联系电话:15527510518 18163548455 13296670271 13296673586QQ:1546342329 3176445674 试剂盒检测原理
ELISA试剂盒 检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被样本抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成ZZ的黄色。颜色的深浅和样品中的样本呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
1.酶标仪(450nm)
2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
操作注意事项
1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,ZZ结果乘以5才是样本实际浓度。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成 名称 | 96孔配置 | 48孔配置 | 备注 |
微孔酶标板 | 12孔×8条 | 12孔×4条 | 无 |
标准品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 无 |
样本稀释液 | 6mL | 3mL | 无 |
检测抗体-HRP | 10mL | 5mL | 无 |
20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释 |
底物A | 6mL | 3mL | 无 |
底物B | 6mL | 3mL | 无 |
终止液 | 6mL | 3mL | 无 |
封板膜 | 2张 | 2张 | 无 |
说明书 | 1份 | 1份 | 无 |
自封袋 | 1个 | 1个 | 无 |
注:标准品浓度都不相同,麻烦联系客服索取相应说明书
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
操作步骤
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
结果判断
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。

试剂盒性能
1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2. 灵敏度:ZD检测浓度小于(参考说明书)
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6个月
武汉纯度生物科技有限公司,主要销售常用抗原抗体、试剂、Elisa试剂盒、生化试剂盒、免疫检测试剂盒、金标试剂盒、金标检测卡、动物血清、血浆、全血、抗血清、毒素类标准品、生物试剂、培养基、实验室仪器耗材、化学试剂、生物制品、标准品、对照品、生化免疫制品、免疫亲和柱、菌株、质粒、室内质控品、细胞、培养基、PEG、病理染色液、免疫学试剂、蛋白组学试剂、细胞生物学试剂、分子生物学试剂、YZ剂、细胞因子等。武汉纯度生物时刻谨记产品质量,正如公司名一样,达到“专业规格,纯度保证”的质量生命线。公司秉承“客户为天,质量为根,诚信为本,创新为魂”的信念,将以优质的产品,完善的服务,为每一位客户的实验保驾护航。
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人载脂蛋白C1(ApoC1)酶联免疫试剂盒 Human ApoC1 (Apolipoprotein C1) ELISA Kit
人载脂蛋白C2(ApoC2)酶联免疫试剂盒 Human ApoC2 (Apolipoprotein C2) ELISA Kit
人载脂蛋白C3(ApoC3)酶联免疫试剂盒 Human ApoC3 (Apolipoprotein C3) ELISA Kit
人载脂蛋白C4(ApoC4)酶联免疫试剂盒 Human ApoC4 (Apolipoprotein C4) ELISA Kit
人载脂蛋白D(ApoD)酶联免疫试剂盒 Human ApoD (Apolipoprotein D) ELISA Kit
人载脂蛋白E(ApoE)酶联免疫试剂盒 Human ApoE (Apolipoprotein E) ELISA Kit
人载脂蛋白F(ApoF)酶联免疫试剂盒 Human ApoF (Apolipoprotein F) ELISA Kit
人载脂蛋白H(ApoH)酶联免疫试剂盒 Human ApoH (Apolipoprotein H) ELISA Kit
人载脂蛋白M(ApoM)酶联免疫试剂盒 Human ApoM (Apolipoprotein M) ELISA Kit
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人载脂蛋白A5(ApoA5)酶联免疫试剂盒 Human ApoA5 (Apolipoprotein A5) ELISA Kit
人载脂蛋白B100(ApoB100)酶联免疫试剂盒 Human ApoB100 (Apolipoprotein B100) ELISA Kit
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人凋亡诱导因子(AIF)酶联免疫试剂盒 Human AIF (Apoptosis Inducing Factor) ELISA Kit
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人水通道蛋白1(AQP-1)酶联免疫试剂盒 Human AQP-1 (Aquaporin 1) ELISA Kit
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人水通道蛋白3(AQP-3)酶联免疫试剂盒 Human AQP-3 (Aquaporin 3) ELISA Kit
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人丝裂原活化蛋白激酶14(MAPK14)酶联免疫试剂盒 Human MAPK14 (Mitogen Activated Protein Kinase 14) ELISA Kit
人天门冬氨酸氨基转移酶(AST)酶联免疫试剂盒 Human AST (Aspartate Aminotransferase) ELISA Kit
人无孢蛋白(ASPN)酶联免疫试剂盒 Human ASPN (Asporin) ELISA Kit
人血管紧张肽酶A(ATA)酶联免疫试剂盒 Human ATA (Angiotensinase A) ELISA Kit
人毛细血管扩张性共济失调突变因子(ATM)酶联免疫试剂盒 Human ATM (Ataxia Telangiectasia Mutated) ELISA Kit
人失调症蛋白1(ATXN1)酶联免疫试剂盒 Human ATXN1 (Ataxin 1) ELISA Kit
人失调症蛋白2(ATXN2)酶联免疫试剂盒 Human ATXN2 (Ataxin 2) ELISA Kit
人转录激活因子1(ATF1)酶联免疫试剂盒 Human ATF1 (Activating Transcription Factor 1) ELISA Kit
人转录激活因子2(ATF2)酶联免疫试剂盒 Human ATF2 (Activating Transcription Factor 2) ELISA Kit
人转录激活因子3(ATF3)酶联免疫试剂盒 Human ATF3 (Activating Transcription Factor 3) ELISA Kit
人转录激活因子4(ATF4)酶联免疫试剂盒 Human ATF4 (Activating Transcription Factor 4) ELISA Kit
人转录激活因子5(ATF5)酶联免疫试剂盒 Human ATF5 (Activating Transcription Factor 5) ELISA Kit
人转录激活因子6(ATF6)酶联免疫试剂盒 Human ATF6 (Activating Transcription Factor 6) ELISA Kit
人转录激活因子7(ATF7)酶联免疫试剂盒 Human ATF7 (Activating Transcription Factor 7) ELISA Kit
人腺苷三磷酸结合盒转运体G1(ABCG1)酶联免疫试剂盒 Human ABCG1 (ATP Binding Cassette Transporter G1) ELISA Kit
人腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ABCA1)酶联免疫试剂盒 Human ABCA1(ATP Binding Cassette Transporter A1) ELISA Kit
人腺苷三磷酸结合盒转运体G2(ABCG2)酶联免疫试剂盒 Human ABCG2 (ATP Binding Cassette Transporter G2) ELISA Kit
人心钠肽(ANP)酶联免疫试剂盒 Human ANP (Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit
人碱性成纤维细胞生长因子2(bFGF-2)酶联免疫试剂盒 Human bFGF-2 (Basic Fibroblast Growth Factor 2) ELISA Kit
人单酰甘油脂肪酶(MGL)酶联免疫试剂盒 Human MGL (Monoacylglycerol Lipase) ELISA Kit
人自身免疫调节因子(AIRE)酶联免疫试剂盒 Human AIRE (Autoimmune Regulator) ELISA Kit
人轴蛋白YZ蛋白2(AXIN2)酶联免疫试剂盒 Human AXIN2 (Axis Inhibition Protein 2) ELISA Kit
人天青杀素1(AZU1)酶联免疫试剂盒 Human AZU1 (Azurocidin 1) ELISA Kit
人微球粒蛋白1(MCRS1)酶联免疫试剂盒 Human MCRS1 (Microspherule Protein 1) ELISA Kit
人β淀粉样蛋白40(Aβ40)酶联免疫试剂盒 Human Aβ40 (Amyloid Beta 40) ELISA Kit
人β淀粉样蛋白42(Aβ42)酶联免疫试剂盒 Human Aβ42 (Amyloid Beta 42) ELISA Kit
人B细胞活化因子受体(BAFFR)酶联免疫试剂盒 Human BAFFR (B Cell Activating Factor Receptor) ELISA Kit
人B细胞分化因子(BCDF)酶联免疫试剂盒 Human BCDF (B-Cell Differentiation Factor) ELISA Kit
人B细胞受体(BCR)酶联免疫试剂盒 Human BCR (B-Cell Receptor) ELISA Kit
人B淋巴细胞刺激因子受体(BlysR)酶联免疫试剂盒 Human BlysR (B Lymphocyte Stimulator Receptor) ELISA Kit
人Bcl-2样蛋白1(BCL2L1/BCL-X)酶联免疫试剂盒 Human BCL2L1/BCL-X (Bcl-2 Like Protein 1) ELISA Kit
人杀菌性/通透性增加蛋白(BPI)酶联免疫试剂盒 Human BPI (Bactericidal/Permeability Increasing Protein) ELISA Kit
人成纤维细胞生长因子4(FGF4)酶联免疫试剂盒 Human FGF4 (Fibroblast Growth Factor 4) ELISA Kit
人成纤维细胞生长因子6(FGF6)酶联免疫试剂盒 Human FGF6 (Fibroblast Growth Factor 6) ELISA Kit
人乳酸脱氢酶A(LDHA)酶联免疫试剂盒 Human LDHA (Lactate Dehydrogenase A) ELISA Kit
人B细胞淋巴瘤因子10(Bcl-10)酶联免疫试剂盒 Human Bcl-10 (B-cell Leukemia/Lymphoma 10) ELISA Kit
人B细胞淋巴瘤因子3(Bcl-3)酶联免疫试剂盒 Human Bcl-3 (B-cell Leukemia/Lymphoma 3) ELISA Kit
人B细胞连接蛋白(BLNK)酶联免疫试剂盒 Human BLNK (B-Cell Linker Protein) ELISA Kit
人Bcl2同源拮抗剂1(BAK1)酶联免疫试剂盒 Human BAK1 (Bcl2 Antagonist/Killer 1) ELISA Kit
人BCL2相关死亡促进因子(BAD)酶联免疫试剂盒 Human BAD (Bcl2 Associated Death Promoter) ELISA Kit
人Bcl-2相关X蛋白(BAX)酶联免疫试剂盒 Human Bax (Bcl-2 Associated X Protein) ELISA Kit
人BCL2修饰因子(BMF)酶联免疫试剂盒 Human BMF (Bcl-2 Modifying Factor) ELISA Kit
人自噬基因(BECN1)酶联免疫试剂盒 Human BECN1 (Beclin 1)ELISA Kit
人信号素3B (SEMA3B)酶联免疫试剂盒 Human SEMA3B (Semaphorin 3B) ELISA Kit
人β2糖蛋白(β2-GP)酶联免疫试剂盒 Human β2-GP (Beta2 Glycoprotein) ELISA Kit
人β细胞素(bTC)酶联免疫试剂盒 Human bTC (Betacellulin) ELISA Kit
人β内啡肽受体(β-EPR)酶联免疫试剂盒 Human β-EPR (Beta-Endorphin Receptor) ELISA Kit
人β内啡肽(β-EP)酶联免疫试剂盒 Human β-EP (Beta-Endorphin) ELISA Kit
人β位淀粉样前体蛋白裂解酶2(BACE2)酶联免疫试剂盒 Human BACE2 (β-site APP Cleaving Enzyme 2) ELISA Kit
人BH3结构域凋亡诱导蛋白(BID)酶联免疫试剂盒 Human BID (BH3 Interacting Domain Death Agonist) ELISA Kit
人多聚蛋白1(MMRN1)酶联免疫试剂盒 Human MMRN1 (Multimerin 1) ELISA Kit
人膀胱肿瘤抗原(BTA)酶联免疫试剂盒 Human BTA (Bladder Tumor Antigen) ELISA Kit
人微纤丝相关蛋白4(MFAP4)酶联免疫试剂盒 Human MFAP4 (Microfibrillar Associated Protein 4) ELISA Kit
人Bcl2样蛋白11(Bcl2L11)酶联免疫试剂盒 Human Bcl2L11 (Bcl-2 Like Protein 11) ELISA Kit
人骨碱性磷酸酶(BALP)酶联免疫试剂盒 Human BALP (Bone Alkaline Phosphatase) ELISA Kit
人骨成型蛋白1(BMP-1)酶联免疫试剂盒 Human BMP-1 (Bone Morphogenetic Protein 1) ELISA Kit
人骨成型蛋白10(BMP-10)酶联免疫试剂盒 Human BMP-10 (Bone Morphogenetic Protein 10) ELISA Kit
人骨成型蛋白15(BMP-15)酶联免疫试剂盒 Human BMP-15 (Bone Morphogenetic Protein 15) ELISA Kit
人骨形成蛋白6(BMP-6)酶联免疫试剂盒 Human BMP-6 (Bone Morphogenetic Protein 6) ELISA Kit
人骨成型蛋白受体1A(BMPR1A)酶联免疫试剂盒 Human BMPR1A (Bone Morphogenetic Protein Receptor, type IA) ELISA Kit
人骨成型蛋白受体II(BMPR2)酶联免疫试剂盒 Human BMPR2 (Bone Morphogenetic Protein Receptor II) ELISA Kit