………………………80±25%
蜂蜜、牛奶、肠衣…………………75±15%
五、试剂盒组成
酶标板、标准液(6个)、高标准液、酶标记物、抗体工作液、底物液A、底物液B、终止液、浓缩洗涤液、复溶液
六、贮藏条件及保存期
储藏条件:试剂盒于2-8℃保存,不要冷冻。
保 质 期:该产品有效期为1年,生产日期见包装盒。
操作步骤
一、样本前处理
产品适用于牛奶、蜂蜜、组织、肠衣、肝脏、熟食等样本检测,具体处理方法参见相应说明书。
二、 酶联免疫试验步骤
将所需试剂从4℃冷藏环境中取出,置于室温平衡30min以上。
1 编 号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标准品做2孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。
2 加样反应:加标准品或样本50µl/孔到各自的微孔中,然后加酶标记物50µl/孔,再加抗体工作液50µl/孔,用盖板膜封板,轻轻振荡5秒混匀,25℃反应45分钟。
3 洗 涤:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用工作洗涤液250µl/孔充分洗涤5次,每次间隔30秒,用吸水纸拍干。
4 显 色:每孔加入底物液A 50µl,再加底物液B 50µl,轻轻振荡5秒混匀,25℃避光显色15分钟。
5终 止:每孔加入终止液50µl,轻轻振荡混匀,终止反应。
6测吸光值:用酶标仪于450nm处测定每孔吸光度值(建议用双波长450/630nm)。测定应终止反应后在10分钟内完成。