南昌非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶7抗体现货供应。上海圻明生物免疫产品涵盖抗体、ELISA试剂盒,酶联检测试剂盒,分子生物学试剂盒,重组蛋白等,并能提供各类产品的专项定制服务。公司一直专注于生命科学和生物技术领域的研究,秉承“质量DY”的理念,全心全意为客户提供优质的服务。高品美誉,用心科研。
免疫组化结果的判断原则
1、抗原表达必须在特定部位:阳性表达必须在细胞核组织特定的抗原部位才能视为阳性,比如角蛋白在细胞质内,细胞核增殖抗原 (PCNA)在细胞核内,上皮细胞膜抗原(EMA)和白细胞共同抗原(LCA)在细胞膜上。
2、尽量避开出血、坏死及切片刀痕和界面边缘细胞的阳性表达:由于内源性酶的干扰和出血坏死区呈现的弥漫性成片着色属于非抗原定 位反应,判断时,应加以除外,切痕和组织周边界面也常常呈现非特异性阳性着色,这是由于界面不平整,标记试剂残留干扰所致, 也非真实抗原阳性标记。
3、对照片的设置
免疫组化的质量取决于正确使用各种对照,没有对照的免疫组化结果是毫无意义的。对照包括阴性对照、阳性对照和自身对照。在实 践中可用染色组织切片中不含抗原的组织。
作为阴性对照,而用含抗原的正常组织作阳性对照,这种自我对照具有节约的意义。观察染色结果时,先观察对照组织的结果,如阳 性对照组织中阳性细胞呈强阳性,阴性对照细胞呈阴性,内源酶阴性,背景无非特异性染色时,表明本次实验的全部试剂和全过程技 术操作准确无误,待检组织中的阳性细胞也就是可信的正确结果。
免疫组化染色中对照片的设置非常重要,它是判断您的染色是否成功的关键依据,而且也是检测每一个抗体的质量标准,常设的对照 如下:
1) 空白对照(阴性对照):DY抗体由 PBS 或非免疫血清取代。
2) 阳性对照:用已知含有要检测抗原的切片作阳性对照,是实验室比较常用的对照。
3) 回收实验阴性对照:已知抗原与相应的DY抗体混合,发生结合沉淀,再用此沉淀抗体复合物进行免疫组化实验,结果为阴性。
4) 替代对照:用于DY抗体同种动物的血清或无关抗体代替DY抗体,结果为阴性。
5) 自身对照:在同一切片上,应将不同组织成分中的阳性或阴性结果与检测目的物对照比较。如 actin、CD34 在正常组织中的血管 壁肌层应为阳性,vimentin 可以间质细胞对照,desmin 以血管壁及肌束为对照,S-l00 蛋白以小神经末梢为对照等;
如果应为阳性的组织检测结果是阳性,则免疫组化技术正确,如为阴性,则表明染色技术有问题或免疫试剂质量有问题。
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