猪旋毛虫(Trichinella)ELISA试剂盒

猪旋毛虫(Trichinella)ELISA试剂盒运用双抗体夹心ELISA酶联免疫法定量测定血清、血浆或其它相关生物液体样本中指标含量或指标存在与否。
产品规格：48T/96T
长期大量现货供应，仅供体外科研使用，不得用于临床诊断
【实验方法】夹心ELISA 
【样本类型】血清、血浆、细胞上清 
【产品型式】96孔板，可拆 
【贮存方法】2-8℃保存。 避免不必要的重复溶解
【样本体积】50μl
【回收率范围】81%-106% 
【平均回收率】0.93 
【板间变异系数】2.5%-4.4% 
【板内变异系数】3.1%-6.8%
【敏感性】<10pg/ml。敏感性/ZD检测浓度计算方式：敏感性等于20个空白对照孔的平均O.D.值加上2个标准差后对应的浓度。样品的O.D.读数只有在高过敏感性指标的时候才具有统计学显著性。
【检测范围】检测范围不代表敏感性。检测范围是以常见样品的指标表达量为参照

操作步骤
1 准备试剂和标准品
2 每孔添加100μl样品和标准品，37℃反应90分钟，不洗。
3 每孔添加100μl生物素标记抗体，37℃反应60分钟。
4 0.01M TBS洗涤3次。
5 每孔添加100μlABC，37℃反应30分钟。
6 0.01M TBS洗涤5次。
7 TMB37℃避光反应30分钟以内。
8 加入TMB终止液，读数。
猪旋毛虫(Trichinella)ELISA试剂盒实验前预备
1、使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC)，试剂不能直接在37℃溶解。
2、标准品(冻干品)：每瓶标准品加入标准品稀释液1mL，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为 10,000pg/mL(贮液)。先将其稀释为5,0000pg/mL(标准曲线ZG浓度)后，再准备7个稀释标准品的EP管，每个EP管中加入500μL的标准品稀释液，依次倍比稀释成 5,000pg/mL，2,500pg/mL，1,250pg/mL，625pg/mL，312pg/mL，156pg/mL，78pg/mL，标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
3、检测溶液A及检测溶液B：Detection A 及Detection B 在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。临用前分别以检测稀释液 A 或 B1:100 稀释(如：10μL 检测溶液 A/990μL 检测稀释液 A)，充分混匀，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100μL/孔)，实际配制时应多配制0.1-0.2mL。
4、浓洗涤液：用 580mL 蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL，进行30倍稀释。
5、底物溶液：请用灭菌的移液器吸头吸取所需体积的 TMB 至另一干净容器中使用，容器中剩余的底物应予丢弃，不要倒回TMB瓶中。
猪旋毛虫(Trichinella)ELISA试剂盒实验注意事项
1、手工洗板方法：吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将推荐的洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内，浸泡1-2分钟，根据需要，重复此过程数次。
2、自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套试剂才能保证检测效果，因为所有试剂都是有关联的，不能混用其他制造商的产品。只有严格遵守KA&M-BIO试剂盒的说明操作才会得到ZJ的检测结果。
4、在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染，试剂避免受到微生物的污染，因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
5、浓洗涤液会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。 
6、刚开启的酶标板孔中可能会有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
7、所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。
8、有效期：6个月。
猪旋毛虫(Trichinella)ELISA试剂盒需要自备的实验器材与试剂：
1. 96孔读板仪器。
2. 自动洗板机.
3. 移液器和枪头。建议使用多通道移液器/排枪。
4. Eppendorf管。
5. 额外洗板缓冲液 (neutral PBS 或 TBS。试剂盒内提供足量。如需额外缓冲液可参考如下配方)。
0.01M TBS: Add 1.2g Tris, 8.5g Nacl; 450μl of purified acetic acid or 700μl of concentrated hydrochloric acid to 1000ml H2O and adjust pH to 7.2-7.6. Finally, adjust the total volume to 1L.
0.01M PBS: Add 8.5g sodium chloride, 1.4g Na2HPO4 and 0.2g NaH2PO4 to 1000ml distilled water and adjust pH to 7.2-7.6. Finally, adjust the total volume to 1L.猪旋毛虫(Trichinella)ELISA试剂盒