Phospho-Doublecortin (Ser128)磷酸化双皮质素抗体

Phospho-Doublecortin (Ser128)磷酸化双皮质素抗体
产品描述:Lyophilized or Liquid。Suppresses apoptosis in a variety of cell systems including factor-dependent lymphohematopoietic and neural cells. Regulates cell death by controlling the mitochondrial membrane permeability. Appears to function in a feedback loop system with caspases. Inhibits caspase activity either by preventing the release of cytochrome c from the mitochondria and/or by binding to the apoptosis-activating factor。
文献引用格式:Streptavidin/HRP (QiMing Biological Technology, Shanghai, China. Catalog #PB123)
应用范围:WB=1:500-2000 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 Flow-Cyt=3ug/test IF=1:100-500
抗体来源:Rabbit
免疫原:Recombinant protein
抗体规格:50μl；100μl
不管是制备单抗还是多抗，抗原的设计与制备都是一个非常重要的问题，设计或者制备得不好的抗原有可能完全不能免疫出抗体来。
一个良好的抗原必须具备的条件：
① 分子足够大。对于多肽或蛋白质类的抗原来说，一个抗原决定簇（又叫表位，epitope），通常由6-8个氨基酸残基组成。而平均每5-10kD才有一个表位，因此分子太小的多肽或蛋白是很难有一个表位的。
② 外源性强。在个体形成的早期就对自身物质形成了免疫耐受，因此如果和机体内的物质完全一样或者是相似就很难引起机体的免疫应答。如果是利用免疫赦免区的成份（如大脑、眼球、睾丸内部成份）则不必考虑外源性。
③ 结构尽量复杂。简单重复的物质是不具有免疫原性的，拿明胶来说，它的分子量非常大，而且外源性也很强，但是组成明胶的氨基酸多为直链氨基酸，在体内容易被降解，因此它的免疫原性很弱。类似地，淀粉、核酸、多聚 Lys 的免疫原性也很弱。
④ 可降解性好。作为抗原，必须是可以降解的，塑料、不锈钢等难降解的物质免疫原也很弱。由D-型氨基酸组成的物质免疫原性也很弱，同样是因为机体不能降解 D-氨基酸组成的蛋白或多肽。

包涵体的处理没有问题，可以高压破碎，也可以超声破碎。我们的建议是，DY次做，要做一个梯度洗杂，就是2M， 4M，8M尿素洗杂，如果低浓度的尿素不造成目的蛋白的溶开。可以多次洗杂。而复性的情况缓冲液的选择，要避开等电点，但疏水集聚是复性的大敌，因此要用triton x 100等去垢剂，或者5%的甘油来改善疏水集聚造成的沉淀。使用透析方法复性，要注意蛋白的沉淀，这个不如稀释法来的好，来的方便。复性上清，完全可以上柱纯化，这个没有问题。 pH的选择。其实可以选定不同的pH, 比如pH5.5的醋酸钠，pH 6.5 的磷酸钠，pH8.5-9.0左右的tris， 这些条件要摸索。 对于含有二硫键的蛋白，要考虑氧化还原氛围，通常用GSH GSSG（5 mM）来控制氧化还原条件, 但要注意GSH会造成镍柱的变色，影响结合。精氨酸（100 mM左右）是常用的复性添加成分，可以保护大部分包涵体复性过程。 

为了提供ZY质的抗体，圻明生物对每一批Phospho-Doublecortin (Ser128)磷酸化双皮质素抗体都用没有转染过的细胞系和体细胞组织检测，以保证Phospho-Doublecortin (Ser128)磷酸化双皮质素抗体有足够的亲和性足以和对应蛋白天然的表达含量起反应。

应用    稀释度*
Immunohistochemistry in paraffin section    1:50-400
Immunohistochemistry in frozen section    1:100-500
Immunocytochemistry in fixed cells    1:100-500
Western blotting    1:100-1000Phospho-Doublecortin (Ser128)磷酸化双皮质素抗体