低毒超效转染试剂盒
( High Efficiency Transfection Kit, HET )
货号
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英文名称
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中文名称
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包装规格
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价格
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40001
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HET
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低毒超效转染试剂盒
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50ml
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¥1,500
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产品简介
EQUL BIOTECH的低毒超效转染试剂盒(HET)可有效地转染各种哺乳动物细胞,并且对细胞基本没有毒性。可用于转染的细胞包括各种细胞株(如HEK293,NIH3T3,COS7等)和原代细胞(如成纤维细胞,成肌细胞,间充质干细胞,角质细胞,内皮细胞,上皮细胞等)。
转染前以细胞融合度不超过80%为宜。接种密度因所采用的细胞系和细胞的倍增时间而有所不同。一般而言,细胞的接种密度为3~5 × 106 cells/100-mm培养皿,1~2×106 cells/60-mm培养皿或6孔板中为6~8 ×105 cells/孔。
保存条件
本试剂盒可在室温(15~25℃)保存三个月,4℃保存一年,-20℃保存一年以上。
包装清单
产品名称
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包装
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Buffer A
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50ml
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Buffer B
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5ml
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标准操作步骤
1. 使用前预热试剂至常温。
2. 转染前一天,接种适量细胞悬液至100-mm培养皿、60-mm培养皿或6孔板中,放置到潮湿37°C 5% CO2 培养箱培养过夜。
3. 次日,吸去细胞培养液,加入新鲜培养液(不含青霉素-链霉素)。
4. 取两根无菌1.5ml eppendorf管,分别记为A、B。按下表,根据培养皿不同而加入不同体积的试剂:
100-mm 培养皿
(含5ml培养基)
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60-mm 培养皿
(含2.5ml培养基)
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6孔板
(含1ml培养基)
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A管:500μl Buffer A
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A管:250μl Buffer A
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A管:50μl Buffer A
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B管:50μl Buffer B
10~100μg DNA
无菌水补足体系至500μl
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B管:25μl Buffer B
5~50μg DNA
无菌水补足体系至250μl
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B管:5μl Buffer B
1~10μg DNA
无菌水补足体系至50μl
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5. 用移液管混匀B管中溶液并将B管中溶液轻轻逐滴加入到A管中。用气泡法混匀转染混合物,这一步尽量 在2分钟内完成,室温孵育30分钟。
6. 将混合物逐滴加入到细胞中,轻轻摇晃培养皿使混合物均匀分布在细胞表面。
7. 放置到潮湿37°C、5%CO2培养箱中培养过夜。
8. 次日早上用新鲜培养基更换细胞培养液,于37℃ 5%CO2培养箱中继续培养24-48h。
9. 检验转染效率(如荧光观察,蛋白质印迹等)易扩仪器作为Eppendorf NBS的合作经销商会为你提供优质的服务。价格ZD,顾客至上!
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作为国际上著名的生物反应器生产厂家,NEW BRUNSWICK SCIENTIFIC CO., INC.是WY能够向客户提供全面的微生物培养、植物细胞培养和动物细胞培养技术支持的公司,可向广大用户提供从实验室到中试和生产用的微生物、动物细胞、植物细胞培养的个系列发酵罐系统。公司本部拥有自己独立的细胞培养实验室和微生物发酵实验室,同时可向客户提供设备使用技术和培养技术的服务。
Celligen 310型: 专为细胞培养而设计的反应器,可以根据培养目的和培养体系的不同采用不同的培养方式和搅拌桨。其独具特色的搅拌桨设计和先进流体的动力学应用,使得Celligen Plus解决了剪切力、通气对细胞伤害,为细胞生长提供了良好的生长环境,同时又可以满足细胞生长的各种物质营养的需求,有利于高密度、大规模细胞培养。 可配备的搅拌桨有:Basket篮式搅拌桨、Cell-Lift搅拌桨、Spin Filter搅拌桨、Pitched Blade / Marine Blade搅拌桨
BioFlo 110型: 是一种模块化的、组合式的GX微生物/细胞反应器,一台主控制器可以控制最多4套反应罐体同时工作,并可按实际需要提供微生物、动物细胞、植物细胞培养。罐体总体积范围:1.3L、3L、7.5L、14L、
BioFlo 310型: 配置完善的标准型微生物/细胞反应器,可配备微生物反应罐体或细胞反应罐体,其控制系统相应的内置微生物培养和细胞培养二套不同的控制软件,合理的搅拌桨和罐体形状设计使得系统的传氧速率在350mMO2/L/Hr以上。对植物细胞培养,可配备相应的光照系统。罐体总体积范围:2.2L、5L、7.5L、14L
BioFlo 410型: 可在位灭菌微生物/细胞反应器,自带蒸汽发生装置,磁力驱动搅拌,不易染菌,升温/降温快速,适用于温度诱导型培养,大型彩色触摸控制屏,可显示各数据、及时值及趋势,并能模拟放大结果。罐体总体积范围:7L、14L、19.5L
BioFlo 5000型: 移动式中试微生物/细胞反应器,采用开放式框架结构,管道布局合理,维修简便,设计符合GMP标准。罐体总体积范围:40L、80L、120L
BioFlo Pro型: 工业用微生物/细胞反应器,是为满足工业生产要求而设计,符合GMP标准,结构简单合理,控制稳定可靠,数据采集方便,PLC控制方式,扩展性强,其所有控制元件均采用工业通用配件,采购容易,更换维修方便,并可按照用户的使用要求定制。罐体总体积范围: 75L、150L、300L、500L、1000L、1500L
工业化细胞培养系统: 提供的细胞培养装置具有剪切力低、通气与细胞不接触、装载容量大、培养细胞密度高的特点。同时细胞培养系统采用GX的细胞沉降系统,可以使得微载体装载量达到25克/升。细胞培养密度达到10的9次方个/毫升。并且有多种培养方式的搅拌桨供选择:Basket篮式搅拌桨、Cell-Lift搅拌桨、Pitched Blade搅拌桨等,适用于不同的培养方式。