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百奥莱博专业生产供应北京现货BTN80701型大肠杆菌TG1化学感受态细胞品Pai,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:大肠杆菌TG1化学感受态细胞
规格:0.1mL*10
编号:BTN80701
品Pai:百奥莱博
本产品是采用大肠杆菌DH5α菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测本产品,转化效率可达108。本产品为dam-,dcm-的菌株,能够排除dam,dcm甲基化的影响。
菌株基因型:sup E hsd Δ5 thi Δ(lad-pro AB)F+[tra D36 pro AB+lacIQlacZΔM15]
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等。
使用方法:
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL,可根据实际情况使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μL 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。
注意事项:
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA 总量较少,可取200-300μL转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
关键词:E.coli TG1 Chemical Competent Cell,大肠杆菌TG1化学感受态细胞,BTN80701
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编号 | 名称 |
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BTN80101 | 一管式病毒DNA-RNA提取试剂盒 |
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BTN131081 | 重组蛋白A/G |
BTN71201 | 动物RNA提取试剂盒(柱式Trizol) |
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BTN100880 | 四甲基乙二*(代"胺")(电泳级) |
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BTN100948 | 橙黄G溶液(电泳级) |
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BTN131139 | Deaza dGTP溶液(5mM) |
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BTN130542 | 水蛭素溶液(2万ATU/mL) |
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BTN60210 | 硫*(代"酸")链霉素溶液 |
BTN80904 | 柱式真菌RNA大量提取试剂盒 |
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BTN120101 | 谷胱甘肽琼脂糖(GST-琼脂糖) |
BTN160372 | Bielschowsky改良法神经组织染色试剂盒 |
BTN131038 | dUTP溶液,100mM |
BTN130930 | 百万碱基级血液DNA提取试剂盒 |
BTN121110 | 超快DNA-RNA两用转膜试剂盒 |
BTN130951 | 革兰氏阳性菌DNA提取试剂盒(Southern级) |
BTN130870 | 硫氧还蛋白 |
BTN90604B | PCR法DNA探针生物素标记试剂盒 |
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温馨提示:不可用于临床ZL。