提供兔源多克隆抗体,鼠源单克隆抗体,标记二抗,免疫组化试剂盒,抗体制备及代测服务等.适用方法:免疫组化、免疫荧光、流式细胞检测、免疫细胞化学等.
抗体纯化完后,必须采取合适的保存,否则很容易就失去活性。总的来说有这么几个方面需要注意:(1)缓冲体系。纯化后的抗体必须处于一个相对接近体液的缓冲体系中,一般的PBS体系就足够了。注意不要引入高浓度的离子,尤其是金属离子。不要引入干扰抗体实验的离子或基团。(2)防腐剂。为了防止抗体长菌,必须加入防腐剂,常见的防腐剂有:叠氮钠、硫柳汞、抗生素(庆大霉素)。叠氮钠的常用浓度是0.02%,硫柳汞和庆大霉素的常用浓度为0.01%,其中叠氮钠会YZHRP酶活性,因此在需要偶联HRP酶的抗体中不能加这种防腐剂,而且叠氮钠会影响细胞色素氧化酶活性,会干扰机体的呼吸作用,因此操作时需要注意安全。 硫柳汞对儿童具有潜在毒性,使用时也应注意。(3)稳定剂。向抗体中加入稳定剂可以大其稳定性,常见的稳定剂有多羟基类化合物(二元醇、三元醇等,如浓度为30%-50%的甘油、乙二醇)、二糖类物质(如蔗糖、海藻糖等)、氨基酸、蛋白质(如BSA等),如果抗体需要进行标记,则不可以加入氨基酸、BSA等保护剂。(4)温度。长期不用时,抗体应该低温保存,一般采用-20℃保存。短期不用可以放在4℃,但不要超过一周。抗体JD要避免反复冻融,前面提到的加入甘油等既可以起稳定作用,还可以起防冻的作用。如果有条件,可以把抗体进行冷冻干燥形成冻干粉,放在-80℃。如果抗体尚未纯化,直接以血清的方式保存在-20℃以下,也可以很好地保证其活性。(5)浓度。和普通蛋白质一样,浓度越高就越利于保存。如果抗体浓度太低,可以采用超滤、protein A或Protein G、透析袋等方式浓缩。超滤的方式操作简单,直接将抗体装入超滤管再进行离心即可。透析袋浓缩操作也比较简单,将PEG(分子量大于8000)配成50%左右的溶液,用合适孔径的透析袋装好抗体,然后放入PEG溶液中搅拌浓缩即可。关于Protein A或Protein G浓缩的方法将在单抗纯化相关页面讲述,需要指出的是这用这两种亲和柱浓缩的损失可能比较大。(6)存储时间。抗体在-20℃并含有甘油的情况下可以存放数年至十几年(不要反复拿至温室)。在4℃存放的时间一般在一个月左右就可以有明显的效价变化。冷冻干燥的冻干粉低温可放置几十年。