大鼠腺苷酸代琥珀酸合成酶(AMPSS)间接法酶联试剂盒,本试剂盒仅供研究使用
规格:48人份和96 人份
使用目的:本试剂盒用于测定样本中指标的含量。
线性范围:1pg/ml--(详情咨询客服索取说明书)pg/ml
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6 个月
大鼠腺苷酸代琥珀酸合成酶(AMPSS)间接法酶联试剂盒,实验原理:本试剂盒应用间接法测定标本中指标水平。用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被微孔中依次加入已知浓度的标准品和未知浓度的待检样品,温育后,加入生物素标记的抗IgG 抗体,再与链霉亲和素-HRP结合,形成免疫复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成ZZ的黄色。颜色的深浅和样品中的指标含量呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中指标的浓度。
试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液20ml×1 瓶
2 链霉亲和素-HRP 6ml×1 瓶标准品S2(30 pg/ml) 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板12 孔×8 条标准品S3(15 pg/ml) 0.5ml×1 瓶
4 生物素标记的抗-IgG 抗体6ml×1 瓶标准品S4(7.5 pg/ml) 0.5ml×1 瓶
5 显色剂A 液6ml×1 瓶标准品S5(3.75 pg/ml) 0.5ml×1 瓶
6 显色剂B 液6ml×1/瓶
7 终止液6ml×1 瓶
8 标准品S1(60 pg/ml) 0.5ml×1 瓶
9 说明书1 份
10 封板膜2 张
![](http://item.yiqi.com/pic/ConPic/4/C1521373545776h43wd9ytwmpng_small.jpg)
标本要求
1.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
大鼠腺苷酸代琥珀酸合成酶(AMPSS)间接法酶联试剂盒,操作步骤
1. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品,其余各步操作相同)、标准品孔、待测样品孔。然后在标准品孔中加入标准品50μl,在样本反应孔中加入50 微升样本,盖上封板膜,轻轻振荡混匀,37℃温育45 分钟。
3. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用
4. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此重复4 次,拍干。
5. 加生物素标记的抗-IgG 抗体:每孔加入生物素标记的抗-IgG 抗体50μl。37℃温育30 分钟
6. 洗涤:操作同4。
7. 加链霉亲和素-HRP:每孔加入50μl 的链酶亲和素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
8. 洗涤:操作同4。
9. 显色:每孔先加入显色剂A 50μl,再加入显色剂B 50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10 分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。测定应在加终止液后15 分钟以内进行。
计算:以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD 值待入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
大鼠腺苷酸代琥珀酸合成酶(AMPSS)间接法酶联试剂盒,注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 如标本中待测物质含量过高(样本OD 值大于标准品孔DY孔的OD 值),请先将样本稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请ZH乘以稀释倍数(×5×n)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.本试剂不同批号组分不得混用。显色剂B 请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
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大鼠腺苷酸代琥珀酸合成酶(AMPSS)间接法酶联试剂盒