随着生物质谱技术的快速发展,蛋白质和多肽分析的分辨率、灵敏度、准确性、鉴定能力大为提高。尤其是Top-down蛋白质鉴定方法大量使用后,传统的一维、二维电泳或液相色谱等样品制备技术已经不能满足需要。分析前如何降低样品的复杂程度、获得完整蛋白质、富集低丰度蛋白质、降低高丰度蛋白质对低丰度蛋白质的干扰、保留蛋白质的各种翻译后修饰状态、提高样品处理通量等,已成为蛋白质样品制备方法的重要前提。
美国Protein Discovery公司推出了一套新颖的蛋白质分组系统—Gelfree 8100。该系统使用凝胶洗脱液相组分截留电泳技术(gel-eluted liquid fraction entrapment electrophoresis,GELFrEE),基于蛋白质分子量的不同,对完整蛋白质进行分组,使用移液器在液相中回收蛋白质。该系统能在短时间内同时处理8个样品。在3.5kDa—500kDa范围内,相对于其它传统分组方法,具有上样量大、重现性好、分辨率高、回收率高、分离速度快和操作简单的优点。能增大蛋白质组分析的覆盖范围,改善后期质谱分析的结果,提高蛋白质鉴定结果的可信度。
产品特点:
● 基于分子量的不同对完整蛋白质进行分离;
● 简化蛋白质组成的复杂程度,缩小复杂蛋白质样品的动态范围,便于使用LC-MS/MS进行Bottom-Up蛋白质组学研究;
● 蛋白质回收后保留其完整性,便于进行Top-Down蛋白质组学研究,分析翻译后修饰、蛋白质异构体、氨基酸衍生物等;
● 蛋白质分离范围高达3.5kDa—500kDa;
● 8个分组通道,满足高通量样品处理的要求,每个通道最多可将样品分为30个组分;
● 用户可根据需要自行设置蛋白质分组程序,分离纯化特定的目标蛋白;
● 样品容量大,每个通道蛋白质上样量ZG可达1mg,是普通一维电泳的5倍以上,有利于富集低丰度蛋白质;
● 样品回收率高,>80%;
● 结果高度的重现性,CV<15%;
● 电泳过程不受蛋白质疏水性或等电点的影响;
● 蛋白质样品在液相中回收,避免了传统一维、二维电泳后的染色和条带或点位切割步骤;
● 蛋白质回收后在溶液内消化,免去了费时的胶内消化步骤;
● 特别适合为LC-MS/MS、MALDI-TOF或免疫印迹等分析方法制备样品;