含加A反应液、载体、连接酶和感受态细胞,适用于适用于平末端DNA片段的克隆,可将平末端DNA片段连接到pGM-T载体上,便于进行后续实验。
pGM-T Easy是一种GX克隆PCR产物的专用载体,它是由一种克隆载体在EcoRV酶切位点处切开,在两侧的3’端添加T而成。在平末端片段的3’端加A后可与pGM-T Easy载体连接。
试剂盒中配备了GX率的加A反应液、连接试剂、对照用超螺旋质粒和TOP10感受态细胞,可以方便的连接和转化。实验中可根据α互补原理,进行蓝白斑筛选,判断载体中有无外源基因的插入(白色克隆为阳性重组克隆,蓝色的为载体自连的克隆,具体筛选原理参考分子克隆等书籍)。克隆后,可使用T7、SP6通用引物进行测序。