美国abraxis腹泻性贝类毒素(DSP)ELISA检测试剂盒
概述
腹泻性贝类毒素检测试剂盒的原理是酶联免疫吸附测定法,用于水及水产品中腹泻性贝类毒素的定量测定。冈田酸是腹泻性贝类毒素的一种。对于水产品需要做前处理,不可以直接检测。如果需要的话阳性样品可以通过HPLC和GC/MS来验证。
保存和稳定性
试剂盒应保存在2-8℃,不要冷冻。在使用之前要把试剂盒中的溶液回复到室温(20-25℃)。有效期内试剂盒中的试剂都可以使用。
原理
试剂盒的原理是直接竞争ELISA法,通过特异性抗体来识别冈田酸。当样品中含有冈田酸时,样品中的冈田酸与冈田酸酶结合物竞争结合溶液中的冈田酸抗体。冈田酸抗体与包被在微孔板上的羊抗鼠二抗结合。经过一步洗涤加入底物溶液,产生有色反应。产生的绿色的颜色深度与样品中冈田酸的含量成反比。加入反应停止液后使颜色由蓝色转变为黄色。用酶标仪在450nm处测定吸光度值。通过绘制标准曲线来计算样品中冈田酸的含量。
7.试剂盒特性
敏感性:1.7ng/ml
重复性:标准的变异系数小于10%,样品的变异系数小于15%
特异性:
腹泻性贝类毒素检测试剂盒能检测Okadaic acid及其它DSP,它们的结合程度是不同,以下表格中展示的是相关值及交叉反映率(%CR),以下所有浓度均为ppb级。
种 类
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% CR
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种 类
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% CR
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Okadaic Acid (DTX)
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100%
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Dinophysistoxins DTX-2
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50%
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Dinophysistoxins DTX-1
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50%
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样品:水样和贝类产品
A.试剂盒组成:
1、包被二抗的微孔板(羊抗兔)
2、标准(7种)0、0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0、ng/ml
3、冈田酸抗体溶液(兔抗冈田酸)6ml
4、冈田酸酶标记物6ml
5、样品稀释液(10倍浓缩)25ml,用于稀释样品
6、5x 浓缩洗液100ml
7、显色液(底物)TMB,16ml
8、终止液12ml